乳汁中结合珠蛋白作为奶牛隐性乳房炎诊断指标的试验

奶牛乳房炎是造成奶牛业经济损失最大的疾病之一,它不仅影响奶牛产奶量,同时也影响牛奶品质、危害人类健康,特别是隐性乳房炎影响更加严重.因此,乳房炎的早期诊断对防治具有重要意义.自十九世纪六十年代以来,乳汁体细胞计数(somatic cell counts,SCC)广泛作为奶牛乳腺感染的诊断指标,乳汁体细胞数可以比较精确地反映奶牛乳房炎症程度,乳房炎症损伤越严重,则乳汁体细胞数越高[1].     

猪圆环病毒多重PCR检测方法的建立

为建立PCV1和PCV2混合感染快速检测的PCR方法,根据GenBank已发表PCV1和PCV2全基因组序列,设计合成4条引物,通过PCV1和PCV2阳性质粒的构建、反应条件的优化、敏感性试验和特异性试验,建立了PCV多重PCR检测方法,可扩增出PCV1和PCV2长度分别为726 bp和433 bp特异性目的基因片段。结果显示,建立的PCV多重PCR可检测到5×101个拷贝的PCV1和PCV2目的基因,HCV、PRV、PPV核酸扩增均为阴性,具有良好的特异性和敏感性。并初步应用建立的方法对42份采自四川省部分地区的样品进行检测,结果表明,PCV1阳性率为33.3%,PCV2阳性率为45.2%,其中PCV1和PCV2混合感染阳性率为16.6%。     

公英散与黄芪对试验性乳房炎家兔血清急性期蛋白含量的影响

为研究急性期蛋白与乳房炎之间的相关性和传统中药公英散、黄芪的抗乳房炎损伤能力,选取家兔乳房灌注脂多糖(LPS)制作家兔乳房炎模型,随机将家兔分为公英散组、黄芪组、阴性对照组。使用公英散、黄芪和等量生理盐水灌胃并测定其血清中C-反应蛋白、白蛋白、血清铜蓝蛋白含量。结果显示,公英散和黄芪能降低内毒素引起的急性期反应;公英散和黄芪对乳房炎具有较好的治疗作用。     

抗真菌药安特芬的小鼠微核试验与精子畸形试验研究

采用小鼠精子畸形试验和微核试验,对安特芬(特比萘芬)进行体内致突变性评价。微核试验:小鼠32只分4组(阴性组、阳性组、治疗量组、2倍治疗量组),连续两次灌胃,间隔24 h,末次灌胃6 h后处死小鼠,取股骨制成骨髓涂片,Gimsa染色,读取微核率;精子畸形试验:雄性小鼠32只分4组(阴性组、阳性组、治疗量组、2倍治疗量组),灌胃5 d,首次给药35 d后处死小鼠,取附睾制片,读取精子畸形率。试验结果显示,安特芬试验组小鼠微核发生率与阴性对照组差异不显著(P＞0.05),而阳性对照组微核发生率极显著高于阴性对照组(P＜0.01);安特芬试验组小鼠精子畸形率与阴性对照组差异不显著(P＞0.05),阳性对照组精子畸形率极显著高于阴性对照组(P＜0.01)。研究结果表明,新药安特芬在推荐剂量下无体内致突变作用。     

2016—2018年四川地区猪流行性腹泻病毒流行病学调查与ORF3、S1部分基因序列分析

为分析四川地区猪流行性腹泻流行状况及分子遗传演化特征,对2016年6月至2018年6月收集的71份猪腹泻病例进行RT-PCR检测与相关的流行病学调查,并对其中4份阳性样品进行ORF3、S1基因的检测与序列分析。结果显示,近2年的发病高峰日分别在1月28日和2月11日,发病高峰期在12月至3月;猪场连年感染数量下降,新疫源地增加;ORF3基因可分为2个基因型,部分毒株发生少量碱基突变;从S1基因高变区段分型结果显示,2016年底至2018年初流行的PEDV毒株为GⅡ群,与目前流行的PEDV变异毒株在同一分支,同源性为92.8%~99.3%,碱基变异数量较大,与国内的经典疫苗株CV777亲缘关系较远,同源性为82.7%~87.3%,发病时期更集中,较传统PEDV有轻度后移。结果表明,四川地区规模化猪场PED发病率呈下降趋势,对于该病的防控取得初步成效。目前流行PEDV毒株有变异的趋势,为PEDV的防控奠定基础。     

