进口油菜籽中十字花科小球腔菌检测方法概述

十字花科小球腔菌(Leptosphaeria maculans)是影响油菜生产的重要病原真菌,主要分布在加拿大、澳大利亚、美国等油菜主产区.我国尚无此病原危害的报道.该病原通过带菌种子作远距离传播传入新发病区,加强该病原菌的检测是防范该有害生物传入的重要手段.本文对该病原菌的现有检测鉴定方法进行了综述,为口岸部门开展该病原菌的检测以及制定相应检测方法标准提供借鉴.     

实验室在进境繁殖材料病原菌检测中应发挥的作用

对进境繁殖材料的检疫是植物检疫工作的重中之重,本文从实验室角度就加强繁殖材料的检测工作,切实提高疫情检出率,不断提升把关成效与水平方面进行了总结分析,提出在继续发挥传统检测方法作用的同时,应在快速、灵敏、准确检测病原菌方面进行研究,追踪前沿检测技术,不断提高检测技术水平;应建立具有可操作性和实用性的检测方法.     

香榧假种皮开裂过程中组织结构、细胞壁代谢的变化

【目的】研究香榧假种皮开裂过程中细胞壁代谢及结构的变化,为进一步探明假种皮的开裂机制和探寻促进假种皮开裂的措施提供理论依据。【方法】在种实的不同发育时期内,测定香榧假种皮的开裂率和硬度的变化,分析细胞壁组分及相关降解酶活性的变化,结合石蜡解剖结构的观察,揭示假种皮细胞壁代谢与结构变化在开裂过程中的作用;通过测定香榧种实乙烯释放率的变化,并利用外源乙烯利/乙烯作用抑制剂（1-甲基环丙烯,1-MCP）处理分析乙烯在假种皮开裂过程中的作用,探讨乙烯与假种皮开裂的关系。【结果】1）从134～154 DASP(DASP：突破种鳞后的天数),香榧假种皮的开裂率增加了10倍,硬度降低了61%,假种皮厚度增加了43%;假种皮开裂时（154 DASP）,假种皮中靠近内表皮层的树脂道细胞群与其相邻树脂道细胞群之间的薄壁细胞降解,呈分离状态,且中间薄壁细胞层与内表皮层之间存在明显的分离层。2）从134～154 DASP,假种皮的水溶性果胶（WSP）总体上呈增加趋势,而CDTA可溶性果胶（SSP）和Na2CO3可溶性果胶（CSP）则呈降低趋势,其相关降解酶果胶甲酯酶（PME）和多聚半乳糖醛酸酶（PG）活性均呈...     

豌豆细菌性疫病菌的分类与检测技术研究进展

由丁香假单胞菌豌豆致病变种引起的豌豆细菌性疫病可引起寄主植物花梗、花和豆荚等萎蔫枯死,导致植株猝倒,对产量影响较大.目前在世界各豌豆重要生产区广泛发生并严重危害,至今尚无有效防治措施.为防范该病菌随着豌豆进口传入我国,需要提高对该病菌的认识,研制更加快速、高效的检测方法.丁香假单胞菌豌豆致病变种与适合致病变种等9个致病变种组成基因型Ⅰ.根据丁香假单胞菌豌豆致病变种与不同豌豆品种致病性的不同,该变种又可分为8个生理小种.利用该病菌特异性片段设计的引物进行PCR扩增产物的不同,可将上述8个生理小种分为2个系统发育群.目前,对该病菌的鉴定主要通过常规的生理生化方法和环介导等温及多位点序列分析等分子生物学方法.上述检测方法存在检测周期长、检测效率低,且不能快速区分阳性结果是否来源于病原菌活细胞或死细胞等问题.可通过探索建立实时荧光PCR和数字PCR检测方法,来实现快速准确鉴定目标菌种,并对供试菌株的活性进行鉴定的目标.     

免疫检测试纸条法检测西瓜子中的瓜类果斑病菌

将西瓜子进行表面消毒后破碎,用无菌水于4℃浸泡4h,取300μL浸提液加入250mL细菌液体培养基中,28℃150r/min培养3d,取培养液0.7mL与Agdia公司提供的瓜类果斑病菌检测试纸条样品浸提网袋中的缓冲液混匀,取混合液1mL用于免疫检测试纸条检测.该方法可有效检测出西瓜子中是否带有瓜类果斑病菌(Acidovorax avenae subsp.citrulli(Schaad et al.)Willems et al.).     

