基于CMV启动子表达鹦鹉热衣原体PmpD-N蛋白的重组火鸡疱疹病毒的构建

为构建表达鹦鹉热衣原体多型外膜蛋白D的N端(PmpD-N)蛋白重组火鸡疱疹病毒(HVT),以鹦鹉热衣原体CB7株DNA为模板,通过PCR扩增pmpD-N基因,构建带有巨细胞病毒(CMV)启动子的真核表达盒,采用细菌人工染色体技术构建HVT重组子,转染细胞获得HVT重组病毒,并在体外评价该重组病毒的相关特性。结果表明,转染细胞后成功获得HVT重组病毒。通过Western blot和IFA分析表明,重组病毒表达了PmpD-N蛋白。Confocal分析表明,PmpD-N蛋白分布在细胞的胞核、胞浆和细胞表面。HVT重组病毒的复制特性和野生型HVT一致。HVT重组病毒能够激活巨噬细胞促炎性细胞因子IL-6和NO的产生。该试验成功构建了含有CMV启动子,能够表达PmpD-N蛋白的HVT重组病毒,为下一步进行动物试验和分析该病毒的免疫效力奠定了基础。     

急性组织滴虫病的诊治

组织滴虫病又叫黑头病 ,是由组织滴虫引起的鸡和火鸡一种急性原虫病 ,因主要侵害盲肠和肝脏 ,故又称之为盲肠肝炎 ,主要感染雏鸡及青年鸡群。 2 0 0 2年 10月上旬 ,一养殖户饲养的火鸡以打蔫、不愿走动、拉酱色和淡黄色粪便为主要特征 ,并陆续出现死亡。根据流行病学、临床症状、病理剖检和实验室诊断 ,确诊为急性组织滴虫病。1　流行病学及临床症状1.1　流行病学鸡群日龄为 70～ 85日龄 ,发病后陆续死亡 ,最多 1天死亡 17只。1.2　临床症状整个鸡群采食量下降 ,病鸡精神高度沉郁 ,羽毛粗乱无光泽 ,嗜睡或呆立 ,驱赶时两翅下垂 ,步态蹒跚 ,…     

猪流感的发病特点及科学防控措施

猪流感多呈季节性发病,当气温低于机体耐受范围较大时,也可能引起发病,发病表现出典型的病毒性疾病特点,发病及传播迅速,有极强的传染性,同场猪群一般会全群传染.结合临床实践总结出时下猪流感多呈亚临床状态,整个发病机制有其特征性,应调整常规的诊断方法以提高鉴别诊断的准确率.科学合理、完善的预防控制措施,完全可以达到防患于未然,总结了几项实用的防控措施,达到对本病良好的预防控制效果.     

东亚和南亚固有绵羊群体X-蛋白等位基因特有频率分布的研究

本研究利用单向水平板淀粉凝胶电泳以我国5个固有地方绵羊品种包括湖羊（Hu）、同羊（Tong）、滩羊（Tan）、小尾寒羊（Han）、洼地羊（WD）为研究对象对X-蛋白遗传多样性进行了检测,并引用我国周边国家、地区绵羊品种为分析背景。结果表明以喜马拉雅山脉为界的亚洲东部和南部的北部群体和南部群体在编码的X（＋）型的显性等位基因X频率上存在极显著差异（P〈0．01）。北部检测的群体中X等位基因频率范围为0～0．18,平均值为0．0878,包括属于藏羊和蒙古羊系统的小尾寒羊（Han）、不丹羊（Bhutan）、同羊（Tong）、湖羊（Hu）、滩羊（Tan）、洼地绵羊（WD）、Bhyanglung绵羊（Bhy）、Baruwal绵羊（Bar）、云南绵羊（Yunnan）、哈拉和林绵羊（Kh）和乌兰巴托绵羊（Ub）。南部检测的群体中X等位基因频率范围为0．2037～0．4655,平均值为0．3082,包括属于印度绵羊系统的孟加拉国绵羊（Ban）、Kagi绵羊（Kagi）、Lampuchhre绵羊（Lamp）、越南占部落绵羊（Cham）和缅甸绵羊（Mya）。本研究揭示X等位基因可作印度绵羊的标记,在绵羊群体尤其是亚洲东部和南部绵羊系统形成的研究中具有潜在的重要作用。     

