3种转染试剂对牛原代骨骼肌卫星细胞转染条件的优化

为了选择适合牛原代骨骼肌卫星细胞的转染试剂与条件,本研究以带有绿色荧光蛋白(EGFP)的质粒pcDNA3.1-EGFP和pEGFP-C1作为外源基因,分别用Lipofectamine 3000、X-tremeGENE HP和FuGENE HD转染牛原代骨骼肌卫星细胞,通过荧光显微镜观察、实时荧光定量PCR及Hoechst 33342染色评价转染效率。结果表明,对于同一时期、同一转染试剂,pcDNA3.1-EGFP转染效果优于pEGFP-C1;不同转染试剂之间,Lipofectamine 3000和X-tremeGENE HP转染效果优于FuGENE HD。Lipofectamine 3000转染后分化72h肌管最明显,FuGENE HD次之,X-tremeGENE HP转染后细胞死亡较多。采用1.0μL Lipofectamine 3000、1.5μL Lipofectamine 3000和X-tremeGENE HP转染细胞后EGFP表达量极显著高于FuGENE HD (P0.01),但这三者之间差异不显著(P0.05)。细胞转染效率与EGFP定量结果基本一致,1.0、1.5μL Lipofectamine 3000转染效率较高,分别达26.07%和24.77%,极显著高于FuGENE HD(5.59%)和X-tremeGENE HP(10.87%)的转染效率(P0.01),但二者之间无显著差异(P0.05);X-tremeGENE HP的转染效率极显著高于FuGENE HD (P0.01)。综合考虑转染试剂的用量、细胞毒性及经济效益,本试验初步认为牛原代骨骼肌卫星细胞转染宜采用Lipofectamine 3000,其与质粒DNA的比例为1∶1时转染效率最高。本试验结果可为原代细胞的转染提供重要的参考价值。     

用EDTA络合滴定法测定饲料级硫酸锌应注意的几个问题

利用形成络合物的反应进行滴定分析的方法 ,称为络合滴定法。EDTA络合滴定法是目前应用最广的一种方法。 EDTA是乙二胺四乙酸的缩写 ,它是多基配位体中一类重要络合剂 ,能与大多数金属离子形成 1∶ 1的络合物。EDTA在水中溶解度较小 ,也难溶于酸和有机溶剂中 ,但易溶于 Na OH和氨水中 ,形成相应的盐溶液 ,通常使用的 EDTA是它的二钠盐 ,即 EDTA钠。用 EDTA标准溶液可以滴定几十种金属离子 ,虽然 EDTA与金属离子形成的络合反应有很多优点 ,但在形成络合物的过程中 ,仍存在很多复杂的问题。这是由于大多数无机络合物稳定性不高 ,…     

衡阳紫色土丘陵坡地不同土地利用方式对球囊霉素相关土壤蛋白分布的影响

为了明确衡阳紫色土丘陵坡地不同土地利用方式球囊霉素相关土壤蛋白土层分布模式及其影响因素,本试验选取自然恢复地、草地、灌草地、灌丛地和乔灌地5种不同土地利用方式样地,采集各样地0~10,10~20,20~40 cm土层土样,测定了土样球囊霉素相关土壤蛋白、土壤容重、土壤有机碳、全氮、C/N比、速效磷、土壤pH和土壤蛋白酶活性。结果表明：球囊霉素相关土壤蛋白含量为1.73~3.78 mg·g^-1,占土壤有机碳含量的14.05%~22.08%,是土壤一个重要碳库;球囊霉素相关土壤蛋白在不同土地利用方式和土层剖面之间差异显著;相关性分析表明球囊霉素相关土壤蛋白与土壤有机碳、全氮、C/N比、土壤蛋白酶、速效磷、土壤容重、土壤pH有显著相关性。研究结果表明,球囊霉素相关土壤蛋白是丛枝菌根真菌生长状况和土壤生态系统波动的一个重要指标。     

苜蓿抗寒性研究进展

在国内外大量研究成果的基础上，系统阐述了苜蓿在低温胁迫下形态、生理和生化方面适应性的变化及苜蓿秋眠性与抗寒性的关系，并对苜蓿抗寒基因工程方面的研究进展作了报道。     

肉杂鸡白痢的诊断和治疗观察

通过对鑫源鸡场,雏鸡突发疾病的症状,解剖病理变化及特征,以及临床症状检查确诊为鸡白痢.我们通过辨证施治用中药健脾利湿、清热解毒、凉血止痢,加以并用抗生素、磺胺药联合使用,对病禽治疗效果明显,98％鸡得以康复.为鸡白痢的治疗提供了治疗方案.     

一起猪亚硝酸盐中毒的诊疗

柳州市城区某村养猪户黄某饲养75头商品猪,体重在85kg左右,分栏饲养,已按照国家强制免疫过规定疫苗,在有效期内.主要采用潲水加豆腐渣、玉米作饲料饲喂,卫生环境差,猪体质良好,精神状态良好.     

家兔流行性腹胀病的诱因和防治技术研究

近年来,我国许多地方发生了大面积以胃肠膨气为特征的流行性疾病,被称之为流行性腹胀病（薛家宾等,2008）。该病的出现,给家兔生产造成重大的损失。为了探讨该病的诱发因素,笔者进行了大量的调查研究,获得一定的现场资料和临床数据。     

近交危害及其防止措施

所谓近交是指亲缘交配,它是指五代以内双方具有共同祖先的公母畜交配。在家畜中近交程度最大的是父女、母子和全同胞交配。其次是半同胞、祖孙、叔侄、姑侄、堂兄妹、表兄妹间的交配。近交是育种工作的重要工具,在培养或改良新品种中发挥着重要作用。但对于个体养殖户和...     

伊犁马速步赛成绩与体尺性状的相关性研究

试验对伊犁马速步赛的体尺性状与比赛成绩之间的相关性进行了研究。测定速步赛中不同比赛项目伊犁马的体高(X₁)、体长(X₂)、胸围(X₃)和管围(X₄),计算体长率(X₅)、胸围率(X₆)和管围率(X₇),并用SPSS 18.0软件分析其与比赛成绩之间的相关性。结果表明,在不同的比赛项目中,体尺性状与比赛用时有显著或极显著的相关性(P<0.05;P<0.01)。1000 m速步赛中比赛用时随体高、体长、胸围的增大而减少,随管围、胸围率和管围率的减小而减小;3000 m速步赛中比赛用时随体高、体长的增大而减小,随胸围率和管围率的减小而减小;5000 m速步赛中比赛用时随体高、胸围、体长的增大而减小,随管围率的减小而减小。     

再谈家兔脚皮炎:一种不可忽视的疾病

针对我国獭兔生产中越来越严重的脚皮炎疾病而未能得到重视的现象,本文分析了该疾病发生的相关因素,如年龄、品种、体重、季节和兔场环境;划分了脚皮炎临床的3种类型:脚垫型、疤痕型和溃疡型;提出有效防治家兔脚皮炎的具体措施。