条件性诱导转基因斑马鱼卵细胞的凋亡和消融

【目的】构建针对斑马鱼Danio rerio卵细胞的可诱导消融品系,并了解其卵巢组织在条件诱导下的去除规律和特性,为相关领域的应用提供材料基础。【方法】利用Tol2转座系统建立卵细胞特异表达硝基还原酶(Nitroreductase,NTR)的转基因斑马鱼品系;通过定期采样,连续观察、解剖、组织切片等方法研究甲硝唑(Metronidazole,Mtz)对成熟雌鱼外观及卵巢结构的影响;冰冻切片结合TUNEL检测,了解条件性诱导对卵巢细胞凋亡的影响。【结果】获得囊胚细胞具特异荧光标记的转基因鱼,并形成稳定遗传品系。经Mtz诱导,该品系成熟雌鱼卵巢结构逐步退化、萎缩,卵母细胞渐渐消融,提示NTR在卵细胞特异表达;检测发现Mtz可导致卵细胞的凋亡,推测卵巢的组织变化为细胞凋亡所致;撤销Mtz胁迫卵巢可再生并恢复生育功能,说明卵巢的消融过程是可逆的。【结论】获得的转基因斑马鱼可通过条件诱导实现卵巢消融与再生。     

不同温度下复方磺胺嘧啶在罗非鱼体内的药代动力学

【目的】探讨不同温度条件下复方磺胺嘧啶在罗非鱼Oreochromis niloticus血液中的药代动力学(简称药动学)特点及其变化.【方法】以罗非鱼为研究对象,在不同水温(18、23、28和33℃)饲养条件下以复方磺胺嘧啶[m(磺胺嘧啶)∶m(甲氧苄啶)=5∶1]按120 mg/kg的剂量单次饲喂给药,分别于给药后0.5、1、2、4、6、8、10、24、48、72 h采集血液样品,使用HPLC方法检测罗非鱼血浆中的药物质量浓度,研究复方磺胺嘧啶在罗非鱼血液中的吸收和消除变化规律.【结果和结论】18、23、28和33℃时,磺胺嘧啶在血浆中的峰质量浓度分别为12.41、19.60、22.48和30.78μg/mL,甲氧苄啶在血浆中的峰质量浓度分别为1.22、2.06、2.44和2.70μg/mL,2个药物的峰质量浓度均随着温度的升高而增大.磺胺嘧啶在血浆中的消除半衰期(t1/2 ke)分别为18.22、17.89、16.90和12.99 h,甲氧苄啶在血浆中的t1/2 ke分别为16.39、7.08、5.99和4.04 h,药物的消除随温度的升高而加快;各温度下药物在罗非鱼血液中的药动学均为1级动力学过程.给药后10 h内血浆中磺胺嘧啶和甲氧苄啶的比例分别为9.57∶1~11.01∶1、6.30∶1~9.36∶1、5.40∶1~10.39∶1和4.20∶1~20.64∶1,均维持在1∶1~40∶1的理想抑菌配比范围内.研究结果表明温度对药物在罗非鱼体内的吸收及消除影响显著,可提高药物的最大血药质量浓度与消除速率,但对复方磺胺嘧啶在血浆中的比值影响不显著.     

缓释氮肥配施脲酶抑制剂对棉花光合特征的影响

本研究旨在分析缓释肥料（简称“缓释肥”）配施脲酶抑制剂对棉花产量和光合特性的影响。共设不施肥、常规施肥、施缓释肥、缓释肥配施脲酶抑制剂和不同量缓释肥配比搭配脲酶抑制剂5个田间试验处理。研究结果：缓释肥配施脲酶抑制剂处理较常规施肥处理,土壤碱解氮含量增加35.2%,有机质含量增加26.1%;棉花叶片叶绿素荧光参数中,SPAD、反应中心性能指数、最大光化学量子产量、激发能电子转化效率分别增加23.5%、66.3%、14.5%、14.5%,红边归一化植被指数增加13.5%;棉花叶片光合指标中,胞间CO₂浓度、净光合速率、气孔导度、蒸腾速率分别增加30.1%、36.6%、66.9%、27.0%;花铃期,棉花株高、根长、叶面积和单株结铃数显著增加;氮农学利用效率增加96.4%,籽棉产量增加21.5%,肥料偏生产力增加163.5%。上述结果初步表明,缓释肥配施脲酶抑制剂处理能提高棉花的叶绿素功能水平和光合作用,优化棉花的生长指标,有效增加棉花产量。     

慎防鳜鱼混合寄生虫病的爆发

<正>在广东等南方地区,鳜鱼人工养殖以池塘为主,采用饵料鱼与鳜鱼同池混养。在秋冬交替季节,昼夜温差很大,还经常出现几天内气温剧烈升降的情况,造成气温在10~25℃大范围内剧烈波动。这种变化间接引发了鳜鱼多种寄生虫病的发生和流行,对鳜鱼生长和摄食造成危害,降低了鳜鱼的商品价值和养殖经济效益。由于防治时用药不当,会造成鳜鱼及饵料鱼中毒死亡,或养殖过程中出现寄生虫反复感染。     

