日本血吸虫ELAV-like 2基因的克隆、表达及功能分析

日本血吸虫成熟雌虫所产虫卵是造成宿主病理损害及疾病再传播的根源,因此从控制雌虫生殖发育入手对控制血吸虫病的发生具有重要意义。本研究通过5′-RACE和3′-RACE获得了在发育阻遏雌虫中高表达的SjELAV-like 2基因的全长序列,并对其进行克隆和表达,制备了相应的多克隆抗体,Western blotting分析结果表明该蛋白质具有良好的反应原性;实时定量分析发现该基因在血吸虫童虫时期高表达,成熟后趋于稳定,且在雌虫体内的表达量显著高于同时期合抱雄虫;该基因在雄虫体内的表达量基本恒定;免疫组化研究发现,在血吸虫成虫雌虫该蛋白主要定位于虫体体被。利用RNA干扰技术对该基因的生物学功能进行了初步研究,RT-qPCR结果显示,RNAi可明显抑制SjELAV-like 2基因的表达;对该基因表达的长期干扰导致受干扰虫体产卵能力及卵胚孵化能力的下降,统计分析发现,干扰组宿主每克肝荷卵减少达39.67%(P0.01),虫卵的卵胚孵化减少达75.56%(P0.01)。扫描电镜观察发现,与NC组相比,siRNA干扰组虫体体被上泡状突出物明显增多,这些结果表明SjELAV-like 2基因对日本血吸虫生长发育具有重要影响。     

日本血吸虫Ⅴ型胶原蛋白α1链的原核表达分析

目前广泛应用的各类胶原及胶原蛋白多为人工提取的方法获得,为了得到高纯度原核表达的胶原蛋白,本研究构建了血吸虫V型胶原蛋白（Schistosoma japonicum type V collagen,Sj Col V）（a1）基因AY815998.1的原核表达质粒,并对其进行了原核表达。结果表明SjColV（a1）蛋白能在大肠杆菌BL21（DE3）菌株中高效表达,但原核表达的融合蛋白不够稳定,且存在形式多样。本文就其表达情况进行了分析,并纯化得到原核表达的全长rSjColV（a1）,用V型胶原蛋白的单抗对其进行鉴定,同时分析其在？80℃保存的稳定性,研究结果为SjColV（a1）的深入研究和利用提供了一定的理论依据。     

生猪溯源查询系统的构建

为了提高生猪产品从生产到销售过程中的管理和质量追溯能力,结合RFID编码、二维码的编解码等技术,构建基于RFID和安全的二维码的生猪溯源查询系统。该系统实现了养殖户和管理者对生猪产品在栏内的管理及在流通中的管理和查询,并能为消费者提供产品的溯源信息。结合大庆某猪场的实例证明系统具有灵活性和通用性等特性,可以成为养殖户、质量监督部门及消费者的信息平台,能够在生猪产品流通过程中的起到提高质量保障的作用。     

日本血吸虫重组IAP蛋白的免疫保护效果评估

为研究日本血吸虫凋亡蛋白抑制因子（inhibitor of apoptosis protein of Schistosoma japonicum,SjIAP）重组蛋白诱导BALB/c小鼠的免疫保护效果,利用PCR技术扩增SjIAP基因,构建重组表达质粒pET-28a（＋）-SjIAP,诱导表达重组SjIAP蛋白,并利用重组蛋白制备兔源多克隆抗体血清。然后,选用SjIAP重组蛋白免疫BALB/c小鼠,利用ELISA检测免疫小鼠血清中的特异性抗体水平,以及免疫小鼠脾脏淋巴细胞在SjIAP重组蛋白刺激后产生的细胞因子水平。强化免疫后,将小鼠进行血吸虫尾蚴攻虫试验,感染38 d,进行剖杀,计算虫体减虫率及肝脏减卵率。Western blot结果表明本研究制备的兔源多抗血清能特异性识别SjIAP重组蛋白。ELISA检测表明免疫SjIAP重组蛋白可诱导较高水平的IgG及IgG亚型（IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3）抗体和IFN-γ、IL-2及IL-4细胞因子。动物试验表明,免疫SjIAP重组蛋白的小鼠与PBS组相比分别获得了31.5%的减虫率和37.2%的肝脏减卵率。免疫SjIAP重组蛋白能诱导小鼠获得一定减虫和减卵保护效果,提示血吸虫凋亡蛋白抑制因子可作为抗血吸虫病的疫苗候选分子。     

南美白对虾养殖技术之五地下卤水培育南美白对虾苗种技术

南美白对虾(Penaeus vanamei)是原产于美洲东太平洋沿岸水域(从墨西哥至秘鲁北部)的热带经济虾类,具有广盐性、生长快、抗病力强、适合高密度养殖等特点,近几年来在我国各地广泛推广养殖.为探索利用地下卤水进行南美白对虾苗种培育技术,我们于2001年开展了"地下卤水南美白对虾优质苗种培育技术研究"项目,获得成功.     

基于GSA-SVM的畜禽舍废气监测缺失数据恢复方法

针对畜禽舍内废气监测过程中因传感器故障等原因造成部分监测数据缺失的问题,将遗传模拟退火算法与支持向量机相结合,提出一种基于GSA-SVM的缺失数据恢复方法。该方法综合考虑畜禽舍废气监测值对应的时间、空间和环境等多种影响因素,建立支持向量机回归预测模型对缺失的监测数据进行恢复性估算;为获得更好的预测结果,使用遗传模拟退火算法对模型参数进行优化。以氨气浓度数据的恢复为例,随机选取某养殖场3 d的监测数据验证。结果表明,缺失数据估算最大相对误差为6.69%,平均相对误差为1.87%,估算数据与监测数据误差很小,可有效对缺失性数据进行恢复,为畜舍废气监测提供可行数据恢复处理方法。     

果树地下施草与地面覆草对比试验

目前施用草肥有地面覆草和地下施草两种方法,前一种方法,较简便易行,能起到保水增肥,减少地表径流及水土流失等作用.但若是长年不耕翻,则易引起果树紫纹羽病和其它病害、鼠害和火灾的发生,并严重打破果树根系的自然分布,引根向上,造成不抗旱、不抗涝、不抗冻,直接影响果品产量和质量.     

大菱鲆工厂化养殖技术介绍（下）

(2)水质管理 水质主要通过换水量来调控,换水量要根据养殖密度、供水状况、摄食状况、季节因素等方面进行综合考虑。一般保持5-10个循环量/天,冬季少一些,夏季多一些。水温长期处于22℃以上时,要加大换水量和采取降温措施,以防发生高温反应而导致死亡。每次投喂后,拨开池外排污管,使池水快速旋转流出,同时用长柄     

植物生长调节剂对蕉柑果皮油胞层发育和果皮光滑度的影响

通过分析不同处理油胞层厚度增长曲线、并应用电子计算机技术根据油胞层厚度与其薄壁细胞平均直径的关系判断其细胞分裂停止期。结果表明,表现出增加果皮光滑度趋势的生长调节剂处理,抑制油胞层厚度的增长,油胞层薄壁细胞分裂停止较早;而表现出降低果皮光滑度趋势的处理则有相反的结果。对这种对应关系进行了讨论。