进境荷兰郁金香种苗中南芥菜花叶病毒的鉴定

为了防止南芥菜花叶病毒(Arabis mosaic virus,ArMV)传入我国,采用血清学、分子生物学、电镜观察及生物学接种等方法对从荷兰进口的郁金香种苗进行了ArMV检测。结果表明:ArMV血清学反应为强阳性;RT-PCR反应扩增出370bp的特异性目标条带;RT-PCR产物与已报道的3个ArMV部分外壳蛋白基因的核苷酸序列同源性为91.00%～93.24%,氨基酸序列同源性为99%～100%;免疫电镜观察到叶片病汁液中含有直径约30nm的球状病毒粒体;该病毒在黄花烟、白肋烟、矮牵牛和昆诺藜等鉴别寄主上引起坏死和褪绿等典型症状,经DAS-ELISA检测,这些接种寄主均呈ArMV血清学阳性反应。故将该病毒鉴定为南芥菜花叶病毒。     

苹果6–磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因Md6PGDH1的克隆和功能分析

以‘嘎拉’苹果为材料,克隆了6–磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因Md6PGDH1(序列号:MDP0000279299)全长。序列分析显示,该基因包含一个长为1 047 bp完整的开放阅读框,编码347个氨基酸,分子量为36.430 k D,预测等电点为9.24。同源性分析表明Md6PGDH1还有另外3个同源基因;功能域分析表明Md6PGDH蛋白含有两个保守的绑定域;亚细胞预测表明Md6PGDH定位存在差异。分析Md6PGDH1启动子发现存在多个响应非生物胁迫的顺式作用元件。定量分析显示,Md6PGDH1在苹果的不同组织中都有表达,且受非生物胁迫诱导。原核诱导Md6PGDH1蛋白并进行蛋白酶活的测定,为后续蛋白功能鉴定奠定了基础。Md6PGDH1在苹果愈伤组织中过量表达,提高其抗盐胁迫的能力。     

苹果愈伤组织超表达MdNAC029促进花青苷积累

以‘光辉’海棠(Malus spectabilis‘Guanghui’)与‘王林’苹果(Malus×domestica‘Orin’)杂交后代中分离出来的红肉苹果果实为试验材料,克隆得到1个NAC(NAM,ATAF1/2,CUC2)转录因子基因,命名为MdNAC029。该基因开放阅读框(ORF)为843 bp,编码含有280个氨基酸的蛋白。保守结构域分析显示,MdNAC029蛋白在N端包含1个保守的NAC结构域。基因表达分析显示该基因在红肉苹果果实中表达量较非红肉果实高。在‘王林’苹果愈伤组织中超表达MdNAC029,其花青苷积累显著增加,表明MdNAC029在调控花青苷积累过程中发挥重要作用。对MdMYB1启动子序列进行分析,发现其序列包含1个MdNAC029转录因子的结合位点。同时,烟草瞬时表达试验显示,MdNAC029能够激活MdMYB1基因的表达。由此推测,MdNAC029可能通过直接促进MdMYB1基因的表达,正向调节花青苷的积累。     

涂蜡对甜橙采后生理生化变化的影响

甜橙果实采后涂蜡可抑制贮藏初期呼吸强度的10.34—20.51％,能较明显地降低抗坏血酸和过氧化物酶活性,由于蜡液的封闭效应,导致果实内部乙烯、乙醇含量的积累升高,果皮细胞质膜透性和果实内PG活性的增大。贮藏1个月,乙醇积累量较对照增升13.15—14.26％,质膜透性增大11.06—42.62％,PG活性增大20.41％,不同的蜡液对果实生理生化变化的影响程度不同。     

法国野燕麦单粒种子DNA 快速提取方法的比较

本文以法国野燕麦作为材料,比较了CTAB、SDS、NaOH裂解3种方法提取单粒种子DNA的效果,根据核糖体DNA的PCR扩增结果,结合准确、快速和简便的原则,挑选出快速提取单粒种子DNA的方法,为杂草种子快速分子鉴定打下基础。     

彩叶栾树新品种‘晋栾2号’

栾树新品种‘晋栾2号’是从‘锦叶栾’种子实生苗中选育而来。早春幼叶、叶柄、嫩枝为橙红色,随后叶色逐渐变为黄色,夏季成熟叶片呈现黄绿色,秋季霜冻后转褐黄色。小叶片小,基部偏斜程度强。枝条顶端节间短,叶柄呈水平伸展状,形成盘状冠顶。主要依靠嫁接繁殖;适宜在有栾树分布的中国北部及中部地区种植。     

猪痢疾:防重于治

猪痢疾或者血样腹泻是一种细菌性肠道疾病,临床表现多样化,由厌氧螺旋体猪痢疾短螺旋体(Brachyspira hyodysenteriae)引起。自欧盟禁止在动物生产中使用抗生素生长促进剂以来,猪场的猪痢疾问题已经日益凸显。由本病引起的严重经济损失以及此细菌对抗生素的广泛耐药性促使猪场需要采取合理的预防措施。     

快速检测兔支气管败血波氏杆菌环介导等温扩增(LAMP)方法的建立及应用

利用Primer ExplorerV4软件,针对兔波氏杆菌16S rRNA基因设计4条LAMP引物,优化反应条件,检测特异性、敏感性并对临床样品进行检测.结果显示,LAMP反应在62℃恒温扩增1h即可完成,操作简便,不需要PCR仪等复杂仪器,结果可经电泳检测及肉眼观察;具有良好的特异性;敏感性为普通PCR的100倍,最低可检测到1.65×10-6 mg/L的细菌基因组DNA.用建立LAMP检测方法对32份疑似兔支气管败血波氏杆菌(Bb)样品检测呈阳性,与PCR检测结果相符.该方法的建立为Bb的临床快速检测提供了新的思路.     

纤维素酶酶活的测定方法

饲用纤维素酶在饲料工业中已普及应用 ,对其质量检测显得日益重要。纤维素酶是一种复合酶 ,按作用底物的能力划分为两部分 ,一部分是对棉花纤维素能起催化水解作用的酶 ,称为Ｃ1 酶 ;另一部分是对羧甲基纤维素钠 (Ｎａ -ＣＭＣ)起水解作用的酶 ,称为Ｃｘ 酶。据此 ,一般采用两种测定方法 ,一种是适用于ＣＸ 酶的ＣＭＣ法 ,另一种是适用于Ｃ1 酶的滤纸法。下面就此两种方法作一介绍。1　ＣＭＣ(羧甲基纤维素 )法1 1　材料1 1 1　饲用纤维素酶　由河南省科学院生物研究所提供。1 1 2　试剂　磷酸氢二钠、柠檬酸、羧甲基纤维素、3,5 -二硝…     

不同粒径生活垃圾堆肥组配基质特征及其对黑麦草的生态作用

将生活垃圾堆肥通过筛分的方式分为5个粒径等级,并与土壤混合成为草坪组配基质,研究了不同粒径生活垃圾堆肥组配基质的特征及其对黑麦草的生态作用.结果表明:不同粒径堆肥加入土壤中,可显著地改善组配基质的理化性质,提高肥力,不同组配基质的重金属含量存在明显差异.组配基质能有效地提供养分,促进光合,加速草坪植物生长,改善草坪植物色泽,尤其以基质1和基质2的效果最佳.在整个生长期内,基质1和基质2建植草坪的植物地上生物量分别是对照的153.49%和150.77%,地下生物量分别是对照的222.16%和211.34%;叶绿素含量分别是对照的149.06%和133.02%.