鹅源副粘病毒NA-1株F蛋白基因的克隆及其载体的构建

鹅源副粘病毒分离株 NA- 1经 1 1日龄鸡胚增殖后收集尿囊液 ,浓缩 ,提取病毒基因组总 RNA,采用 RT- PCR方法 ,一次性扩增出与预期大小相符的特异性条带。将扩增产物提纯回收后克隆入 p MD1 8- T载体 ,经转化、筛选及酶切鉴定后 ,对阳性克隆进行了序列测定和序列分析。测序后拼接的 F基因长 1 6 72 bp,包含完整的开放阅读框 ( 1 6 6 2bp) ,编码 5 5 3个氨基酸 ,F蛋白裂解位点的氨基酸顺序为 1 1 2 R- R- Q- K- R- F1 1 7,与 NDV的强毒株特征相符 ,同时也与鹅副粘病毒分离株致病性试验结果相符。根据 NDV基因分型标准 ,鹅源副粘病毒 NA- 1株归属基因 型 NDV。将 F基因克隆入转座载体 p Fast Bac ,得到重组转座载体 PFF,将 PFF转化大肠杆菌 DH1 0 Bac,提取质粒 ,得到阳性重组穿梭载体 re- Bacm id,为下一步的转染表达奠定了基础     

PRRSV广东变异株分离及NSP2部分序列分析

2006年以来,高致病性猪繁殖与呼吸综合征在我国造成了巨大的经济损失.位于NSP2基因上的30个氨基酸的缺失已成为区分我国2006年以来的PRRSV高致病性毒株和2005年以前的经典流行毒株的特异性标记.本试验在广东省分离到一个新型的PRRSV毒株BL2,其NSP2基因540位～563位(相对于VR2332 ORFIa...     

贵州省水城县野生鸡菌资源调查

鸡 菌 Ｔｅｒｍｉｔｏｍｙｃｅｓ（Ｂｅｒｋ．）Ｈｅｉｍ．其同物异名是在我国分布于长江以志的亚热带和热带地区。味道鲜美,并具有益味、精神、治痔等功效,颇受国内外消费者的青睐,为菌中之冠,山珍之最,是我国著名的野生食用菌之一,具有极大的开发价值。受贵州省水城县委托,１９９８年７月,我们对该地的鸡 菌资源进行了调查并采集菌种,现将该地鸡 菌资源情况报告如下：１自然条件及鸡 源概况 贵州省水城县属黔西高原向黔中丘陵过渡的斜坡地带,西北高原,东南地势低,地貌类型复杂,有石灰岩峰丛山地,也有丘陵洼地。气候特点是夏…     

GIS支持下的三峡库区湖北段农业气候资源评估与区划

根据三峡库区湖北段现有气象站网和亚热带东部山区气候考察资料 ,建立其相应的光、热、水资源小网格推算模式。引入CityStar中的经纬线、数字高程等图层 ,推算了该地区 10 0m× 10 0m网格点上的农业气候资源要素值 ,再利用区划制作系统 ,按照给定的农业气候资源分区指标 ,得到该区农业气候资源区划专题图 ,为三峡库区湖北段的农业合理布局提供了农业气候依据     

鸭干扰素诱导的跨膜蛋白抑制基因3型鸭甲型肝炎病毒的增殖

旨在研究鸭干扰素诱导的跨膜蛋白(duck interferon-induced transmembrane proteins,duIFITMs)和相关细胞因子在鸭甲型肝炎病毒3型(duck hepatitis A virus genotype 3,DHAV-3)感染早期的变化规律,以及duIFIT-Ms对DHAV-3的...     

鹅细小病毒主要结构蛋白基因的扩增、克隆与原核表达载体的构建

根据已发表的鹅细不病毒（GPV）核苷酸序列设计并合成了1对引物,对GPV主要结构蛋白VP2和VP3基因进行扩增。所获得的PCR产物与预期片段大小相符,约1.8kb。将该片段直接与真核表达pCR3.1T载体连接,转化人感受态大肠杆菌TOP10F＇中增值。在对所提质粒进行快速鉴定、PCR扩增以及BamH I酶切线性化初步鉴定的基础上,经限制性内切酶Sca I 和EcoR V分别酶切进行正反向鉴定,获得了3个正向插入的克隆（PVPA）和2个反向插入的克隆（PVPB）。将正向插入的克隆PVPA1与原核表达载体pET-28b（ ）分别用BamH I和Xho I双酶切后,回收目的片段进行定向连接,并转化入感受态大肠杆菌DH5a中。对所获得的重组质粒分别经Sca I、EcoR V、BamH I/Xho I酶切,证实含有目的基因,且基因插入方向正确,成功地构建了含有GPV主要结构蛋白基因的原核表达载体,为高效原核表达以及研制更为有效的基因工程疫苗打下了基础。     

食盐防治特种水产病

食盐防治特种水产病上海市水科所向华食盐在特种水产养殖病害防治中应用广泛，具有来源广、价格低、使用方便、疗效好等优点。现将其常用验方介绍如下：鳖用３％食盐水浸洗５～１０分钟，防治钟形虫病；用４００ｐｐｍ食盐和４００ｐｐｍ小苏打合剂全池泼洒，或用３％～４...     

猫杯状病毒基因组结构与结构蛋白功能研究进展

猫杯状病毒是一种引起猫的急性口腔溃疡、上呼吸道传染病和慢性胃肠炎等病的重要病原。近年来，随着对其研究的不断深入，在病毒分子生物学方面取得了很大的进展。本文主要从基因组结构、编码的结构蛋白功能、基因疫苗等方面系统阐述了猫杯状病毒的研究进展，同时提出了存在的问题和展望。为进一步研制猫杯状病毒基因工程疫苗及诊断试剂提供理论基础，以期能更有效地防治此病。