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为克隆和研究猪细胞因子及相关基因,应用建库试剂盒成功构建了猪细胞因子cDNA表达文库。采取健康猪外周血及淋巴结,分离单个核细胞,经LPS PHA联合刺激不同时间后,提取总RNA。将各组样品混合,分离纯化mRNA。反转录合成cDNA第一链和第二链,与EcoRI和HindⅢ接头连接。酶切和过柱分级分离后,与λScreen载体连接,经体外包装转染E.coliER1647宿主菌,进行文库容量测定和扩增。以扩增文库的DNA为模板,利用已知基因引物克隆猪IL-2和IL-4的cDNA并进行测序。结果表明,成功构建了猪细胞因子cDNA文库,文库原始库容量为8×105,插入片段在300~2 000 bp,扩增得到特定的IL-2和IL-4基因,说明文库质量高、代表性强,为进一步从文库中筛选未知细胞因子及相关基因提供了有效的工具。 相似文献
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对盐碱草地分别以农家肥、农家肥+磷肥、糠醛渣和醋糟处理后种植沙打旺(Astragalus adsurgens)进行改良,测定其不同生育时期的氮代谢指标,以探讨盐碱地生物改良的机制。结果表明:不同改良措施下,不同生育时期沙打旺叶片各氮代谢关键指标差异显著(P<0.05),其大小顺序为现蕾期>开花期>返青期>结实期。相同生育时期不同改良措施下沙打旺叶片氮代谢关键指标均显著高于对照(P<0.05),大小顺序为醋糟>糠醛渣>农家肥+磷肥>农家肥>对照。不同改良措施下,沙打旺在现蕾期氮代谢最旺盛,而结实期代谢最缓慢;醋糟、糠醛渣、农家肥+磷肥及农家肥改良盐碱地均可提高沙打旺的氮代谢。 相似文献
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<正>射阳县2004年晚秋蚕发生大量蚕病,其发病量之多,发病面之广,危害之严重在射阳县晚秋历史上还属首次。据不完全统计,80%的农户不同程度地发生蚕病,发病严重的户损失70%以上,个别重灾户颗粒无收,这不仅挫伤了蚕农的生产积极性,影响蚕桑生产的稳定和发展,同时增加了行业不稳定因素,个别农户误认为蚕种质量存在问题。为了总结经验,防患于未来,笔者对2004年秋蚕暴发蚕病的原因进行了分析,并提出一些防治对策。 相似文献
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