诺卡氏菌病的防治

近年来,诺卡氏菌病在我国南方如广东、福建和浙江等省大有蔓延趋势。我们选取一例乌鳢诺卡氏茵病的发病病例,分析和探讨其发病原因及防治方法,供广大养殖户参考。     

复合水产养殖环境中气单胞菌耐药性及其同源性分析

 从广东省佛山市4个不同畜禽-鱼复合养殖场采集分离猪/鸭源、鱼源、水源、泥源气单胞菌(Aeromonas)共57株, 通过K-B药敏纸片法, 测定其对8类24种药物的敏感性; 提取基因组DNA, 进行肠杆菌基因间重复序列PCR(ERIC-PCR)及脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型。57株气单胞菌对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、利福平具有较高耐药率; 不同菌株间存在耐药谱差异。57株气单胞菌通过ERIC-PCR分型, 可分为24个基因型; 采用PFGE分型可分为46个簇。两种分型方法均发现来源于同一养殖场的菌株存在相同或相似图谱的分离株, 并且有相似的耐药谱, 提示此为同一克隆株。实验结果表明, ERIC-PCR及PFGE分子分型技术均适用于气单胞菌的相关性分析及其耐药性克隆传播追踪; 复合水产养殖环境有可能有利于耐药菌从畜禽向水产养殖环境转移。本研究通过对不同来源气单胞菌进行耐药性分析及溯源追踪,  旨在为规范畜禽-鱼复合养殖模式用药及建立健康的水产养殖模式提供参考。

     

黄瓜水肥一体化栽培技术及效益分析

在当阳市万家蔬菜种植专业合作社设施蔬菜基地开展了黄瓜(Cucumis sativus L.)水肥一体化栽培技术示范,结果表明,水肥一体化栽培技术具有节肥、节水、节省劳动力,减少病害,提高黄瓜单位面积产量等突出优势,同时黄瓜品质得以提高。     

多子小瓜虫感染后草鱼TLR信号通路基因 的表达动态

[目的]明确草鱼Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)信号通路基因在防御多子小瓜虫(Ichthyophthirius multifiliis)感染过程中的免疫作用,为有效防控鱼类多子小瓜虫感染提供理论参考.[方法]以多子小瓜虫感染草鱼后,采用实时荧光定量PCR检测分析在不同时间点(感染后6 h、12 h、1 d、2 d、3 d、5 d和7 d)草鱼部分TLRs基因(TLR1、TLR2、TLR4、TLR9、TLR20和TLR21)、接头蛋白基因(MyD88和TRIF)、信号转导分子(IRAK4和IRAK1)及细胞因子(IL-1β、TNF-α和IFN)在其皮肤和脾脏中的表达动态变化.[结果]草鱼感染多子小瓜虫后,TLR1、TLR2、TLR9、TLR20和TLR21基因在皮肤和脾脏中的表达主要呈上调趋势,TLR4基因在皮肤中主要呈上调表达,在脾脏中则主要呈下调表达;TLR信号通路接头蛋白基因MyD88和TRIF的表达变化趋势明显不同,其中,MyD88基因的表达在感染后第1~3 d均呈显著上调趋势(P<0.05,下同),而TRIF基因的表达在整个试验过程中绝大多数时间点与对照组无显著差异(P>0.05);IRAK4和IRAK1在皮肤和脾脏中的表达也主要呈上调趋势,但在脾脏中IRAK4在感染后第1 d和IRAK1在感染后第6 h的表达呈显著下调趋势;IL-1β和TNF-α在绝大多数时间点均显著上调,但IFN的表达基本没有变化.[结论]草鱼TLR信号通路中的部分TLRs基因(TL1、TLR2、TLR4、TLR9、TLR20和TLR21)、接头蛋白基因(MyD88)、信号转导分子(IRAK4和IRAK1)及下游细胞因子(IL-1β和TNF-α)均参与防御多子小瓜虫感染的免疫反应,尤其是在感染早期和中期发挥关键作用.     

浅谈猪痢疾与附红细胞体混合感染的病例诊治

猪痢疾是一种高度接触性的由猪痢疾密螺旋体引起的肠道传染病,感染率高,流行期长,发病快,死亡率高;若治疗不彻底,病猪长期带菌排菌,成为本病的来源。临床以消瘦、腹泻或黏液性出血性下痢为特征。附红细胞体病是由血液寄生虫引起的一种以贫血、黄疸和发热为主要症状的人畜共患病,病程10～30d以上,死亡率高。这2种病单独发病时治疗不难,一旦混合感染后,会给诊断和治疗带来很大困难,并且高死亡率和高淘汰率会给养猪业带来惨重损失。