禽流感病毒的核酸分

禽流感是一种能感染人和动物的烈性传染病,已引起巨大的经济损失,所以对禽流感的诊断防治成为当今研究的一大课题。准确、快速地诊断禽流感是防治的重要前提,EJ益发展的分子生物学技术在诊断方面无疑具有更大优势,文章就禽流感核酸分子诊断方法研究进展进行综述,对禽流感防控提供参考。     

文昌鸡中脂联素受体CDH13基因的表达

以文昌鸡为实验材料,利用RT-qPCR的方法检测在文昌鸡不同组织及腹部脂肪组织生长发育过程中CDH13的表达情况,为鸡CDH13基因的功能研究奠定基础。研究结果显示,CDH13基因在心脏、回肠、脂肪组织、小脑及肌胃中表达量较高,脂联素表达情况与之相似;CDH13基因在文昌鸡腹部脂肪组织生长发育过程中均稳定高表达,并育肥4周龄时,表达量达到最高。     

不同培养条件对4种喹诺酮类药物体外抗菌活性的影响

本试验选用目前我国已批准在兽医临床应用的恩诺沙星、盐酸环丙沙星、氧氟沙星和甲磺酸培氟沙星等4种喹诺酮类药物,对大肠杆菌的体外抗菌活性进行测定,比较了培养基酸碱度(pH)、镁离子(Mg2+)、猪血清及细菌接种量对四种药物体外抑制大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)的影响.其目的在于为该类药物在防治大肠杆菌病时提供理论依据.     

利用DNA条形码对海南特种野猪的鉴定研究

试验旨在探讨以猪的细胞色素氧化酶Ⅰ（cytochrome C oxidase subunitⅠ,COXⅠ）基因的特定区段作为DNA条形码识别海南特种野猪与其他品种的可行性和有效性。以海南特种野猪、海南野猪、屯昌猪、五指山猪及长白猪为研究对象,测定其COXⅠ基因,同时在NCBI中下载已发表的具有地方代表性的13个猪品种的COXⅠ基因序列,分析海南特种野猪与其他品种的遗传多样性、遗传距离,并构建系统进化树。结果发现,猪COXⅠ基因序列长1 419 bp,5个猪品种45个个体COXⅠ基因共检测到67个变异位点,占分析位点的4.7%,其中简约信息位点22个;5个猪品种的种内遗传距离为0.001~0.019,其中海南特种野猪的种内遗传最大,为0.019;5个猪品种的种间遗传距离为0.009~0.123,其中海南特种野猪与长白猪的遗传距离最大,为0.123;海南特种野猪杂交情况比较明显,与海南本地品种五指山猪、屯昌猪和海南野猪都有聚类,与武夷黑猪、三都黑猪、陆川猪位于一个分支,另一部分与大花白猪位于一个分支,与长白猪没有聚类。本试验结果为海南特种野猪的进一步选育提供了参考依据。     

3种中西药合剂对蛙嗜水气单胞菌体外抗菌作用研究

肝宝2000主要由龙胆、黄芩、甘草、柴胡和氟苯尼考等组成；海大速康主要由甘草素、抗应激剂和培氟沙星等组成；蛙胃肠康主要由痢原清[桃金娘科植物海南丁香（Engeeniacaryophyllata Thaunb）提取物丁香混酚和山龙眼科植物深绿山龙眼（Heliciahainanensis Hayata）有效提取物接枝聚合的大分子化合物]和乳酸TMP等组成。这些药物的共同特点是具有很强的杀菌消炎、改善胃肠功能、帮助消化、促进吸收、护肝利胆、恢复肝功能、提高免疫力、促进康复等功效。     

促卵泡素和促黄体生成素对儋州鸡生殖激素调控规律的研究

为研究促卵泡素（FSH）和促黄体生成素（LH）对儋州鸡体内其他生殖激素的调控规律,本试验通过改变FSH和LH在儋州鸡血液中的浓度,并采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）对处理前后儋州鸡血液中FSH、LH、催乳素（PRL）、孕酮（P）、雌二醇（E₂）的浓度进行测定。结果发现,注射外源性FSH和LH分别能提高儋州鸡血液中FSH和LH浓度;当儋州鸡血液中FSH或LH浓度显著升高时则均能引起PRL浓度显著降低（P < 0.05）,但当FSH和LH浓度同时显著升高时,PRL浓度显著升高（P < 0.05）;当儋州鸡血液中FSH浓度显著升高时,E₂及P浓度显著提升（P < 0.05）,且在高浓度LH的协同下提升幅度更大;当儋州鸡血液中LH浓度显著升高时E₂及P浓度升高但不显著（P > 0.05）。本研究结果表明,儋州鸡血液中FSH或LH浓度的提高均能降低PRL的浓度,并能不同程度的提升E₂及P的浓度,但FSH与LH浓度同时提高则能通过协同作用刺激E₂及P浓度的大幅提升,当E₂及P浓度过高时能通过刺激PRL的释放,负反馈调节血液中FSH与LH,并恢复血液中E₂及P浓度。     

