日本血吸虫Sj CyclophilinA基因的克隆、表达及其生物学功能研究

【目的】克隆和表达了日本血吸虫CyclophilinA(Sj CyPA)编码基因cDNA,分析其在日本血吸虫不同发育阶段虫体的表达情况,评估该重组抗原在小鼠体内诱导的抗血吸虫免疫保护效果。【方法】从实验室构建的7天童虫消减cDNA文库中,PCR扩增一EST序列的基因全长cDNA,提交到NCBI,登录号为GQ403666。应用荧光实时定量PCR分析该基因在日本血吸虫不同发育阶段虫体的表达情况,以pET28a(+)为载体构建重组表达质粒,并在大肠杆菌中表达。诱导、表达、纯化和复性重组蛋白,测定其PPIase活性。利用Western blot检测重组蛋白的抗原性。以重组抗原免疫小鼠,评估其对小鼠诱导的免疫保护效果。【结果】PCR获得了Sj CyPA编码基因的全长cDNA,其开放阅读框为519bp。荧光实时定量PCR分析表明,该基因在13d童虫表达量最高,为童虫期高表达基因。构建了重组表达质粒pET28a(+)-Sj CyPA,并在大肠杆菌中成功表达。复性重组蛋白具有PPIase活性。Western blot试验显示该重组蛋白具有良好的抗原性,在小鼠免疫试验中,与空白对照组比较,免疫组小鼠获得18.72%的减虫率和44.6%的肝脏减卵率。【结论】获得了日本血吸虫童虫期高表达的Sj CyPA基因的全长cDNA,成功构建了Sj CyPA原核重组表达质粒,在大肠杆菌中成功表达,纯化复性得到有PPIase活性的Sj CyPA重组蛋白,并证实该重组抗原在小鼠体内诱导产生了部分免疫保护效果。     

日本血吸虫SjPRMT1基因的克隆、表达及表达产物的免疫保护效果分析

【目的】克隆和表达日本血吸虫精氨酸甲基转移酶1(SjPRMT1)编码基因cDNA,分析其在日本血吸虫不同发育阶段虫体的表达情况,评估该重组抗原在小鼠体内诱导的抗血吸虫免疫保护效果。【方法】从实验室构建的7d童虫消减cDNA文库中,获得一个EST序列,经序列测定和生物信息学分析命名为SjPRMT1,以SjcDNA为模板,获得其全长cDNA。荧光实时定量PCR分析该基因在童虫和成虫的表达情况。以pET28a(+)为载体构建重组表达质粒,Western blotting检测重组蛋白的抗原性与免疫原性,利用重组抗原免疫小鼠评估其免疫保护效果。【结果】获得了SjPRMT1编码基因的全长cDNA,开放阅读框为660bp,编码219个氨基酸。荧光实时定量PCR分析该基因在18d童虫高表达,13和23d次之。获得了SjPRMT1重组蛋白,其具有良好的抗原性和免疫原性。在小鼠免疫试验中,与空白对照组比较,免疫组小鼠获得35.07%的减虫率和48.66%的肝脏减卵率。【结论】获得了日本血吸虫童虫期高表达的SjPRMT1基因的全长cDNA,成功构建了pET28a(+)-SjPRMT1重组质粒,该重组抗原在小鼠体内诱导产生了部分免疫保护效果。     

梨Dof家族基因鉴定及其在宿存与脱落萼片中的表达分析

根据苹果、拟南芥等植物中的Dof转录因子基因序列,利用BLAST软件鉴定到梨基因组中51个PbDof基因,分为9个亚家族。基因结构分析表明,PbDof的内含子数为1～3个;启动子区域含有5种胁迫响应和9种植物激素的顺式调控元件;基因复制结果显示,PbDof在物种进化过程中主要受纯化选择的作用。以蒸馏水为对照,于‘库尔勒香梨’盛花期喷施外源GA3和PP333,并采qRT-PCR技术检测各处理条件下宿萼组和脱萼组子房和萼片中PbDof的表达情况。结果表明,处理9d后,PbDof34和PbDof51的表达量在GA3处理宿萼组萼片中均显著高于PP333处理脱萼组,且PbDof34显著高于对照;而PbDof16、PbDof19和PbDof44的表达量在GA3处理宿萼组萼片中均低于PP333处理脱萼组;此外,PbDof16和PbDof44的表达量在PP333处理脱萼组萼片中均显著高于对照。因此,PbDof34和PbDof51可能正向调控萼片宿存,PbDof16、PbDof19和PbDof44可能正向调控萼片脱落。     