日本菜豆种子中菜豆晕疫病菌的检疫鉴定

利用MT选择性培养基从来自日本的菜豆种子样品上分离到1株细菌分离物（编号1160）,对该分离物进行培养性状观察、特异引物PCR检测、多位点序列分析、烟草过敏性反应和致病性测试。结果表明：该分离物菌落在MT上呈白色、略扁平、无水解圈,经菜豆晕疫病菌（Pseudomonas savastanoi pv. phaseolicola,Psp）特异引物PHA19/PHA95及P5.1/P3.1扩增,获到437 bp及500 bp目的条带,并与Psp菌株LMG2245及GenBank中Psp（基因登录号：AB237164、CP000058）的序列相似性均为100%。选择gap1、gltA、gyrB、rpoD 4个看家基因进行多位点序列分析（MLSA）,系统发育树显示分离物1160与Psp菌株LMG2245、1448A聚在同一分支。该分离物人工接种菜豆叶片能引起典型的黄色晕疫病害症状,接种菜豆荚果引起水渍及褐变病害症状;接种烟草叶片可产生过敏性反应。根据上述试验结果,将分离物1160鉴定为菜豆晕疫病菌。这也是全国首次从进境商品中截获菜豆晕疫病菌。     

大豆疫霉卵孢子致死温度的测定

大豆疫霉根腐病是由大豆疫霉菌(Phytophthora sojae)侵染引起的、危害极其严重的最具毁灭性的大豆病害之一.病原菌以卵孢子在土壤中越冬,在条件适宜时导致下一年大豆发生根茎腐烂.病原菌卵孢子也可以存在于患病种皮内,但其在病害循环中的作用还不清楚.卵孢子是大豆疫霉的主要传播方式.本研究中对大豆疫霉卵孢子的致死条件进行了筛选.结果表明,使用60℃湿热处理大豆疫霉卵孢子20min或80℃干热处理大豆疫霉卵孢子20min,其萌发率为0,且死亡率为100%.     

氮添加对混栽杉木-楠木叶性状的影响

[目的]氮沉降是全球性的环境问题,对植物生长有着重要影响。叶经济谱是植物在叶片水平上一系列连续变化的、有规律的权衡策略谱,是目前植物生态领域的一个重要概念。为探讨氮添加对植物幼苗叶片的影响,本研究分析了氮添加条件下单栽杉木幼苗、单栽楠木幼苗和混栽杉木-楠木幼苗的叶性状。[方法]本试验通过人工氮添加的方法,设置2个施氮水平,分别为0 kg·hm^-2·a^-1 N(对照)和30 kg·hm^-2·a^-1 N(氮添加),每个施氮水平又分别包括杉木幼苗,楠木幼苗以及杉木-楠木幼苗(杉木幼苗与楠木幼苗1:1行状混栽)3个处理。该试验分别测定和计算了杉木幼苗和楠木幼苗的株高、地径、冠幅、荧光参数、比叶质量、净光合速率、单位质量最大净光合速率和呼吸速率等8个指标。[结果]杉木幼苗的呼吸速率和光合能力显著高于楠木幼苗,但比叶质量显著低于楠木幼苗。混栽显著升高了杉木幼苗的呼吸速率和楠木幼苗的光合能力,但显著降低了杉木幼苗和楠木幼苗的比叶质量以及杉木幼苗的净光合速率。这可能是因为混栽导致了两种幼苗之间的种间竞争,两者都把更...     

豇豆花叶病毒和黑眼豇豆花叶病毒RT-Realtime PCR及IC-RT-Realtime PCR检测方法研究

建立了豇豆两种种传病毒豇豆花叶病毒(CPMV)和黑眼豇豆花叶病毒(BlCMV)RT-Realtime PCR检测方法以及双重RT-Realtime PCR检测方法。在此基础上,根据免疫学抗原抗体特异性吸附的特点,建立了CPMV和BlCMV免疫捕获反转录荧光定量(IC-RT-Realtime)PCR检测方法以及双重IC-RT-Realtime PCR检测方法。该单重及双重IC-RT-Real-time PCR检测方法具有灵敏度高、特异性强和稳定性好等优点,适用于豆类种苗中对CPMV和BlCMV的检测。     

南京地区入境水果真菌病害调查

南京地区洋水果入境主要有 2种途径 ,一是入境旅客携带 ,二是对运输工具检疫时从入境船舶食品舱中抽取的样品。随着我国国际交往日益频繁和扩大 ,旅客或其他公务人员以及国际船舶携带入境的水果在种类、数量、范围上都在不断增加和扩大 ,水果上携带疫情种类也在不断地增多。为防止外来有害生物传入 ,保障我国果蔬生产健康稳定发展 ,于 2 0 0 0年 1 0月～ 2 0 0 1年 1 0月间 ,本局对南京地区入境水果携带的真菌类群进行了较为系统的调查和分析 ,供入境水果采取相应的检疫管理措施提供技术资料。1　材料和方法1 1　样品收集和处理对送检的样…