绵羊NYD-SP27基因慢病毒干扰载体的构建与鉴定

构建并筛选针对干扰绵羊NYD-SP27基因的shRNA慢病毒载体。使用RNAi Target Sequence Selector软件设计并合成针对绵羊NYD-SP27基因的4条shRNA表达序列(shRNA1、shRNA2、shRNA3、shRNA4)及1条阴性对照序列(NC),分别将其连接到载体pLentiLox3.7(PLL3.7)中,得到4个shRNA干扰载体NYDSP27-shRNA及1条阴性对照载体NC-shRNA,同时将构建好的干扰载体及辅助质粒瞬时共转染至HEK-293FT细胞中,收集病毒液纯化后感染SP27-21细胞,48h后用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测NYD-SP27相对表达量,将干扰效果最好的载体用于进一步的研究中。结果表明,构建了重组慢病毒干扰载体,并成功包装成干扰慢病毒NYDSP27-shRNA-LV以及用来感染BHK-SP27-21细胞,48h后用实时定量PCR筛选出高效干扰绵羊NYD-SP27的片段NYDSP27-shRNA-1。为进一步研究NYD-SP27基因表达下调对绵羊精子发育的影响奠定了基础。     

miR-127和miR-136在转基因克隆绵羊胎盘中的表达分析及其靶基因的鉴定

克隆动物胎盘发育缺陷是造成动物克隆效率低下的一个重要原因。目前认为克隆胎盘发育异常通常是由于一些基因表达的异常所致,与表观遗传修饰有关。microRNA是一种重要的表观遗传修饰方式,对动物胚胎发育和胎盘的形成有着重要的调控作用。为研究miR-127和miR-136在克隆动物胎盘中的表达情况及其与克隆动物发育缺陷的关系,本实验运用荧光定量PCR分析了死亡克隆绵羊胎盘和同期普通绵羊胎盘组织中miR-127和miR-136的相对表达量,并鉴定了miR-127和miR-136的靶基因及靶基因在胎盘中的表达情况。结果显示,miR-127和miR-136在克隆绵羊胎盘中的表达量分别增加了3.1和2.8倍。EGFP荧光敲除实验证实,胎盘发育相关基因Rtl1是miR-127和miR-136的靶基因,同时定量PCR分析发现Rtl1基因在克隆绵羊胎盘中的表达量降低了3/5。结果说明,miR-127和miR-136在克隆胎盘中的异常表达可导致Rtl1基因的低表达,这很可能是导致克隆动物死亡的一个重要原因。     

塔什库尔干羊品系列建设与饲养管理

本文简要介绍了塔什库尔干羊品系的建设及不同阶段的饲养及管理方案,最后强调了塔什库尔干羊作为当地优良品种具有的发展潜力。     

青海省草原鼠害综合治理的回顾与展望

长期以来,人类一直在同危害草原的害鼠等进行较量.随着科学技术的进步和社会生产力的发展,防治草原鼠害的技术和手段不断得到提高和改进,而草地鼠害的发生危害规律也在不断地发生变化,以适应新的条件,继续危害草原.     

家禽呼吸道疾病的防治

目的:随着当前社会对家禽需求量的不断增加,市场供应的家禽种类和数量也在不断增加,家禽的呼吸道疾病的感染也逐年增加,病发越来越严重,因此对家禽呼吸疾病的防治迫切需要有合理的方法解决。方法:对比4个养鸡场里肉鸡呼吸疾病的现状进行分析。结果:其中两个相同环境下的养鸡场肉鸡呼吸疾病的治疗效果和治疗药物有关;另外两个养鸡场的治疗效果与养鸡场的环境有关。结论:不同的药物治疗对疾病治疗效果不同,好的环境下肉鸡感染呼吸疾病的概率比较低,治疗的效果也比较好。     

牛种布鲁氏菌A19-△VirB12标记疫苗在阿勒泰地区推广应用

为了解牛种布鲁氏菌A19-△VirB12标记疫苗在阿勒泰地区牧业村免疫牛的安全性及免疫效果,分别在阿勒泰地区3个县选取6个牧业村,采用皮下注射方式5.0×10¹⁰ CFU免疫牛种布鲁氏菌A19-△VirB12标记疫苗,共免疫犊牛300头,在接种疫苗后第7 d,观察并记录免疫牛的健康状况,并采集免疫后15 d、20 d、30 d、90 d和180 d牛血清,按照国家标准规定布病虎红平板凝集和试管凝集试验,完成免疫抗体水平监测,对免疫后180d布病阳性血清,采用布病iELISA鉴别诊断方法,区分标记疫苗免疫抗体与布病自然感染抗体。对免疫后3d、7 d以及15 d牛采集阴道拭子并提取基因组DNA,应用实时荧光PCR(Realtime-PCR)方法,开展布病病原学检测。免疫后7 d犊牛均未出现不良反应,免疫抗体在15d达到最高,阳性率为98.36%,随后逐渐下降,免疫后180 d抗体阳性率为21.67%,阳性血清经iELISA方法检测,结果均为标记疫苗免疫抗体。免疫后3 d、7 d以及15 d牛阴道拭子提取基因组DNA经Realtime-PCR检测均未检出布鲁氏菌阳性。牛...     

乳牛骨髓穿刺技术及正常骨髓象

采用骨髓穿刺技术,抽取骨髓液,检查骨髓细胞质和量的变化,以了解骨髓的生理和病理状况,作为造血系统疾病的鉴别诊断,在人医学上用来诊断白血病已有     

山羊痘的病症观察与防治

本文着重阐述了山羊痘的流行情况及诊断方法,并对临床病例应用毒瘟康,蟾恩注射液,肌肉注射头孢雷、定病毒灵进行治疗,结果表明"毒瘟康"和"蟾恩注射液"、头孢雷定联合治疗效果最好,在常发区加强养羊户对疫病的防范意识,提高饲养管理能力和技术水平,应用羊痘苗免疫注射可有效防制本病的发生。     

羊口疮疾病的诊断与治疗探讨

羊口疮病是一种羊群传染性疾病,是受病毒感染引起的羊鼻子、舌头、乳腺生水泡现象,在发病之后如果没有及时采取措施予以处理就会引发更大规模的疫情,严重损害了羊群的健康。同时,从发展实际情况来看,羊口疮病在发病之后还会导致羊群口腔疼痛、进食困难,诱发一系列疾病。为了能够更好的促进羊群健康成长,需要相关人员强化对羊口疮疾病的预防和治疗。     

特克塞尔羊与小尾寒羊杂交试验

特克塞尔(Texel)羊原产于荷兰,成年公羊体重可达115～130 kg、母羊75～80 kg,产羔率150%～160%.突出特点是肉骨比、肉脂比、屠宰率高,肌肉生长速度快,眼肌面积大,是肉羊生产的优良终端父本.