猪瘟病毒C株截短E2基因在大肠杆菌中表达及免疫原性初步检测

本试验利用PCR技术,扩增得到猪瘟病毒（CSFV）C株E2基因的主要抗原片段A/D区549 bp,将其酶切纯化后,与已酶切纯化的pET-32a进行16 ℃过夜连接,转化大肠杆菌BL21。从转化成功的氨苄培养板挑取合适菌落进行PCR,挑取目的条带正确的菌落加至LB培养基进行过夜培养后送测序。将测序正确的菌液划板,挑菌培养并用IPTG进行诱导表达。得到的蛋白进行SDS-PAGE,在约39 ku位置有蛋白条带。将蛋白纯化后,分别利用自制兔抗CSFV阳性血清及临床检测阳性的猪抗CSFV阳性血清进行Western blotting检测,可见在39 ku处有单一条带,表明表达的蛋白具有免疫原性。本试验结果为下一步ELSIA试剂盒的组装奠定基础,方便对猪场免疫猪群猪瘟抗体水平进行监控。     

过氧化氢与蜂蜜的抗菌活性

随着人们对天然保健食品和添加剂研究兴趣的不断增强 ,蜂蜜在医疗上的应用引起了国外学者新的广泛关注。蜂蜜最初应用于促进皮肤伤口的愈合上 ,蜂蜜之所以有这方面的治疗效果应归功于其物理渗透性和过氧化氢的抗菌活性。Ｗｈｉｔｅ等早在196 3年就鉴定出蜂蜜中的主要抗菌物质是过氧化氢[1] ,同时发现 ,过氧化氢是由葡萄糖氧化酶产生的 ,而葡萄糖氧化酶是蜜蜂舌腺的分泌物。Ｗｈｉｔｅ等研究发现 ,来自花粉的过氧化氢酶会破坏蜂蜜中的过氧化氢 ,使其数量减少[2 ] 。Ｄｕｓｔｍａｎ (1971)发现花粉含有很高的过氧化氢酶活性 ,而在花蜜中几乎没…     

猪繁殖与呼吸综合征病毒SCQ株的分离鉴定

猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）病毒属动脉炎病毒科动脉炎病毒属，是引起母猪繁殖障碍的重要病原之一。本研究以出现繁殖障碍的母猪并通过ELISA检测为抗体阳性者的血清为材料，于2000年首次从重庆地区分离出PRRS病毒。母猪血清接种Marc-145单层细胞，经盲传至第四代时出现典型的细胞痛变效应（CPE）；细胞培养物经电镜观察，发现其中有球形的病毒粒子，粒子大小为40～80nm，核心直径为20-40nm；病毒TCID50为10—4．46／0．05mL；用抗PRRSV特异性抗体能特异地中和病毒，中和指数为100，并将该地方分离株命名为PRRSV—SCQ株。根据Genbank中PRRSV北美洲株ATCC VR-2332的序列设计一对特异性引物，以PRRS V—SCQ RNA为模板，通过RT—PCR扩增其GP5基因片段．并将该片段插入克隆载体pMD18一T的EcoRV住点；测序结果表明该GP5基因序列与PRRSV—VR2332、LV株的GP5基因核苷酸序列同源性分别为99．34％和62．14％，GP5蛋白氨基酸推导序列的同源性分别为97．51％和54．37％，揭示SCQ地方分离株与VR2332株在基因型上更为接近，应属于美洲型。     

华南地区猪圆环病毒3型分子流行病学研究

猪圆环病毒3型(PCV3)是一种新的猪圆环病毒类型,为了解PCV3在华南地区的分布及其分子流行病学,应用荧光定量PCR方法对华南地区的临床样品进行检测,然后对PCV3阳性样品进行全基因组扩增和测序,将获得的7株PCV3核酸序列与国内外参考毒株进行遗传变异分析。结果表明,华南地区送检的临床样品和猪场的PCV3阳性率分别为46.3%和69.2%,7株PCV3毒株与国内外的参考毒株同源性为97.4%~99.8%,而ORF2核苷酸及其推导的氨基酸序列同源性分别为96.6%~99.8%和96.7%~99.5%。由此可见,PCV3在我国华南地区已经广泛存在。     

新疆天山北坡经济带上甜菜原料匮乏的原因及对策

分析了新疆天山北坡经济带面临着甜菜种植比较效益低、企业服务意识差等问题，根据成功经验提出了解决问题的对策。     

含LacZ报告基因的传染性喉气管炎病毒TK基因转移载体质粒的构建

在传染性喉气管炎病毒北京Ｅ２株ＴＫ基因克隆,鉴定的基础上,进一步构建转移载体质粒,为ＩＬＴＶ ＴＫ基因缺失毒株的构建作准备,先用ＰｓｔＩ将ｐＳＶ－ｇａｌ线性化,再经ＥｃｏＲｉ不完全酶切,分离含ＳＶ４０立即早期启动子和增强子的４．２Ｋｂ的ＬａｃＺ报告基因片段,并用Ｋｌｅｎｏｗ大片段补平,将克隆ＴＫ基因的载体ｐＴＫ用ＳｎａＢＩ处理,后用Ｔ４ＤＮＡ连接酶将以上两个片段平端连续成重组质粒,转化 ＪＭ１０９     

新城疫病毒融合蛋白基因片段的构建与鉴定

本文重组和构建了新城疫病毒 ( NDV)融合蛋白基因 ,并对该基因进行了鉴定 :将新城疫病毒 F基因片段经 RT— PCR扩增 ,插入经 Eco R I/ Sal 酶切的克隆载体 p UC18及表达载体 p GEMEX,转化大肠杆菌 JM10 9株。用氨苄青霉素平板法初步筛选克隆 ,再用双酶切法、核酸探针、 PCR及核苷酸序列分析法鉴定 ,表明插入成功并且阅读框架正确     

抗原捕获聚合酶链式反应检测鸡传染性喉气管炎病毒

用针对传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）不同抗原表位的４株单抗（ＭｃＡｂ），混合包被Ｅｐｐｅｎ－ｄｏｒｆ管，捕捉ＩＬＴＶ，同时加入包含ＩＬＴＶＴＫ基因的两个引物，建立了能检测ＩＬＴＶ的抗原捕获聚合酶链式反应，得到了与预计大小一致的１２６２ｂｐ的ＰＣＲ产物，用ＴＫ基因内部酶切位点ＥｃｏＲＩ进行酶切，得到了预计大小为５９５ｂｐ和６６７ｂｐ的两个片段，证明了ＰＣＲ的产物的特异性，该方法的建立为传染性喉气管炎的快速确诊打下了基础，对于传染性喉气管炎的防制具有重要意义     

温度对解除休眠的紫椴种子萌发过程中内源激素的影响

为了揭示紫椴种子萌发的生理机制,测定已经解除休眠的紫椴种子萌发过程中内源激素含量的变化。结果表明:高温25℃时,ABA含量增加,GA、IAA含量下降,GA/ABA、IAA/ABA的比值都显著低于适温(15℃/10℃),说明高温下,抑制型激素ABA的含量占优势时,种子的发芽便会受到抑制。