猪细小病毒病PCR检测方法的建立及应用

根据NCB I中登录的猪细小病毒(PPV)VP2基因序列,应用Prim er Prem ier 5.0软件设计一对引物,经反应条件优化,建立PPV的PCR检测方法。经特异性和敏感性测定,其最低检测值可达6×10-3ng/μl。采用PCR方法对118份临床样品进行应用检测,结果检测到6份为阳性样品。     

一起猪高热病的诊断与流行病学分析

2006年7月以来,浙江省某地区猪群出现发热、局部皮肤发绀、呼吸困难为主的临床症状,死亡率高达39.3%,疑似猪高热病。通过流行病学调查和实验室检测9份病料与17份血清样品,发现临床病程5d以上的病猪无论是PRRSV还是PRRSV抗体阳性率均为100%;PCV2检出率达44.4%;所有病料CSFV检测均为阴性;17份血清样品伪狂犬(PR)(gE)抗体均为阴性。因此,判定此病是以PRRSV为主要原发性病因、PCV2协同作用的猪高热病。本次高热病不排除PRRSV强毒株或病毒变异株、未知病原及其它未检病原共同感染的可能性。     

猪蓝耳病灭活苗应用对相关疫病免疫控制的影响

在有猪高热病病史的猪场开展以高致病性猪蓝耳病(PRRS)灭活苗为主的免疫防控试验。结果表明PRRS阳性场免疫高致病性猪蓝耳病(NVDC-JXA1株)灭活苗与猪蓝耳(SD1株)灭活苗均产生了效果,且两者基本一致。灭活苗免疫均未出现明显副反应,但NVDC-JXA1株疫苗免疫组(HP)猪免疫发热持续时间相对长于免疫对照组SD1株苗,且其PRRSV感染率要极显著地高于免疫对照组(SD)和空白对照组(B)(P<0.01)。PRRS灭活苗对PRRS阳性场猪瘟体液免疫效果有显著提高(P<0.05),并且不影响伪狂犬(PR)弱毒苗、口蹄疫(FMD)灭活苗的体液免疫应答效果及猪圆环病毒2型(PCV2)的抗体阳性率。高水平PCV2母源抗体能极显著保护仔猪免受PCV2感染或延迟其感染时间(P<0.01)。     

猪繁殖与呼吸综合征的ELISA抗体检测结果分析与应用

本研究应用ELISA方法共检测25个猪场26个猪群507份血清的PRRS抗体水平,应用统计学方法分析各猪群的检测数据,结合猪群临床表现和病原污染情况的流行病学调查结果,可将猪群分为无PRRSV污染,临床健康;PRRS病毒污染,临床稳定;PRRS病毒污染,临床发病且控制困难等3种流行模式,并提出了应用猪群PRRS ELISA检测值标准差、个体检测极值及盒须图(Box-and-Whisker Plot)进行分类的具体指标和PRRS分类控制的建议。     

小反刍兽疫的流行病学与防控

小反刍兽疫(PPR)是严重危害畜牧业生产安全的重大跨国动物疫病之一,目前该病已经给我国养羊业造成了巨大的经济损失。文章分析了全球小反刍兽疫的流行趋势,总结了流行病学特点,针对性提出防控对策,以期为该病的防控提供有效参考。     

O型口蹄疫抗体不同检测方法的检测结果比较分析

为更好开展O型口蹄疫免疫质量评估,客观评价不同抗体检测方法的相关性和特点,试验选择猪、牛、羊血清样品299份和2个规模猪场日常检测血清样品180份,采用正向间接血凝(IHA)、液相阻断ELSIA(Lp B)和VP1结构蛋白ELISA(VP1)三种方法进行0型口蹄疫免疫抗体检测。结果显示,采用IHA方法检测的免疫抗体更符合临床实际免疫变化规律。采用合成肽疫苗免疫的猪场不宜采用IHA方法检测抗体,但可采用Lp B和VP1方法检测,两种方法检测结果符合率较高。     

