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奶牛乳腺上皮细胞的不同培养方法比较及激素和细胞因子对β-酪蛋白mRNA表达的诱导 总被引:1,自引:0,他引:1
本试验旨在建立一种高效的奶牛乳腺上皮细胞培养方法,并研究不同激素和细胞因子对其表达β-酪蛋白mRNA的诱导作用.分别采用组织块培养法和机械破碎法培养奶牛乳腺上皮细胞,利用成纤维细胞和乳腺上皮细胞对胰酶的敏感性不同,对获得的细胞进行纯化.通过细胞计数法测定纯化细胞的生长曲线,通过免疫荧光组织化学染色法检测角蛋白18的表达,通过实时定量PCR法检测8种不同激素和细胞因子组合培养液诱导细胞表达β-酪蛋白mRNA的效果.结果表明:通过机械破碎法可以分离得到增殖旺盛的奶牛乳腺上皮细胞,与组织块培养法相比,具有细胞迁出速度快等优点.细胞生长曲线呈典型的“S”型.在纯化的乳腺上皮细胞及第20代乳腺上皮细胞中都检测到角蛋白18的表达.100 ng/mL类胰岛素生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)显著提高了乳腺上皮细胞中β-酪蛋白mRNA的表达(P<0.05).由结果可知,本试验采用的机械破碎法是一种高效的奶牛乳腺上皮细胞培养方法,100 ng/mL IGF-Ⅰ对细胞中β-酪蛋白mRNA表达的诱导效果最好. 相似文献
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针对船舶电力系统相对于陆地广域电力系统的不同特性,分析传统时钟同步方法对于船舶同步向量测量单元(SPMU)的局限性,采用一种基于IEEE1588协议的卫星时钟同步与局域网时钟同步相结合的混合时钟同步技术实现SPMU的时钟同步,通过实验对同步偏差性能进行测试,结果表明时钟同步偏差维持在±500ns以内,可以满足电力系统对电力参数测量的同步精度要求。 相似文献
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在市委、市政府的高度重视下,在有关部门的支持下,我市阳澄湖大闸蟹综合养殖园,以市场为导向、以科技为动力、以结构调整为方向、以经济效益为目标,在加快农业产业化步伐,大力培育名特优水产品,推广运用高新技术,提高渔业经济效益等方面取得了良好的效果。如今已被国家列为农业综合开发项目,成为苏州市农业科技示范园区。一、完善基础配套设施,形成园区建设规模几年来,我市阳澄湖大闸蟹综合养殖园,在改革中发展,在开拓中前进。加大投入力度,加强园区基础设施建设。到目前为止,园区占地面积300亩,拥有2300m2海淡水温室培育地… 相似文献
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本试验旨在研究脂多糖应激条件下,高瘦素血症对动物血液学和激素系统各项参数的影响。选择16头马,其中8头(4头母马,4头去势公马)诊断有高瘦素血症(血浆平均瘦素含量10.0~15.5ng/mL),8头血浆瘦素平均含量2.4ng/mL(4头去势母马)和5.5ng/mL(4头公马)。采用单次交叉试验设计,成对动物或被灌注脂多糖(35ng/kg体重,溶于500mL生理盐水中,灌注30min)或被灌注生理盐水,灌注后24h监测生理学指标和血成分组成。两次试验间隔期8d。与生理盐水灌注组相比,内毒素灌注提高了动物的直肠内温度、心率、呼吸率、血浆中总蛋白含量和血细胞压积。瘦素水平、内毒素处理和时间对心率(P=0.039)、呼吸率(P=0.018)和血浆总蛋白含量(P=0.054)存在交互作用。内毒素灌注后,降低了血中白细胞数、淋巴细胞数和中性粒细胞数(P0.001)。瘦素水平和性别对血小板数量存在相互作用。灌注内毒素提高了血浆中瘦素水平(P=0.013)。性别和处理时间对血浆中皮质醇和催乳素存在交互作用,而血浆中生长激素含量(P0.001)只受灌注后时间的影响。结果表明,在本试验条件(瘦素水平较低)下,瘦素水平及其与之相关的2型糖尿病症状对血液学和激素系统影响较小。 相似文献
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作者研究了围产期奶牛血液代谢产物随时间推移的变化特点,并且研究了日粮能量浓度对酮体积聚的影响。28头经产荷斯坦奶牛根据预产期随机分为两组,一组饲喂过渡期日粮而另一组不饲喂过渡期日粮。对照组在奶牛预产期前28d直到分娩,饲喂非泌乳奶牛日粮(产乳净能(NE(L))1.54Mcal/kg,粗蛋白(CP)10.9%,中性洗涤纤维(NDF)53.1%),产后饲喂泌乳料(NE(L)1.77Mcal/kg,16.8%CP,29.9%NDF)。处理组奶牛在产前17d到产后14d饲喂过渡期日粮(NE(L)1.71Mcal/kg,16.8%CP,35.2%NDF),而后的泌乳3周内饲喂与对照组相同的日粮。尾静脉血样从前21d到产后21d,每周采集3次,用于测定葡萄糖、非酯化脂肪酸(NEFA)、β-羟丁酸、乙酰乙酸、丙酮和甘油含量。试验结果表明,奶牛产后干物质采食量、乳产量、乳成分、体重变化和体况评分的变化均无显著差异。血浆中不同酮体浓度变化趋势一致,产前无明显变化,产后上升到最高值,随后逐渐下降,但相对于妊娠后期仍保持较高的水平。血液中NEFA和甘油浓度变化在整个试验期类似于酮体浓度变化模式。饲喂过渡期日粮奶牛在妊娠后17d,血液中葡萄糖的曲线下面积(AUC)较大,而在泌乳的前21d与对照组比较无明显差异。在试验奶牛泌乳的前21d,处理组血液中乙酰乙酸的AUC大于对照组。奶牛产后的15~21d处理组血液中NEFA和甘油的AUC大于对照组。综合上述试验结果可得知,相对于产后直接转为饲喂泌乳日粮,采用奶牛过渡期日粮,无论在产前还是产后,与泌乳早期大量动员体脂以及大量积聚酮体有显著相关。 相似文献
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