鸡CTLA-4蛋白在昆虫细胞中的表达及其单克隆抗体的制备

旨在制备鸡细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)的特异性单克隆抗体,为家禽免疫检查点和疫苗研发提供有益制剂。利用杆状病毒表达系统体外表达鸡的CTLA-4蛋白,以其为免疫原免疫8周龄Balb/c小鼠,经B淋巴细胞融合技术制备、筛选出针对鸡CTLA-4蛋白的单克隆抗体。通过间接免疫荧光、蛋白免疫印迹、流式细胞术等方法分析抗CTLA-4单克隆抗体的生物学特性。结果显示：构建了在Sf9昆虫细胞中表达CTLA-4蛋白的重组杆状病毒,成功筛选出3株能稳定分泌抗鸡CTLA-4蛋白的单克隆抗体,分别命名为：mAb-CTLA4-3D7、mAb-CTLA4-5A4、mAb-CTLA4-6A12。亚类鉴定表明,mAb-CTLA4-3D7为IgG2a, Lambda链;mAb-CTLA4-5A4为IgG3,Kappa链;mAb-CTLA4-6A12为IgG2a, Kappa链。3株单克隆抗体均能与转染真核表达质粒pCAGGS-CTLA-4-Flag的DF-1细胞和感染重组杆状病毒rBac-CTLA-4的Sf9昆虫细胞反应。单克隆抗体mAb-CTLA4-3D7与鸡的PBMC有较好的结合活性,且能与CD3<...     

绿竹锌指蛋白基因BoBZF克隆及功能初步分析

锌指蛋白在原核生物与真核生物基因转录调控中发挥着重要作用.采用RT-PCR和RACE技术,从绿竹叶片中分离到1个锌指蛋白基因,命名为BoBZF(GenBank登记号:EU606025).BoBZF cDNA全长1 076 bp,编码256个氨基酸.蛋白结构分析表明,其编码的蛋白具有2个B-Box结构域,属于B-Box型锌指蛋白.组织特异性表达显示BoBZF在叶片、叶鞘、幼茎和根中均有表达,其中在叶片的表达丰度较高.将BoBZF置于CaMV 35S启动子控制下,构建到载体pBI121的多克隆位点,并转化拟南芥.RT-PCR分析表明,BoBZF已在拟南芥中表达.转基因植株耐旱性明显提高,意味着BoBZF与竹子的耐旱能力有关.     

地方柴鸡中J亚群禽白血病与马立克氏病的混合感染

2008年9月,山东省菏泽市某柴鸡养殖专业户6 000只鸡80日龄时开始发病,至120日龄时死亡率高达15%.病鸡颜面苍白,机体进行性消瘦,瘫痪,最后衰竭死亡.部分鸡只可见单侧肢体麻痹症状和皮肤型肿瘤.对66份采自发病鸡群的血清及新生羽毛囊进行血清学检测.琼脂扩散试验结果显示所采的66份待检羽髓抗原MDV阳性率为59.09%,血清中MDV抗体阳性率为65.16%,抗原、抗体双阳性率为37.88%.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测鸡血清中ALV-J、REV抗体,结果显示ALV-J抗体阳性率为7.58%,REV抗体检测会部呈阴性.剖检病鸡可见内脏器官普遍肿大,肝、脾、肾表面及切面有大小不等的灰白色肿瘤样结节.病理组织学观察肿大的器官和组织内都有不同程度的淋巴细胞增生,并可在肝、脾、肾、腺胃等组织内同时观察到淋巴细胞样瘤细胞和髓样瘤细胞2种典型的肿瘤灶.免疫组织化学检测结果表明,发病鸡组织内同时存在MDV和ALV-J抗原的阳性信号.PCR检测结果显示6只来检病鸡MDV和ALV-J均呈阳性,都扩增出相应的条带,REV未扩增出任何条带,PCR呈阴性.以上结果表明地方柴鸡鸡群中存在MDV和ALV-J的共感染,提醒我们应当注意地方柴鸡肿瘤性疾病的预防和净化工作.     

