白芥ISSR-PCR反应体系的建立与优化

本实验以产于四川、安徽、广东和青海的白芥农家品种为材料,采用单因素筛选和L16(45)正交设计相结合的方法,对白芥ISSR-PCR反应体系的Mg2+浓度、d NTPs浓度、引物浓度、Taq酶和模板DNA用量进行优化,建立最佳的白芥ISSR-PCR反应体系。结果表明:在20μL的PCR反应体系中,Mg2+浓度2.0 mmol/L、d NTPs浓度0.5 mmol/L、Taq DNA聚合酶0.2 U、引物浓度0.4μmol/L、模板DNA 60 ng为最佳用量。用4个白芥农家品种对建立的ISSR-PCR反应体系进行验证,表明该反应体系稳定性高、可重复性好,同时筛选出条带清晰、多态性较好的18条引物。该反应体系的建立为白芥ISSR标记开发、种质资源鉴定与筛选、遗传多样性分析和分子标记辅助育种等提供了帮助。     

东方百合生长期间形态及叶片呼吸强度变化规律研究

以荷兰进口的东方百合杂种系‘Sorbonne’为材料,选用青海大学高原花卉研究中心多年筛选的自配3号为营养配方,研究了东方百合生长期形态和呼吸强度的变化规律。结果表明:株高逐渐增加至12周时达到最高峰;鳞茎周径呈现出先下降,第12周后又表现为缓慢上升的趋势;鳞茎单球重在种植后第8周前呈现下降趋势,第8周后逐渐增加;叶片呼吸强度在第12周前表现为迅速增加并达到顶峰,第12~16周间又呈现迅速下降,第16周后呈现缓慢下降趋势。     

万寿菊属F1杂种优势分析

选用万寿菊A、B、C 3个雄性不育两用系与95个万寿菊和孔雀草自交系杂交,测定F1的株高、花径、冠型指数和分枝能力,并进行超中优势和超亲优势分析,通过F1各性状超亲优势的综合评价,选择出各雄性不育系恢复性强的自交系.结果表明,3-1、4-1和32-1综合优势值最高,可作为"两用系"A的恢复系,38-3、2-1、49-2综合优势值最高可作为两用系B的恢复系,33-2、43和48-1综合优势值最高,可作为"两用系"C的恢复系.     

不同营养配方对东方百合鳞茎氮磷钾积累规律的影响

[目的]为西宁地区百合鳞茎繁育及切花生产提供合理的配方依据。[方法]以从荷兰进口的东方百合杂种系Sorbonne为材料,研究在4种不同来源的营养配方下东方百合生长期间鳞茎的氮磷钾积累及变化规律。[结果]在现蕾之前的12周里,各配方下鳞茎中氮、磷、钾含量都急剧下降,鳞茎周径及单球重呈现下降趋势,基质中的养分保持相对稳定状态;在第12周以后,鳞茎的膨大主要靠从基质中吸收的养分,盛花期后,鳞茎除从基质中吸收一部分养分外,地上部养分的回流也促使鳞茎膨大,各配方下鳞茎的氮、磷、钾含量均出现不同程度增加,钾的增长量最大,氮的增长量次之,磷的增长量最小。[结论]在现蕾期前,鳞茎主要是养分的源,进入枯萎期后,鳞茎逐渐转变成养分的库。     

万寿菊雄性不育两用系遗传转化体系的建立

为了筛选适合万寿菊不定芽诱导的最佳外植体及激素浓度组合,并探讨该组织部位对卡那霉素、潮霉素的抗性临界点以及头孢霉素和利福平对LBA4404的抑菌性效果,构建万寿菊遗传转化体系。本研究以三种激素为组合,以万寿菊雄性不育两用系2-2的子叶、下胚轴、叶片为材料筛选出适合万寿菊的再生体系的激素配比及最佳的组织部位;以万寿菊子叶为材料筛选其对卡那霉素、利福平、头孢霉素、潮霉素四种抗生素抗性临界点;筛选利福平、头孢霉素对农杆菌LBA4404的抑菌浓度。结果表明：1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA+30 g蔗糖的MS培养基可以作为万寿菊子叶的最佳诱导激素浓度组合,MS5和MS9可以在万寿菊叶片中诱导出不定芽,但诱导率极低,下胚轴在48个激素组合无不定芽的产生;利福平和头孢霉素两种抗生素浓度在200 mg/L时能对LBA4404农杆菌的生长起到有效的抑制,并且在该浓度下对万寿菊子叶不定芽的产生起到一定的促进作用;子叶对于潮霉素、卡那霉素的抗性浓度分别为30、100 mg/L。利用建立的万寿菊再生体系及抗生素浓度体系可以为农杆菌介导万寿菊遗传转化提供理论基础。     

香石竹试管苗移栽基质的筛选

试管苗的移栽驯化是快繁过程中的关键一步,其中移栽基质是影响试管苗驯化成活的重要因素之一,只有选取适宜的移栽基质,创造良好的环境条件,才能培育出优质苗[1].目前,我国已对许多植物试管苗的移栽进行了研究,并以蛭石、珍珠岩等作为较理想的育苗基质[2～5].     

