樱桃离体叶片高效再生的影响因素

利用基因工程技术将外源的抗病基因导入受体植物,使受体获得抗病性,已成为抗病育种的一个新途径。叶片是基因工程操作中常用的受体材料,本实验以几个樱桃树种、品种为试材,系统研究了影响樱桃叶片再生的几个因素,旨在为基因转化提供一个高效、稳定的植株再生体系。1材料和方法1     

梨韧皮部特异表达启动子AtSUC2驱动下的GUS基因的转化和表达

 以 ‘Old Home’ 梨无菌苗叶片为外植体, 利用根癌农杆菌介导将专一在韧皮部表达启动子AtSUC2 驱动下的GUS 基因转入 ‘Old Home’中。筛选出了‘Old Home’ 梨叶片高效遗传转化的最佳条件：农杆菌和外植体在液体培养基上共培比在固体培养基上共培转化率提高5倍。 PCR分析和Southern 杂交鉴定表明GUS 基因已整合到转基因植株的基因组中,组织化学检测和Western 杂交鉴定证明了GUS 基因在转基因植株韧皮部中的表达。     

李胚轴和子叶再生不定梢观察

以红美丽李成熟果实的胚为试材,研究了胚轴和子叶的不定梢再生。结果表明：在附加ＢＡ５ｍｇ／Ｌ,ＩＡＡ０．３ｍｇ／Ｌ的ＬＳ培养基,胚轴和子叶的再生率分别是２２．２％、４６．２％。附加ＡｇＮＯ３ ４ｍｇ／Ｌ对子叶的不定梢再生有促进作用。     

苹果矮化砧‘71-3-150’对冷胁迫的生理与转录组响应

为探索苹果矮化砧木抗寒的生理和分子机制,筛选抗寒相关基因,分析了苹果高抗寒矮化砧木‘71-3-150’在冷胁迫(4℃)0、2、6、12和24 h时的膜伤害、活性氧代谢、渗透调节物质积累等生理指标及转录组的变化。结果表明:‘71-3-150’在冷胁迫0~2 h即表现出抗氧化和渗透调节反应,6 h后SOD、CAT等活性氧清除酶活性及主要渗调物质维持在较高水平趋于稳定,膜伤害加重趋势缓解,说明其具有快速响应冷胁迫的生理机制,0~6 h是其冷适应的关键时期;转录组分析表明,0 h vs 2 h、0 h vs6 h、0 h vs 12 h和0 h vs 24 h等比较组分别含有491、1 115、828和1 047个上调差异表达基因及537、688、708和1 016个下调差异表达基因,其中4个组共有的115个上调基因和136个下调基因表现为6种表达模式;筛选出28个‘71-3-150’冷适应过程中存在显著差异表达的功能基因与转录因子基因,调控低温信号感知与传导的基因在0~2 h出现显著性上调表达,参与渗透调节、活性氧代谢、膜和蛋白保护等过程的基因随低温处理呈现多样性表达模式,表明该砧木在冷适应过程中存在快速和多样的低温信号感知、转导和响应的分子机制。     

极早熟李品种"红美丽"的组织培养与快速繁殖

[目的]建立极早熟李优良品种"红美丽"的组织培养快繁技术体系。[方法]以半木质化的嫩枝茎段为外植体,研究基本培养基对腋芽萌发的影响。以试管苗为试材,研究基本培养基及不同浓度的植物生长调节物质对试管苗增殖及生根的影响。[结果]以半木质化的嫩枝茎段为外植体进行腋芽的启动培养,QL比MS明显提高腋芽萌发率;试管苗增殖培养以WPM最佳,其次为MS和QL;不同生长素浓度上的生根率无显著差异,但较高浓度(2 mg/L)IBA上的平均单株生根数显著高于较低浓度(1 mg/L)IBA上的。最佳生根培养基为MS+2 mg/L IBA+0.5 mg/L NAA,生根率为83.5%。[结论]该研究为"红美丽"李无病毒苗木的生产及利用生物技术育种方法进行品种改良奠定了研究和技术基础。     

莱阳矮樱桃成熟胚子叶不定梢诱导研究

中国樱桃是落叶果树中果实成熟最早的树种。莱阳矮樱桃是中国樱桃的一个矮化品种，具有很高的开发利用价值。它既可以直接用以栽培生产，也可以用做欧洲甜樱桃的砧木，是一个品种和砧木兼用型优良品种，但其果实小，不耐贮运，迫切需要改良。樱桃的常规杂交育种困难：一是得到杂交种子困难，樱桃花经人工去雄授粉杂交。结实率非常低；二是育苗困难；杂交种子必须在果实采收后立即湿藏，然后经低温层积处理．翌年播种出苗，而且常规杂交育种周期长。     

大马牙枣的引种表现及栽培技术

大马牙枣是在天津市静海县农户庭院中发现的优良变异单株,2010年3月由山东省无棣县小泊头镇林业站引进试栽。经过5年的观察,大马牙枣表现生长势强旺,树冠形成快,早实、丰产,嫁接当年结果,第2年进入结果期,第3~4年丰产,平均株产17.5kg。果实长椭圆形,棕红色,平均单果重17.4g,8月上旬开始着色脆熟,9月上旬基本采摘完毕,抗逆性较强。总结了配套丰产栽培技术。     

乙烯抑制剂AgNO3对梨叶片再生不定梢的促进作用

该实验研究了乙烯抑制剂ＡｇＮＯ３对梨叶片再生不定梢的促进作用。ＡｇＮＯ３浓度在０．１￣８ｍｇ／Ｌ范围内对叶片再生不定梢都有明显的促进作用。添加ＡｇＮＯ３ ２ｍｇ／Ｌ的培养基上,叶片不定梢再生率最高,达７５％,而不加ＡｇＮＯ３的对照培养基上,再生率仅为１５％。     

甜柿下胚轴再生不定植株的研究

研究获得了次郎甜柿成熟胚下胚轴再生的不定植株。在大量元素铵盐减半的ＭＳ培养基上附加玉米素１．５ｍｇ／Ｌ,ＩＡＡ０．０１ｍｇ／Ｌ,暗培养３周后转光培养,下胚轴不定梢再生率为３３．３％。不定梢在１／２ＭＳ＋ＩＢＡ０．３ｍｇ／Ｌ＋蔗糖２％的培养基上生根率为７８％。     

九月菊桃成熟胚诱导不定梢的研究

以晚熟优良品种九月菊桃为试材，设7种不同培养基，8种不同外植体及2种光因子，共计24个处理，进行试验。结果表明，基本培养基以MS最好，其次为改良K和WPM，AP无效。不同外植体的不定消发生率，以全胚最高，其次为去子叶胚，对子叶进行切块比切伤再生率高，切4块比8块再生率高，先暗处理比不暗处理再生率高。