生防菌株B56-3防治猕猴桃溃疡病的初步研究

从猕猴桃根际土壤分离到的生防菌株B56-3对猕猴桃溃疡病菌具有较强的抑菌活性。盆栽试验结果表明该菌株的发酵滤液对猕猴桃溃疡病菌有较强的保护作用;田间试验结果表明,采用喷雾和病斑刮除涂抹相结合的方法防治较佳,稀释100倍的B56-3发酵滤液的治疗效果和病斑治愈率分别可达86.5%和91.4%。此外,施药后植株的SOD和POD酶活性变化趋势大致相同,先迅速增强,中间保持一段时间的高活性,后缓慢下降,最后保持一个相对较高的水平。     

南芥菜花叶病毒外壳蛋白的克隆表达及抗血清的制备

依据报道的ArMV外壳蛋白基因(coat protein,cp)序列设计引物,通过RT-PCR扩增得到长约990bp的ArMV cp基因亲水基团部分片段,将目的片断克隆到原核表达载体pEGX-6p-1中,构建ArMV cp基因与GST蛋白融合表达载体pEGX-cp,重组载体化大肠杆菌BL21,经IPITG诱导后,融合蛋白GST-cp得到了特异表达。用12%的SDS-PAGE分析结果表明,表达产物大小为63.2 kDa主要以包含体的形式存在。用冰冷的KCl显色,分离表达的蛋白质特异条带制备抗体,免疫家兔后得到特异性较强的抗血清,经酶联免疫法检测效价为1∶100 000。     

表型混合:大麦黄矮病毒两个相关株系的依赖传播机制

用受大麦黄矮病毒MAV和PAV株系单一侵染或复合侵染的单株燕麦来研究存在PAV株系的情况下,MAV依靠禾缢管蚜传播的机制。用双点酶联免疫吸附法进行检测。病毒粒子用PAV多克隆抗体吸附,PAV多克隆抗体是由双重侵染的燕麦制备,因此它与MAV的单克隆抗体也有反应。当病毒粒子被PAV多克隆抗体吸附后,进行薄膜饲毒检测,发现禾缢管蚜传播MAV的百分率明显下降,这一结果表明,在受MAV和PAV双重侵染的情况下,一些病毒粒子含有多种抗原决定基,因此表型混合是MAV依赖PAV进行传播的原因。     

大麦条纹花叶病毒中国株CP基因克隆分析、原核表达及抗血清制备

 首次用PCR方法,自大麦条纹花叶病毒中国株(BSMV-CH)的RNA₂(GenBank登录号为:AY789694,未报道)中扩增出外壳蛋白(coat protein,CP)基因,并亚克隆到pMD18-T载体上进行测序分析。结果表明BSMV-CH的CP全长597bp,它与BSMV其它株系CP的核苷酸同源性和氨基酸同源性分别为93.1%~93.8%和91.4%~92.4%;与同属的早熟禾半潜病毒(PSLV)和剪秋罗环斑病毒(LRSV)的核苷酸同源性分别为53.0%和41.8%,氨基酸同源性分别为48.1%和40.0%。根据大麦病毒属病毒已经报道的CP氨基酸序列绘制系统发育树,分析表明分离的各毒株在进化上存在明显地理位置的相关性。把CP基因亚克隆到GST融合表达载体pEGX-6p-1上,优化IPTG诱导终浓度后,在37℃ IPTG终浓度为1.0mmol/L时,融合蛋白GST-CP在大肠杆菌BL21中得到了特异表达。12% SDS-PAGE表明,表达产物大小为48.5kDa,主要以包含体形式存在。对蛋白进行定量后,用冰冷的KCl显色,分离表达的蛋白质特异条带制备抗原,免疫家兔得到抗血清,酶联法(enzyme-linked immunosorbant assay,ELISA)测定的抗血清效价为1/6 400。用抗血清对感病大麦和健康大麦进行检测,结果表明抗血清有很高特异性。     

应用3.85%病毒必克防治番茄病毒病

室内生物学测定表明,3.85%病毒必克可湿性粉剂接种前施药 ,对黄瓜花叶病毒的抑制作用明显高于对照药剂 ,防效达86.7% ,接种后施药抑制效果依然显著 ,达到78.57%。小区药剂对比试验,3.85%病毒必克可湿性粉剂500倍液喷雾 ,对番茄病毒病的防治效果达76.5%。     

西北地区小麦黄矮病流行分析及人工神经网络模型的构建

对西北地区半干旱气候区小麦黄矮病1992—2009年发生、流行情况进行长期监测、分析,选择制约小麦黄矮病发生、流行的23个因素,利用三层人工神经网络可以逼近任意连续函数,对非线性预测系统进行模拟处理的特点,分析所选预测分子,提出一套完整的建立BP人工神经网络模型的方法,并建立陕西省BP神经网络长期预测模型。对1992—2006年数据进行网络训练,利用2007—2009年数据进行测试。结果表明,以发病率为指标,输出结果误差在0.001~0.034之间;以发病级别作为预测结果,模型计算得出的数值与实际病级完全吻合,准确率为100%。说明利用神经网络建立小麦黄矮病预测模型是可行的。     

烟草野火病土壤颉颃细菌的筛选和鉴定

从植物根系的土壤中分离到127个细菌分离物,皿内实验筛选出对烟草野火病有抑制作用的菌株6个,盆栽试验表明,菌株S1对烟草野火病兼有保护和治疗作用,防效分别为85.98%和76.95%,同时菌株S1对植株还具有明显的促生作用。经鉴定菌株S1为芽孢杆菌属枯草芽孢杆菌。     

贝莱斯芽孢杆菌RJW-5-5对烟草赤星病菌的拮抗研究

从山西运城盐湖泥中采样获得了贝莱斯芽孢杆菌RJW-5-5,为了确定其固体发酵产出的次代菌株是否有效拮抗烟草赤星病菌,进行了贝莱斯芽孢杆菌菌株RJW-5-5的固体发酵,接着使用其次代菌株JW-5-AN和烟草赤星病菌进行平板对峙试验,并建立了一种平板对峙试验描述方法,提出了几个平板对峙试验描述术语,再结合显微检测,结果表明,贝莱斯芽孢杆菌JW-5-AN拮抗烟草赤星病菌,其进攻型拮抗速率为5.56 mm/d,防御型拮抗指数为0.5760,固体发酵次代菌株JW-5-AN的平板检测结果为5×108CFU/g.这表明贝莱斯芽孢杆菌菌株RJW-5-5具有研发防治烟草赤星病菌微生物菌剂的潜力.     

72%霜脲·锰锌防治黄瓜霜霉病药效试验

田间试验表明,72%霜脲·锰锌可湿性粉剂稀释94～125g/667m2,对黄瓜霜霉病的防效在84.88%～92.62%之间,明显优于70%代森锰锌可湿性粉剂94g/667m2的防效,可较好地控制黄瓜霜霉病的危害.