试论农业种植各因素在农业种植结构中的影响

在现阶段下,土壤、肥料、植物营养、栽培等不合理运用产生了一系列的严重的生态环境问题。现代农业要寻求可持续发展的模式以及相关思路,要思考农业种植各因素在农业种植结构中的影响,要考虑到在农业种植结构中,农业种植各因素的有效利用要适应中国有机农业的新技术。要依靠科技,提高栽培农作物的单产量,奠定种植业的调整的物质基础。     

葡萄科学施肥技术

葡萄在生产上一般采用密植栽培，根系在定值沟中交叉密集，土壤中的营养满足不了多年生长和结果的需求，所以每年应该轮换进行深翻施肥，增施有机肥，减少土壤板结、水土流失，增加有机质，利于葡萄根系的生长。     

低熵下的我国外贸发展方式的转变研究

分析了我国对外贸易发展现状，从外贸依存度、出口结构、贸易摩擦等方面探讨了我国对外贸易中存在的问题，阐述了贸易壁垒对我国外贸发展的影响，并提出了相应的对策与建议。     

鸡支原体病这样治好

<正> 鸡支原体病的感染是极为普遍的。因其一般不会造成明显损失而且秉承较长,所以容易被人们所忽略。以前曾一度称之为呼吸道病。实际当中支原体单一感染极为少见,应引起足够重视。一、发病情况沧州张会亭饲养艾维因商品肉鸡5000羽,在20日龄二免新城疫后出现呼吸道症状,表现为病鸡窦部肿胀,甩鼻流鼻液,咳嗽,呼吸罗音,流泪,眼内有气     

商品蛋鸡成髓细胞瘤、血管瘤型J亚群白血病病理学初报

2007年7月,山东某鸡场8 000余只150日龄海兰褐鸡发病,病鸡特征性表现衰竭、消瘦和血管瘤。大体病变：内脏器官肿大,表面及切面可见大小不等的灰白色结节;血管瘤大小不等、富有弹性,内含大量血液,血液内富含成髓细胞;组织学病变：肝脏、脾脏、骨髓、肠管和胰腺浆膜面有大量的胞质含嗜碱性颗粒的成髓细胞增生,同时在肠管固有层出现明显的肠腺上皮细胞和网状细胞增生,腺胃固有层出现明显的网状细胞增生,血管瘤为典型的海绵状血管瘤,可见其发展的各个阶段;免疫组织化学检测：经REV与ALV-J单克隆抗体检测发现,REV抗原阴性,而ALV-J抗原强阳性。在骨髓、肝脏及其它组织内的成髓细胞内、血管瘤海绵状壁层内皮细胞、增生的肠腺上皮细胞、腺胃腺小管上皮细胞、网状细胞内及部分间质内可见强阳性信号。因此,此病为成髓细胞瘤、血管瘤型并伴发多种肿瘤的J亚群白血病,这在国内外尚未见报道。     

小麦全生育期化学农药零使用效果初探

与常规防治相比较,在小麦全生育期完全不使用化学农药,仅采用农业防治、灯诱、黄板诱杀、释放天敌、生物菌剂、免疫诱抗剂等方法来防治小麦主要病虫害,对小麦白粉病、纹枯病总体防治效果明显较好,对小麦麦蜘蛛、蚜虫防效无显著差异,对一代黏虫药后7 d、14 d防效为77.45%、82.29%,虽低于常规防治处理93.81%、88.69%的防效,但持效性好;小麦出苗率显著增加,促进生长发育效果明显,产量显著提高。     

中华猕猴桃黄肉新品种‘奉黄1号’的生物学特性及其主要栽培技术

以中华猕猴桃‘奉黄1号’为研究材料,‘金丰’(亲本)和‘金果’(相似品种)为试验对照,对其主要生物学特性进行了系统观测与分析,以探明中华猕猴桃黄肉新品种‘奉黄1号’的生长发育规律与开发利用价值,可为其推广栽培及制定合理的栽培管理措施提供理论依据。研究表明,在江西省宜春市奉新县地区,‘奉黄1号’初花期在4月中旬,盛花期在4月下旬,果实成熟期在9月下旬,中熟、四倍体;果实宽椭圆形,果形指数为1.56;果实可溶性固形物含量为18.73%,干物质含量为18.96%;可溶性糖含量为7.68%,可滴定酸含量为1.15%,抗坏血酸含量为53.72 mg/100g;果肉呈金黄色,肉质细嫩,风味甜香。该品种在奉新地区表现出适应性强、抗性强、丰产、优质、综合性状良好等特点。本品种在无霜期140 d以上,≥10℃积温达1600℃以上的地方均可栽培。宜选择海拔800 m以下,pH6.0～7.0,土壤有机质含量丰富、疏松肥沃、灌溉方便的砂质土壤建园。成龄猕猴桃园一般每年施肥2~3次,萌芽肥以速效N肥为主,壮果肥以速效P、K肥为主,秋季基肥以有机肥为主。架式宜采用水平大棚架。株行距3～3.5 m×4～5 m,雌雄株比例为8:1,授粉雄株宜用‘奉雄2号’。蕾期及时折梢修剪、幼果期及时疏果与套袋。采用单干双主蔓多侧蔓整形方式,冬季修剪时可采用长蔓修剪法,短截、疏删与回缩相结合。