不同稀释液对鸡马立克氏病活疫苗蚀斑数的影响试验

选用几种不同稀释液稀释疫苗后放置不同时间进行蚀斑计数,统计病毒存活率,确定一种有效的马立克疫苗稀释液。     

禽大肠埃希氏菌O78和巴氏杆菌（5∶A）外膜蛋白的免疫研究

用超声裂解、Sarkosyl处理和超速离心法提取禽大肠埃希氏菌O78强毒株(简称O78)、O78耐氯霉素弱毒株(简称O78^r)、禽多杀性巴氏杆菌5：A强毒株C48-1(简称C48-1)、O78^r与C48-1的融合双价弱毒株F4(简称F4)菌体外膜蛋白(OMP)。经SDS-PAGE结果显示，O78、O78^r、C48-1与F4均有1条分子质量为31．0～43．0 ku，分子质量相近的OMP条带；O78与C48-1还有1条分子质量小于31．0 ku且相近的OMP条带。用OMP制备的油乳剂疫苗分别免疫小白鼠15 d和岭南黄鸡后22 d，以O78、C48-1强毒菌攻击。结果表明O78、C48-1的OMP不但对同源菌具有免疫作用。且具有交叉免疫保护作用；用各自的OMP作包被抗原，建立的ELISA方法也能交叉检测到3组OMP免疫鸡产生的抗2种菌OMP的IgG抗体。     

猪瘟兔化弱毒疫苗效检替代方法研究进展

猪瘟兔化弱毒(HCLV)虽可在多种细胞上生长,但不产生细胞病变,这使得猪瘟疫苗的效价评价工作变得较为困难。目前,家兔热反应是HCLV病毒效价测定和CSF疫苗成品效力检验的主要方法。然而,HCLV所致的兔热反应存在个体差异大和测定时间长等问题,迫使人们寻求新的更为快速、敏感和精确的效力检验替代方法。笔者就近年来猪瘟兔化弱毒疫苗效检替代方法的研究进展做一综述。     

PPV培养细胞的选择及在ST细胞中的增值规律

猪细小病毒毒株在不同细胞系上的生长情况不尽相同,如不能掌握其规律,将难以生产出优质的疫苗.本研究对PPV（M2株）在PK15和ST细胞上生长情况进行了研究,得出ST细胞更适合其生长。之后将PPVM2毒株同步接种于ST细胞,用测定HA和TCID50的方法研究了其在ST细胞上增殖的基本规律。病毒在接种后24h可在细胞较稀的区域看到非常轻微的病变,病毒TCID50测定结果也表明,接毒后17h,病毒已经明显增殖。当病毒培养到约40h,其TCID50即接近高峰,并进入平台期,病毒的TCID50已达到10^7.5／0．hmL以上。继续培养,最高可达到10^8.5／0．1mL以上,且直到122h,也不见明显降低。病毒培养40-122h,不管是用Gibco血清还是用Hyclone血清培养病毒,其差异都非常小,变异系数都在5％以内。病毒HA价也出现同样的平台期,但HA价的平台期出现比TCID50的平台期出现更晚。     

鸡新城疫活疫苗（Lasota株）生产种毒的保存期试验

对3批置-70℃超低温冰箱的鸡新城疫(Lasota株)生产种毒进行保存期试验，检测结果表明，种毒在-70℃保存5年，病毒含量、免疫原性、安全性均达到规程要求，分别用该3批种毒生产9批鸡新城疫抗原病毒含量检测均≥108.83EID50/0.1ml，高于国家标准(国标>107.0EID50/0.1ml)，因此鸡新城疫(Lasota株)生产种毒在-70℃存放保存期至少为5年。     