青海6个山丹居群的继代培养效果研究

为了筛选出山丹继代培养的最佳转接时间,以利于又快又好的扩繁,以青海6个山丹居群的初代苗为材料,研究继代后6周内的形态及芽分化情况。结果表明,在继代培养6周内,6个居群的芽苗高度、芽分化数在前3周不存在显著差异,在4～6周居群间的芽苗高度表现为极显著差异,芽分化数第4周居群间表现极显著差异,之后各居群间差异不显著;各居群形成的微型鳞茎直径及叶面积在前2周不存在显著差异,3～6周各居群的微型鳞茎直径及叶面积存在极显著差异。对各居群继代培养期间芽苗及微型鳞茎综合评价表明,在6周内SZ居群长势最好,其次为Rn居群,DW居群的长势最差。     

不同植物生长调节剂对兰州百合中心芽生长发育的影响

以兰州百合(Lilium davidii var. unicolor)中心芽鳞茎为材料,利用不同生长调节剂GA3(0、50、100、150、200 mg/L)、NAA(0、50、100、150、200 mg/L)、6-BA(0、1、2、3、4 mg/L)、生根粉(GGR,0、1、2、3、4 mg/L)分别对切根和未切根的中心芽进行浸泡处理,探究不同植物生长调节剂对兰州百合鳞茎生长量、植株株高的影响,分析最适兰州百合中心芽的植物生长调节剂处理。结果表明,利用兰州百合中心芽进行繁殖时,不需要进行繁琐的切根处理,使用低浓度GA3处理中心芽有利于植株及鳞茎生长。     

基于正交设计优化兰州百合鳞片埋培环境条件

[目的]探究兰州百合鳞片基质埋培过程中不同鳞片层次、催培温度及基质湿度对埋培效果的影响,为兰州百合进行规模化快速繁殖提供适宜的环境参数.[方法]以兰州百合鳞片为试验材料,选用L9(34)正交设计表进行不同催培温度、基质湿度、鳞片层次处理,以期明确兰州百合鳞片催培繁殖小鳞茎适宜的环境参数.通过催培过程中鳞片腐烂率、鳞片分化率、小鳞茎分化数、鳞片生根率、小鳞茎生根数及其横径(分级指标)等的观测与分析,探究基质埋培对不同层次鳞片形成小鳞茎的影响.[结果]催培初期,A1B3C3处理腐烂率最高,达18.67%,进入3周时,所有处理的平均腐烂率下降至1.33%.随着鳞片腐烂率下降,鳞片分化率开始逐渐上升,进入小鳞茎生长高峰期,各处理的鳞片分化率为44.16%~86.52%,A1B1C1处理在催培3周时小鳞茎分化数达最大值,为238.67个.除A1B3C3、A2B3C1和A3B3C2处理外,其余各处理的鳞片生根率为20.58%~63.92%.催培结束时,A1B2C2处理二级小鳞茎最多,达53粒/30片;A1B1C1处理的一级小鳞茎最多,为28粒/30片;A3B1C3处理只有三级小鳞茎,且小鳞茎数量仅10粒/30片.催培第3周是兰州百合鳞片埋培的关键时期,也是小鳞茎根系发育的初期.不同处理的催培环境均不同程度的影响着鳞片分化情况,综合各项指标的极差值大小,确定影响小鳞茎形成的主要因素为温度,其次为基质相对水含量,鳞片层次影响最小.9个处理中A1B1C1(外层鳞片+25℃+60%基质相对水含量)小鳞茎生长效果最佳,催培结束时鳞片腐烂率为0.33%、鳞片分化率为96.67%、小鳞茎分化数为231.67个、鳞片生根率89.67%、小鳞茎生根数为319.33条.[结论]兰州百合鳞片基质埋培过程中不同层次鳞片在不同环境条件下形成小鳞茎的质量和数量均不同,繁殖效率均有差异.鳞片基质埋培繁殖适宜的环境参数为外层鳞片+25℃+60%基质相对水含量,该技术参数可在生产实践中推广应用.     

三种百合花器官形态发育进程研究

对东方百合、兰州百合和细叶百合在花器官分化完成后的发育过程进行跟踪测量观察。结果表明:3种百合花器官的形态发育过程呈"慢-快-更快"的变化规律。各个发育阶段所持续的时间随百合种类的不同而不同。并据此分别建立了四阶多项式数学模型,R2值最高达0.9968。