"猪高热病"的流行病学调查与主要病因分析

按浙江省出现"猪高热病"流行高峰前后两个时段,采集了53个养猪场户的病猪组织病料和114份病猪及健康猪血清样品,应用PCR或RT-PCR同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环II型病毒(PCV-2)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪流感病毒(SIV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、猪细小病毒(PPV)等7种病毒,应用ELISA方法检测PRRSV、PCV-2、PRV(gE)三种抗体。高热病病猪的病毒检测结果表明,疫情发生前对病猪检测7种病毒性病原,检到PRRSV、CSFV、PCV-2、PRV和PPV共5种病毒,检出率分别为24%、32%、34%、1.5%和0.5%,与发生疫情后的检出率比较,只有PRRSV的病毒检出率呈明显上升,从24%上升到57.7%,PCV-2病毒检出率基本持平,CSFV、PRV和PPV病毒检出率则出现下降或未检到,且流行高峰出现前后均未检到SIV和JEV。抗体检测结果显示,疫情发生后发病猪群的PRRS抗体上升最为显著,从8.97%上升到80.6%,PCV-2抗体从16.7%上升到27.8%,PR(gE)抗体下降为0,提示此次疫病是以PRRS为主要病原或诱因所致的多病原综合性传染病。     

检测猪伪狂犬病抗体的3种ELISA试剂盒的比较分析

为评价用于检测猪伪狂犬病抗体的3种商用的试剂盒,择优选取一种作为本中心的检测试剂。用3种试剂盒检测386份免疫背景清楚的临床及试验血清,比较各试剂盒的检测阳性率、敏感性。结果386份血清经HIPRA、LSI和IDEXX试剂盒检测,检测阳性率分别为30.83%、59.84%和71.24%,且3种试剂盒相同血清的检测阳性率相互间差异均极显著性(P<0.01),但是对于高抗体水平的38份母猪血清检测阳性率相互间差异均不显著(P>0.05)。检测数据表明IDEXX与LSI两者相关系数为-0.941,检测定性完全相符率达81.12%。结果3种试剂盒检测阳性率、敏感性均以IDEXX为最高,LSI次之,HIPRA最低;IDEXX与LSI两者呈现强相关,造成阳性检测率差异显著的主要因素是方法的敏感性、试验结果的判定标准。     

猪口蹄疫抗体不同检测方法的比较分析

世界动物卫生组织(OIE)将口蹄疫列为A类疾病,我国将其列为一类传染病,并定为强制免疫病种[1-2].疫苗免疫是预防该病的有效措施之一,如何很好地监测评价疫苗免疫效果是防制该病的关键,同时也为科学制定免疫程序、做好疫病风险评估及考核免疫政策措施落实情况之分析提供依据.     

3种ELISA试剂盒检测猪伪狂犬病gE抗体的比较

通过对猪伪狂犬病毒gE抗体的3种ELISA试剂盒比较试验数据分析,3种试剂盒检测值均呈极显著的相关关系(P<0.01)。检测定性结果一致程度较高,其中HIPRA与IDEXX一致性强度为极强(Kappa=0.808),且其符合率达89.4%;HIPRA与LSI、LSI与IDEXX均为高度一致(Kappa=0.732、0.724),且其符合率依次为85.6%、85.3%。经gE抗体阳性率检测结果统计学检验,3种试剂盒gE抗体阳性率之间差异均不显著(P>0.05),其检测灵敏度从高到低次序为LSI、IDEXX和HIPRA。临床应用数据分析表明,LSI检测样品存在1.26%假阳性结果,使用LSI检测gE抗体易造成临床猪伪狂犬误诊,为降低误诊率须加大检测群体的样本数或要求有阻断率≥76.73%的样品存在。在临床样品检测群体定性中HIPRA、IDEXX与临床相符率均达100%,LSI与临床相符率为95.5%,其中相符率LSI与HIPRA差异显著(P<0.05)。从猪伪狂犬病净化角度来说,3种试剂盒均可使用,但若用于猪伪狂犬病诊断或了解群体猪伪狂犬病毒野毒感染程度则宜采用HIPRA或IDEXX试剂盒。在实际应用中除选择合适的试剂盒外还应注意检测数据的科学分析。