苯乙醇胺A单克隆抗体的研制及ELISA检测方法的建立

为制备苯乙醇胺A(phenylethanolamine A,PA)单克隆抗体,建立一种针对苯乙醇胺A的快速、简便、灵敏度高的检测方法,本试验采用重氮化法将制备的苯乙醇胺A衍生物分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)进行偶联作为免疫原和包被原。利用弗氏佐剂充分乳化免疫原(PA-BSA),按常规免疫程序免疫6～8周龄的雌性BALB/c小鼠,选择血清抗体效价较高的小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞以PEG法进行细胞融合。结果显示,经3次细胞亚克隆筛选后,最终筛选出一株可稳定分泌抗苯乙醇胺A单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为D6H8,利用此细胞以小鼠体内诱生法制备抗体。经鉴定,D6H8腹水抗体亚型为IgG1,轻链为κ链;纯化后的抗体与沙丁胺醇、盐酸克伦特罗、盐酸异丙肾上腺素和盐酸去氧肾上腺素均无明显的交叉反应(CR0.18%),表明该抗体特异性良好。利用此抗体建立针对苯乙醇胺A药物残留检测的间接竞争ELISA方法,结果表明,腹水抗体效价为1∶12 800,猪肉中苯乙醇胺A添加浓度在5～1 000 ng/mL时线性关系良好,标准工作曲线为y=0.3861x-0.1845 (R~2=0.990),其IC_(50)为58.88 ng/mL,LOD为3.83 ng/mL,回收率在85.96%～104.32%之间。综上所述,本试验成功建立了检测苯乙醇胺A药物残留的间接竞争ELISA方法,该方法灵敏度高、稳定性较好。     

殷沟村:从扶贫车间走向致富路

正"相传很早以前,伊河沿岸是一片汪洋,唯此地为一高岭,乌鸦经常在此栖落,后人搬迁于此,取名鸦岭。"鸦岭镇位于伊川县西部,记者要去的殷沟村便位于该镇,前往途中,随行的伊川县扶贫办副主任张莉莉有趣的介绍,为这个丘陵地貌的乡村平添了几分色彩。殷沟村位于鸦岭镇西,村庄不大,有282户1320人,耕地面积1200亩,2014年被定为省定贫困村。该镇唯一的河流甘水河从村中央穿过,使这     

鑫川牧业:力做产业扶贫典范

正沿着鸦岭乡曲折平坦的乡间道路前行,两旁成熟的玉米夹道相迎,转过几道弯,视野瞬间开阔。在一片开阔地带,一个充满现代化气息的养殖场出现在眼前。这就是伊川鑫川牧业科技有限公司。该公司由洛阳鑫洛农牧集团有限公司(以下简称洛阳鑫洛农牧集团)投资兴建,是一家以"澳湖一代"种羊养殖为主导产业的现代化养殖企业。走进宽敞整洁的办公区,负责人张小伟向记者详细讲述了基地情况。该养殖基地规划占地约130     

教育红利惠及河南农村千万学子

正改革开放40年来,河南农村教育事业尤其是农村基础教育经历了从小到大、从大到强的历程。同时,农村教育的发展变化见证了国家由弱变强的历程。教育是民族振兴的基石,教育公平是社会公平的重要基础。作为人口大省和生源大省,河南农村教育的发展,具有非同寻常的重要意义。改革开放之初,由于生产力水平低下,教育普及程度很低,基本上那时期属于文盲半文盲的时代,特别是农村教育水平十分低下。随着改革开放步伐的加快,党中央、国务院把普及九年义务教育作为教育工作的头等大事,采取了一系列重要举     

2018,河南农业这样奋进

正2月6日,河南省农业工作会议在郑州召开。这次会议准确把握新形势新任务,研究实施乡村振兴战略措施,总结了2017年河南省农业农村经济工作,部署了2018年重点工作,努力开创农业农村经济工作新局面,加快推进农业农村现代化。农业农村经济稳中向好,稳中有新农业综合生产能力登上新台阶。5年来,累计建成高标准粮田5899万亩,新增产能150亿斤,达1250亿斤。农业供给侧结构性改革开创新局面。河南省政府出台     

党建引领 祥符乡村振兴别样红

开封市祥符区历史人文资源丰厚。近年来,祥符区以党建为引领,按照"产业兴旺、生态宜居、乡风文明、治理有效、生活富裕"的总要求,聚焦聚力"五大振兴",积极发挥其在郑汴港深度融合发展中的区位优势,抢抓开封市乡村振兴"1+6"示范区建设的重大机遇,统筹谋划、科学推进,擘画了祥符区乡村振兴新蓝图,开启了新时代乡村振兴的祥符模式。     

让贫困乡村夜晚亮起来

<正>万点灯光烁,两行珠翠明。灯光,是夜晚最温暖的向导。两年来,从河南睿光走出的数万盏智慧路灯,照亮着无数乡村的夜晚。乡村振兴战略首要工程是农村人居环境整治,特别是那些偏远的经济落后的乡村,人居环境整治尤显重要而迫切。而道路亮化,无疑是人居环境整治中最关键的一步。如何才能让乡村告别"夜幕降临,道路漆黑"的境况呢?河南睿光新能源科技有限公司(以下简称河南睿光)的经验和做法,     

河南:运用科技利器,助推乡村振兴

正党的十九大报告明确提出了实施乡村振兴战略,将大力推进乡村振兴提升到了战略高度,并作为七大战略之一写入党章,释放了鲜明的重农、强农信号,为我国农业农村发展带来了重大历史机遇。"可以说,农业要强,离不开科技;农民要富,离不开科技;农村要美,同样离不开科技。围绕乡村振兴战略的实施,河南运用科技这一利器,大力发展农村生产力,稳定粮食生产能力,提高农产品质量、效益和竞争力,推动农业绿色、安全和可持续发展,这是推进我省乡村振兴、加快农业农村现     

稳定表达猪圆环病毒2型Cap蛋白的CHO-K1细胞系的建立及免疫原性分析

建立高表达PCV2-Cap蛋白的CHO-K1悬浮稳转细胞系,鉴定蛋白的免疫原性,为开发新型且有效防治猪圆环病毒的亚单位疫苗奠定基础。构建重组质粒pEE12.4-PCV2-Cap,转染CHO-K1细胞,通过加压筛选,有限稀释,细胞悬浮驯化及Western blot检测得到高表达Cap蛋白的悬浮稳转单克隆细胞株,并对该细胞株进行发酵,纯化得到的目的蛋白,通过小鼠免疫验证其免疫原性。结果表明PCV2-Cap蛋白能够在CHO-K1细胞中正确表达;发酵过程中活细胞密度高达6×10~6个·mL^-1,细胞活力在80%以上,PCV2-Cap蛋白表达量约为370 mg·L^-1;利用间接ELISA检测小鼠免疫后血清中的抗体水平,证明了利用CHO-K1细胞生产的Cap蛋白具备良好的免疫原性。本研究成功构建了表达PCV2-Cap蛋白的CHO-K1悬浮稳转细胞系,并进一步对目的蛋白进行免疫原性分析,为猪圆环病毒亚单位疫苗的开发打下扎实的基础。     

盐城市出口黑田类胡萝卜优质栽培

盐城市黑田类胡萝卜产品主要用于加工出口,年播种面积逾5800hm^2,总产量达25万t,主要栽培品种是新黑田五寸、扬州红1号和美国新三红等。出口品种要求肉质根皮色、肉色、心柱色均为红色,长度15cm以上,横径3cm,表皮光滑,且农药残留、大肠杆菌、沙门氏菌等有毒有害物质不超标。