海南特种野公猪不同世代膻味物质含量及相关性分析

【目的】通过比较不同世代杂交海南特种野公猪F1、F2、F3膻味物质雄烯酮、粪臭素和吲哚含量,及血清性激素水平的差异,揭示公猪膻味物质的变化规律及性激素的变化对膻味物质含量的影响,为选育低膻味性状的公猪提供理论基础。【方法】以12月龄F1、F2、F3不同世代杂交公猪(野猪♂×屯昌猪♀)各18头为研究对象。试验猪空腹12 h,于前腔静脉采取血液样本并提取血清样品,采血后将试验猪屠宰,按照商品猪分割标准从第三和第四颈椎之间的颈部区采集脂肪和肌肉样品。利用(ELISA)试剂盒检测血清样品雄烯酮和性激素水平及脂肪和肌肉样本的雄烯酮含量,采用高效液相色谱法检测血清、脂肪和肌肉样本的粪臭素和吲哚含量。【结果】海南特种野公猪膻味物质雄烯酮、粪臭素和吲哚在血清、脂肪和肌肉组织中非均匀分布。脂肪和肌肉组织中的粪臭素和雄烯酮含量均与血清中的粪臭素和雄烯酮含量存在显著或极显著相关性(P0.05或P0.01),脂肪中粪臭素的含量与血清中粪臭素含量的相关系数最大为0.94。公猪肉品膻味物质粪臭素、雄烯酮和吲哚的沉积量在不同杂交代公猪间存在明显差异,其中雄烯酮的沉积量随着野猪血统的增加而增加,粪臭素的沉积量则随着野猪血统的增加而降低,而吲哚的沉积量不存在随野猪血统的变化规律。性激素水平在不同杂交代野猪间存在明显差异,其中雄激素睾酮水平随着野猪血统的增加而极显著增加(P0.01),而F1公猪的雌二醇水平极显著低于F2和F3公猪(P0.01)。雄烯酮含量均与血清睾酮水平呈极显著正相关(P0.01),而粪臭素含量均与血清睾酮水平呈显著或极显著负相关(P0.01),血清雄烯酮含量与睾酮水平的相关系数最大为0.95。【结论】随着海南特种野公猪血统的增加,睾酮水平和雄烯酮的沉积量显著增加,而粪臭素的沉积量显著降低。因此,海南特种野公猪睾酮水平的变化影响粪臭素和雄烯酮含量的变化。     

基因Ⅳ型戊型肝炎病毒开放阅读框3表达的蛋白(pORF3)对L02细胞基质金属蛋白酶(MMP)表达的影响

为了探讨基因Ⅳ型戊型肝炎病毒开放阅读框3(ORF3)表达的蛋白(pORF3)影响靶细胞基质金属蛋白酶(MMP)表达的分子机制,试验运用蛋白芯片技术对比分析了稳定表达pEGFP-ORF3和pEGFP的L02细胞中基质金属蛋白酶表达谱,筛选出表达水平上调/下调的基质金属蛋白酶.结果表明,在稳定表达pEGFP-ORF3的L02细胞中,TIMP-1、TIMP-2和TIMP-4表达水平均降低.本试验结果为戊型肝炎病毒pORF3对L02细胞中基质金属蛋白酶相关蛋白表达影响的分子机制研究提供了理论依据.     

利用RNA-seq技术筛选影响文昌鸡腹脂沉积的重要候选基因

本研究利用RNA-seq技术筛选影响文昌鸡腹脂沉积的重要候选基因,旨在为低脂文昌鸡的分子育种提供理论依据。本研究结果显示,共有15 996个基因在文昌鸡腹部脂肪组织中表达,16 926个基因在儋州鸡腹部脂肪组织中表达,15 580个基因在文昌鸡和儋州鸡腹部脂肪组织中均有表达,95个基因在文昌鸡和儋州鸡腹部脂肪组织中差异表达。GO富集分析结果显示差异表达基因显著富集在细胞过程、分子活性物质运输等过程（P<0.05）。KEGG富集分析结果显示,差异表达基因在PPAR信号通路、TGF-β信号通路、不饱和脂肪酸的生物合成等途径富集。通过筛选与验证,最后确定SCD、SMOC1、IGFBP2、MSMB基因为影响文昌鸡腹脂沉积的重要候选基因。