CRISPR-Cas9基因编辑系统研究进展

由规律成簇间隔短回文重复序列(CRISPR)和CRISPR相关蛋白(CRISPR-associated protein)组成的CRISPR-Cas系统是细菌一种重要的获得性免疫系统。经改造的CRISPR-Cas9系统可在真核生物和原核生物、病毒等基因组内实现目的基因的插入、缺失。尽管由于受到单链引导RNA(single guide RNA,sgRNA)识别序列具有特异性的限制,同时一些物种基因结构存在复杂性和特异性,在基因编辑过程中会出现脱靶现象,在一定程度上限制了CRISPR-Cas9系统更加广泛的应用。但是,CRISPR-Cas9系统已经展现出很强的基因编辑能力,提升科研人员基因编辑的能力,是一项极具有应用潜质的新技术。论文主要阐述了CRISPR-Cas9系统结构、组成、设计策略和应用等方面研究进展,为相关科学的研究提供参考。     

捻转血矛线虫脂肪酶基因表达与生物学特性分析

选取捻转血矛线虫脂肪酶(Lipase)进行基因克隆、表达并对其生物学特性进行探究。PCR克隆捻转血矛线虫lipase基因,构建表达载体,获得融合蛋白质,采用Western blot检测该蛋白质的抗原特性;酯类酶解反应检测该融合蛋白质脂肪酶活性;实时定量PCR检测该基因在捻转血矛线虫不同发育阶段的转录情况;间接免疫荧光试验检验该抗原蛋白质在虫体组织的定位情况。结果表明,去除lipase基因信号肽序列后,基因片段长864bp,融合蛋白质大小50ku;该融合蛋白质在37℃左右、pH为7的条件下酶活力最高;雄性成虫lipase转录量相对虫体其他阶段最高;该抗原蛋白质主要表达于虫体表皮和肠腔。Lipase具有较好的抗原性,可能与捻转血矛线虫发育和宿主免疫调节有关,深入研究捻转血矛线虫Lipase的特性对寻找新的免疫保护性抗原和药物靶标具有意义。     

应用超数排卵与胚胎冷冻技术保护马头山羊品种资源的研究

马头山羊具有生长快、繁殖率高、育肥性能好等特点,它与波尔山羊、努比山羊等良种山羊经济杂交,优势非常明显。随着市场经济的发展,马头山羊面临保种经费短缺,社会上无计划的引入其他品种山羊盲目杂交,致使马头山羊纯种数量减少,质量下降,马头山羊这一优良地方品种资源有被混杂灭绝的危险,良种保护迫在眉睫。本研究就是在《马头山羊品种资源保护利用新技术中试与示范》这一国家科技部农业科技成果转化资金项目资助下试图通过对马头山羊的超数排卵、胚胎冷冻,冷冻胚胎移植等技术的有机结合,构建马头山羊冷冻胚胎保种,为其胚胎移植的产业化、品种改良、新品系培育、遗传资源的保护利用等提供科学依据。     

关于“国家公园”的几点哲学思考

从党的十八届三中全会以国家治理体系和治理能力现代化的改革总目标出发,提出“建立国家公园体制”,到党的十九大报告指出“国家公园体制试点积极推进”,国家公园已从顶层设计迈向实践。我国7大地理分区均涉及到国家公园,其中北京长城将建立国家文化公园,多数国家公园位于一个省或市,但大熊猫、东北虎豹和祁连山国家公园涉及到2个及以上省。国家公园体制的成立,对推进我国生态文明建设、实现美丽中国和可持续发展具有重要意义,也将人与人之间的道德伦理更好地扩展到人与自然的道德伦理,对公民养成良好的环境道德具有引导作用。实现“国家所有、全民共享、世代相传”的目标,符合辩证唯物主义科学发展观的重要内涵,使人与自然和谐可持续发展。本文以我国国家公园从提出到建立试点为基础,进一步结合科学发展观和环境伦理学等哲学观点,为理解国家生态文明体制建设提供依据。