刺参的池塘养殖技术

池塘建造：水源及水质要求水源要充沛、清新肥沃、无污染,尤其不能有油类污染,严禁淡水排入,盐度要常年稳定。水质理化指标符合要求,盐度28‰～33‰,pH值7．8～8．7,溶解氧5mg／L以上,有机物耗氧量1．4mg／L～2．3mg／L,硫化氢测不出,氨氮0．1mg／L以下。     

基于物联网的畜产品溯源系统的构建

[目的]提高畜产品从生产到消费流通过程中的管理和质量追溯能力.[方法]通过结合物联网、二维码及溯源等技术,构建基于物联网的畜产品溯源系统.[结果]该系统为养殖户和管理者提供畜产品在栏内的管理及在流通中的管理和查询,并能为消费者提供产品的溯源信息.[结论]该系统具有灵活性和通用性,可以成为养殖户、质量监督部门及消费者的信息平台,还可以促进畜产品的品牌建设,提升畜产品的品牌效应.     

优质高产新品种九谷10号选育报告

九谷１０号新品种是吉林市农科院作物所于１９８７年用品种间有性杂交方法,经多年选育而成。原品系代号为８７１０６。主要特点是中熟、优质、高产、稳产、抗病、抗倒。     

漠斑牙鲆养殖技术之一:盐碱地低盐水池塘养殖漠斑牙鲆技术研究

漠斑牙鲆(Paralichthys lethostigma),英文名Southern flounder,属鲽形目(Pleuronectiformes),鲆科(Bothidae),牙鲆属(Paralichthys),是一种具有较高营养价值和商业捕捞价值的比目鱼类,原产于美国大西洋沿海,主要分布于美国北卡莱纳州至加州北部至佛罗里达北部、佛州坦帕湾以及南德克萨斯州墨西哥湾沿岸咸、淡水水域,并可进入河流中.     

油用牡丹果树下种植管理技术

正1油用牡丹特性1.1形态特征牡丹为芍药科芍药属多年生落叶小灌木,生长缓慢,株型小,牡丹成株期高1~2 m。根为宿根、肉质,主根长达1 m;根皮和根肉的色泽因品种而异。枝干直立而脆、圆形,从根颈处丛生数枝而成灌木状。当年生枝光滑、草本,黄褐色,第2年开始木质化,秋后有干梢现象。多年生枝干表皮褐色,常开裂而剥落。叶互生,叶片通常为二回三出复叶,枝上部常为单叶,小叶片有披针、卵圆、椭圆等形状,顶生小叶常为2~3裂;叶上面深绿色或黄绿色,下为灰绿色,光滑或有毛。总叶柄长8~20 cm,表面有凹槽。花     

猪的生态养殖技术

随着养殖业的不断发展,猪的生态养殖逐渐从重数量演变为以质量为主.以往的猪养殖模式有着很多不合理的现象,譬如污染严重、滥用抗生素、存在严重药物残留、欠缺畜产品安全保障等一系列问题,这给广大消费者的权益造成了影响.所以,大力提倡猪的生态养殖,是应对食品安全危机与环境危机的有效措施.     

日本血吸虫SjZFP1181-786 bp基因序列编码蛋白的免疫保护效果评估

根据日本血吸虫锌指蛋白SjZFP1的抗原位点预测结果，选取编码基因中抗原表位富集的181~786 bp核苷酸序列(SjZFP1-1)表达制备重组蛋白抗原rSjZFP1-1/His，构建重组真核表达质粒pcDNA-SjZFP1-1，并开展动物免疫实验，评估免疫保护效果。在两次独立的免疫实验中，与相应对照组相比，rSjZFP1-1/His单独免疫组以及pcDNA-SjZFP1-1与rSjZFP1-1/His联合免疫组均产生较高水平的特异性抗体，但平均虫负荷、肝脏虫卵数无显著性减少。研究结果显示rSjZFP1-1/His不能诱导有效的抗感染免疫，今后可进一步开展SjZFP1蛋白N-端肽段编码序列的表达和效果评估。