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生长抑素基因疫苗质粒pEGS/2SS的构建及表达 总被引:7,自引:0,他引:7
将pcS/2SS中的乙肝表面抗原(HBsAg)S基因及插入S基因中的生长抑素(somatostatin,ss)基因亚克隆到pUC19中,构建成pUSS/S质粒;PCR扩增pcS/SS中SS基因,调整阅读框,融合到pUSS/S质柱S基因后,构建成pUS/2SSG质粒;最后将S/2SSG融合基因克隆到pEGFPN1中EGFP基因的5’端,构建S/2SS-EGFP融合表达质粒pEGS/2SS。酶切、测序鉴定后脂质体包裹法将pEGS/2SS转染HeLa细胞,荧光显微镜下检测荧光,ELISA检测表达产物的SS免疫反应原性。酶切和测序鉴定表明,重组质粒pEGS/2SS构建成功。pEGS/2SS转染24h后的HeLa细胞检测到绿色荧光,72h检测到强烈荧光,表明融合基因在HeLa细胞获得高表达;ELISA证实融合蛋白具有SS的抗原抗体反应原性。质粒pEGS/2SS的成功构建及表达为生长抑素基因免疫的机理及安全性研究奠定了基础。 相似文献
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由江苏工学院排灌机械研究所、北京农机化学院、浙江省机械科学研究所设计,河南新郑喷灌机厂、江苏金坛喷灌机厂、山东肥城喷灌机厂、江苏镇江市喷灌机厂、福州喷灌机厂、浙江江山水泵总厂、浙江平湖农机修造厂、南京微分电机厂、宜昌微电机厂、 相似文献
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8株鸭疫里默氏杆菌安徽分离株的生物学特性分析 总被引:1,自引:0,他引:1
鸭疫里默氏杆菌病是由鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)感染引起的主要发生于鸭的一种慢性或急性、高度接触性传染病。本研究开展了2017年分离自安徽的8株RA菌株的生物学特性研究。血清型检测结果表明,8株RA中6株为血清10型,2株为血清15型;对24种抗菌药物敏感性检测结果表明,RA对阿莫西林、头孢他啶和头孢吡啶敏感,对洛美沙星和阿奇霉素耐药;生物被膜检测结果表明,8株菌株中有7株为强生物被膜形成株,1株为弱生物被膜形成株;运用real-time PCR对强生物被膜形成菌株AH-1和弱生物被膜形成菌株AH-35中的生物被膜形成相关的5个基因进行检测,结果表明,与AH-35菌株相比,AH-1中的Riean_0023、Riean_1039和Riean_1564基因的转录水平均显著上调(p0.01)。本研究为安徽省RA的防控提供参考。 相似文献