禽流感H9亚型灭活油乳剂疫苗不同剂量的免疫效果比较

将47只28日龄SPF鸡分为4组，第1～3组为试验组，每组12只，分别肌肉注射禽流感H9亚型灭活油乳剂疫苗0．1、0．3、0．5mL／只，第4组11只为对照组。各组鸡在免疫后1、2、3周采血，测定H9抗体水平；在免疫后3周用1：10稀释的AIV H9N2攻毒，0．2mL／只。攻毒后第2、3、4周继续测定H9抗体水平，观察了疫苗对鸡的保护效果。结果显示，0．5mL／只剂量的免疫效果比0．1mL／只和0．3mL／只剂量的免疫效果好；攻毒用的AIV H9N2的致病力低，对所有试验鸡均不致死。     

集约化猪场不同毒株猪繁殖与呼吸综合征弱毒活疫苗免疫后血液中持续带毒及抗体消长规律研究

某地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)与中国高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(hp-PRRSV)同源性极高,为了筛选适合该地区病情的疫苗,指导养殖户生产,试验选择hp-PRRS弱毒活疫苗(JXA1-R株)和PRRS弱毒活疫苗(VR-2332株)作为疫苗候选株,选取30日龄、健康状况良好、群体差异性小的断奶仔猪30头,随机分成A、B和C组,每组10头,A组注射hp-PRRS弱毒活疫苗(JXA1-R株),B组注射PRRS弱毒活疫苗(VR-2332株),C组注射相同剂量生理盐水作对照,免疫前和免疫后14、28、42、56、70、84 d采集血清,通过淋巴细胞计数、血清病毒核酸检测、血清抗体检测等分析猪体内hp-PRRS弱毒活疫苗(JXA1-R株)和PRRS弱毒活疫苗(VR-2332株)免疫应答情况.试验结果显示,淋巴细胞数量方面,仔猪免疫后,淋巴细胞数量均上升,42 d时A、B组均达到最大值,A组为19.3×10⁹/L,B组为16.7×10⁹/L,C组则一直处于原始水平;抗体阳性方面,14 d时A组为80%,B组为60%,C组为0,42 d时A组为100%,B组为80%,C组为0;病毒核酸阳性率方面,14 d时A组为90%,B组为100%,C组为0,42 d时,A组为40%,B组为70%,C组为0,70 d时,A组为0,B组为20%,C组为0.由此可知,hp-PRRS弱毒活疫苗(JXA1-R株)能快速诱导猪发生免疫应答、产生免疫抗体,抗体持续时间长、效价高、稳定性良好,且疫苗毒在体内存在时间短、减毒时间快、安全性高,对所研究地区猪群免疫具有优越效果.     

猪IL-18基因原核表达载体的构建及表达

以含新兴猪IL-18基因的真核质粒pcDNA3.1-pIL18为模板,扩增出新兴猪IL-18基因,将其定向克隆至原核表达载体pET32c和pET41c的SacⅠ和KpnⅠ位点,构建了原核表达载体pET32c-pIL18和pET41c-pIL18。经酶切和PCR鉴定,表明所构建的重组质粒为特异性新兴猪IL-18基因原核表达质粒。将该重组质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3)细胞,筛选的阳性菌落经SDS-PAGE分析及Western-blotting分析,表明成功构建了表达重组猪IL-18的大肠埃希菌基因工程菌株。蛋白的可溶性分析表明,重组蛋白呈不可溶表达,在菌体内以不溶性的包涵体形式存在。     

鸡传染性法氏囊中等毒力(B87株)种毒繁殖工艺改进的试验报告——采用鸡胚成纤维细胞繁殖种毒的试验方法

本试验采用SPF胚制备CEF,分三组按照一定比例接种IBDV-B87生产种毒,收获感染细胞.计算ELD50,每0.2 mL病毒含量为≥105.89ELD5.对鸡胚的毒力:48～144 h内死亡17/20.剖检:法氏囊病变典型.结果符合中华人民共和国兽用生物制品规程的规定.繁殖的IBDV-B87细胞种毒相比传统的人工气室绒毛尿囊膜接种法制备的种毒,可降低生产成本,提高SPF胚利用率.