基于PMA-qPCR方法检测兽用消毒剂对非洲猪瘟病毒的灭活效率

为评估规模化猪场生物安全防控水平,拟建立非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)感染性检测方法,并利用该方法检测兽用消毒剂对病毒的灭活效果。使用不同种类的消毒剂处理ASFV,通过PMA-qPCR评估消毒剂对ASFV的灭活效果和筛选消毒剂的最佳处理方式。PMA-qPCR结果显示,ASFV对不同类型的消毒剂表现出不同的敏感性,对过硫酸氢钾复合物溶液敏感性最高,该消毒剂按0.5%稀释,20 min内即可有效灭活ASFV。研究结果对生物安全的消毒环节具有一定的参考意义。     

短期添加高果糖玉米糖浆对小鼠体重和肝功能指标的影响

通过给小鼠短期添加高果糖玉米糖浆,研究其对小鼠健康的影响。选取健康、体重相近的小鼠48只随机分为3组,分别添加高果糖玉米糖浆、蔗糖及蒸馏水,添加14d后检测小鼠体重和肝功能相关指标。结果显示,对照组的小鼠体重显著低于高果糖玉米糖浆组(P0.05),与蔗糖组差异不显著(P0.05);高果糖玉米糖浆组和蔗糖组的肝重、低密度脂蛋白浓度和天门冬氨酸氨基转移酶活性显著高于对照组(P0.05),高果糖玉米糖浆组的高密度脂蛋白浓度显著低于对照组;高果糖玉米糖浆组的甘油三脂含量显著高于蔗糖组和对照组(P0.05);各组的丙氨酸氨基转移酶活性和胆固醇含量差异不显著(P0.05)。结果表明,高果糖玉米糖浆更易导致肥胖且短期添加可影响小鼠的肝脏功能。     

猪圆环病毒2型四川分离株ORF2基因的克隆与序列分析

对临床分离毒株PCV-2 sch2010 ORF2基因全序列进行了克隆和序列分析.结果表明,PCV-2sch2010 ORF2全基因共705 bp,编码234个氨基酸,与GenBank发表的21株PCV-2的ORF2参考序列的核苷酸氨基酸序列同源性分别为88.4%～99.7%和87.2%～99.6%;与2株PCV-1 ORF2(GU371908、FJ475129)的核苷酸序列和氨基酸序列同源性分别为58.7%～59.5%和62.8%～64.5%;PCV-2 sch2010分离株与PCV-2的欧洲分支群亲缘关系较近.     

四川省部分地区大肠杆菌的耐药性监测

采用常规方法对87份采集于四川省部分地区规模化养猪场病料样品(51份),健康鸡(28份)和野生白鹭(8份)粪便样品进行大肠杆菌分离鉴定,并采用K irby-Bauer法对大肠杆菌分离株的26种抗菌药物耐药性进行检测。结果表明,分离鉴定的51株猪源大肠杆菌、28株鸡源大肠杆菌和8株白鹭源大肠杆菌均存在不同程度多重耐药性,3重及3重以上耐药菌株占总菌株数88.51%:其中对青霉素G(100%)、强力霉素(89.66%)、复方阿莫西林(85.20%)、四环素(82.76%)、头孢氨苄(63.22%)、头孢噻吩(52.87%),氨苄青霉素和复方新诺明(51.72%)的耐药性较强;8株野生白鹭大肠杆菌多重耐药性远低于猪源和鸡源大肠杆菌分离株多重耐药性,对受试喹诺酮类、复方新诺明等多种药物高度敏感。     

15株禽源空肠弯曲菌的分离鉴定及CheW基因序列分析

为了解四川地区禽源空肠弯曲菌流行菌株的感染情况及其Che W基因的变异特点,本研究于四川地区采集禽源盲肠及内容物对空肠弯曲菌进行分离并纯化培养,将分离菌株进行染色镜检、生化试验、16S r RNA基因PCR鉴定,并对分离株的Che W基因进行克隆测序,选取Gen Bank中登录的10株国内外空肠弯曲菌菌株与分离株进行Che W基因的序列分析及遗传进化分析。结果显示:分离株经纯化培养于哥伦比亚血琼脂培养基上后出现无溶血现象的菌落;革兰染色为阴性;生化代谢类型较稳定且与相关报道一致;16S r RNA基因序列与空肠弯曲菌(NCTC11168、YQ2210)等菌株同源性为99%以上。15株分离菌株的Che W基因的核苷酸序列与所选参考株一致性为98.68%,其推导的氨基酸序列同源性一致性在98.9%以上。其中鹌鹑源分离株CJ-1、CJ-2、CJ-4、CJ-13、CJ-14在第22位和161位均出现单个碱基的置换为A→G。本实验中分离菌株均为空肠弯曲菌且分离菌株之间Che W基因保守性强,遗传变异动态性较弱。本研究为空肠弯曲菌遗传变异方面的相关动态研究提供参考依据。