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11.
以柑橘溃疡病菌特异性高的假定蛋白基因(登录号:AE008923.1)为靶标,设计并筛选4条引物来特异性识别靶标序列中的6个独立区域,建立柑橘溃疡病菌LAMP实时浊度检测方法。该方法利用实时浊度仪检测反应过程中产生的焦磷酸镁白色沉淀,实现对LAMP整个反应过程的实时监控。从镁离子浓度、甜菜碱浓度、dNTPs浓度、引物浓度和反应温度5个变量参数对 LAMP检测体系进行优化,并对方法的特异性、灵敏度、稳定性及实际样品检测效果进行评价。结果显示,该体系经优化后稳定性良好,可在66 ℃ 恒温条件下,60 min内完成检测;DNA检测下限可达0.02 ng/μL,灵敏度与荧光定量PCR方法相同,比常规PCR方法高1个数量级;能快速、准确地对田间疑似样品进行检测,与荧光定量PCR方法的检出情况一致,没有漏检。结果说明柑橘溃疡病菌实时浊度LAMP检测方法操作简便、所需时间短,特异性与灵敏度高,为柑橘溃疡病菌的快速筛查提供较好的途径。 相似文献
12.
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选择6头荷斯坦奶牛研究添加预混料和复合缓冲剂对奶牛产奶量和乳脂成分的影响。试验采用3×3重复拉丁方设计,分3组处理:(Ⅰ)基础日粮+1%市售商品预混料(对照组);(Ⅱ)基础日粮+1%新型预混料;(Ⅲ)基础日粮+1%新型预混料+复合缓冲剂。结果表明:1)试验Ⅲ组的粗蛋白质、粗脂肪、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维的表观消化率均高于其他两组,但差异不显著(P>0.05)。2)试验Ⅲ组产奶量为23.98kg/d,比试验Ⅰ组和试验Ⅱ组分别提高5.78%和3.67%,且差异极显著(P>0.05);试验Ⅲ组的乳脂率、乳蛋白、乳糖和非脂固形物均显著高于试验Ⅰ组和试验Ⅱ组。3)试验Ⅲ组奶牛血糖含量为86.83mg/dL,极显著高于试验Ⅰ组和试验Ⅱ组;试验各组血清尿素氮含量无显著差异(P>0.05)。 相似文献
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离子对反相高效液相色谱法测定盐酸氨丙啉在鸡肉中残留方法的建立 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:建立检测鸡肉中盐酸氨丙啉的离子对反相高效液相色谱法。方法:乙腈处理鸡肉组织,正己烷液-液分配除去脂肪等杂质,W atersOasisHLB固相萃取柱进行净化处理。色谱柱为SunfireTMC18(250 mm×4.6 mm,5μm)柱,以甲醇-5 mmol/L庚烷磺酸钠水溶液(40∶60)(其中每100 mL 5 mmol/L庚烷磺酸钠水溶液含冰醋酸2.4 mL,三乙胺0.6 mL)为流动相,流速1.0 mL/m in,检测波长为270 nm,柱温:30℃。结果:盐酸氨丙啉在0.05μg/mL~1.5μg/mL范围内线性关系良好,相关系数R=0.999 907,平均回收率为(82.30±3.20)%,最低检测限为0.04μg/g。该方法符合兽药残留检测要求。 相似文献
15.
16.
网渔具产品通常指用于海洋捕捞和水产养殖用的渔网线、渔用绳索、渔网等。目前市场上销售的网渔具产品以聚乙烯原料为主,兼有聚丙烯、聚酰胺(尼龙)和其它合成材料制品。其产品质量的优劣将直接影响着海上作业人员的人身安全和经济效益。今年第2季度国家质检总局抽查了网渔具产品62家企业的64个批次的产品,合格产品46个批次,产品抽样合格率只有71.9%, 相似文献
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19.
为给鸭坦布苏病毒(duck tembusu virus,DTMUV)囊膜糖蛋白选择良好的抗原域和宿主表达系统提供参考依据,本研究通过选取DTMUV QD株基因文库中的一个重组质粒并测序,结合NCBI的ORF Finder和BLAST工具发现一个全长为1488 bp完整开放阅读框架(Open Reading Frame,ORF)片段。将该ORF编码蛋白通过NCBI的BLASTP分析和DNAstar进化树分析,确定该蛋白与类黄病毒E基因编码的蛋白具有较高的相似性。随后应用生物信息学分析工具Conserved Domains确定保守结构域、运用SignalP4.1预测信号肽、TMHMM 2.0预测跨膜区。应用在线程序NetNGlyc1.0预测糖基化位点,NetPhos2.0预测磷酸化位点、ProtScale进行疏水性分析。最后运用在线EMBOSS和自动蛋白同源建模数据库进行3D结构预测以及密码子偏爱性分析。结果表明,E蛋白与其它黄病毒衣壳蛋白具有相似的功能,没有信号肽切割位点,在451-468和475-492aa区域含有跨膜区,为相对低表达基因,含有较多种类的稀有密码子,与人密码子使用频率较为接近。这为进一步研究DTMUV E基因的体外表达和宿主选择提供了分子生物学依据。 相似文献
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风险(risk)是由一种或多种危害因子而引发危害事件的一种可能性或概率。危害因子可能属于物理的、化学的、微生物的范畴,病原微生物中的细菌、病毒、寄生虫等都可成为引发危害事件的风险因子。评估某一因子是否对人或其他生物构成威胁以及所危害的程度显得至关重要。事实上,存在于环境中的危险因子及其多种可能的传播途径都会引发多种危害性事件。因此,要想充分了解并揭示由危害因子引发危害的概率,以及其随后对人类健康造成的危害并非易事。风险评估则是对不良结果或不期望事件发生几率进行描述及定量的系统过程,现已被视为一种用于揭示存在于环境中的各种危害及其对人类健康造成的影响的方法。论文主要对食源性寄生虫风险评估的方法进行全面阐述。 相似文献