基于dnaJ基因的弧菌PCR检测方法

[目的]建立一种能扩增dnaJ基因全长的PCR检测方法,为弧菌的快速筛查及种类鉴定提供技术支持.[方法]以弧菌dnaJ基因为靶基因,在其首尾的保守区域设计一对简并引物,经优化退火温度和引物浓度,建立能扩增弧菌接近全长dnaJ基因的PCR检测方法,并通过特异性试验、灵敏度试验和临床应用评价等验证其适用性.[结果]优化后的PCR反应体系50.0 μL:2×F8 FastLong PCR MasterMix 25.0 μL,上、下游引物(20 μmol/L)各2.0 μL,DNA模板5.0 μL,灭菌水补足至50.0 μL.扩增程序:94℃预变性3 min;94℃ 10 s,55℃ 15 s,72℃ 15 s,进行35个循环;最后72℃延伸5 min.该PCR检测方法对副溶血弧菌、哈氏弧菌、创伤弧菌、河流弧菌、溶藻弧菌、拟态弧菌、霍乱弧菌和栖黑海弧菌等8种弧菌属细菌具有很强的特异性,对弧菌的最低检出限为102CFU/mL.应用建立的PCR检测方法对51株分离自海水样品的弧菌和32株分离自对虾样品的弧菌进行检测,结果显示全部为阳性,其中,海水样品中包括有副溶血弧菌、溶藻弧菌、创伤弧菌、河流弧菌、哈氏弧菌和栖黑海弧菌,对虾样品中包括副溶血弧菌、溶藻弧菌、创伤弧菌、河流弧菌和哈氏弧菌;经测序及同源性比对分析发现,种间菌株的dnaJ基因序列相似度为79.5%~92.8%,种内菌株间的dnaJ基因序列相似度为98.2%~99.9%.[结论]基于dnaJ基因建立的弧菌PCR检测方法能扩增出弧菌接近全长dnaJ基因,具有快速便捷、灵敏准确、适应性好等优点,结合测序技术,可为弧菌快速筛查及种类鉴定提供更全面和更准确的技术手段.     

淮安市水稻种植户选择农业社会化服务影响因素研究

通过问卷调查获取数据,运用二元Logistic回归模型,分析了淮安市水稻种植户通过农业社会化服务完成农业生产的影响因素。结果表明,年龄、是否参加过农业社会化方面的培训、水稻种植规模、是否注册家庭农场、农业社会服务宣传力度、政府是否有补贴等通过了显著性检验,说明这些因素对水稻种植户采用农业社会化服务有显著影响。针对影响因素,提出了加大宣传和培训力度,并将家庭农场作为重点服务对象的对策建议。     

NO对氮胁迫棉花幼苗根系形态的调控效应

以‘农大棉8号’为试验材料,在水培缺氮的情况下,利用一氧化氮(Nitric oxide,NO)的供体硝普钠(Sodi-um nitroprusside,SNP)处理棉花幼苗,研究了外源NO对氮素胁迫条件下棉花幼苗根系形态的调控效应。结果表明:外源NO能够增加氮素胁迫下棉花根长、根表面积、根体积、主根直径和根干重。低浓度的NO(SNP浓度50～100μmol/L)能显著提高根表面积9.39%、根体积10.78%、主根直径8.63%、根系干重39.2%;高浓度NO对氮素胁迫缓解效应较弱。因此,在本试验条件下,低浓度的NO(SNP浓度50～100μmol/L)表现对氮素胁迫下棉花根系生长具有良好促进效应,可能利于增强棉花的抗逆性。     

60Co-γ辐照对稻草酶解糖化效果的影响

采用不同剂量60Co-γ辐照预处理稻草秸秆,然后酶解糖化。结果表明,经400、800、1 200、1 600、2 000 kGy辐照处理的稻草酶解反应96 h后,聚糖转化率较对照分别提高了1.5、2.2、3.0、3.1、2.6倍。一定剂量的60Co-γ辐照导致稻草的纤维素和半纤维素含量降低和微观物理结构的破坏,这是使稻草酶解糖化效果改善的原因;而高剂量的60Co-γ辐照会降低酶解反应体系的pH,从而影响稻草的酶解糖化转化率。     

白背飞虱海藻糖酶Treh-2基因克隆及生物信息学分析

利用同源克隆及RACE方法,从白背飞虱Sogatella furcifera中克隆获得海藻糖酶基因(Treh-2)全长cDNA序列(GenBank登录号:JX204291),该基因全长为2 065 bp,包含73 bp 3,UTR和150 bp5,UTR,开放阅读框(ORF)为1 842 bp,编码613个氨基酸。该基因预测蛋白分子质量为70.45 ku,等电点为5.65,有5个预测糖基化位点,有1个信号肽结构。进化分析结果显示,白背飞虱海藻糖酶Treh-2与其他昆虫海藻糖酶Treh-2同源性较高,与灰飞虱相比,同源性为95%,与褐飞虱相比较,同源性为93%。海藻糖酶Treh-2基因克隆和比较分析为进一步深入研究白背飞虱迁飞能力与能量代谢具有重要意义。     

新疆温性草原土壤pH特征及影响因素

土壤pH是影响草地生态系统植物生长和土壤养分有效性的主要因素之一,现有研究发现其受到海拔、气候和土壤理化性质的影响。之前研究多集中在这些因子对表层土壤pH变化的影响,而不同土层pH对这些因子的响应是否一致仍缺乏探讨。基于此,本研究以新疆温性草原为研究对象,于2011-2013年对86个样地的不同土层(0-5、5-10、10-20、20-30、30-50、50-70和70-100 cm)土壤pH和相关理化性质(土壤有机质、土壤全氮含量、容重和土石比)进行测定,并重点分析了地表微环境(凋落物、立枯、覆沙、砾石、风蚀和水蚀程度)对不同土层pH的影响,以及海拔、气候(年均温度和年均降水量)和相关理化性质与土壤pH之间的关系。研究发现:1)随土层增加,土壤pH呈逐渐增大的变化特征,而土壤有机质和全氮含量则呈降低的趋势。2)凋落物、砾石和风蚀对各土层pH均无显著影响(P> 0.05),立枯显著降低了0-50 cm各土层中pH (P <0.05),水蚀仅增加了0-20 cm各土层pH,覆沙则降低了70-100 cm土层中pH。3)各土层pH与海拔以及0-10 cm土层pH与年平均温度之间...     

虾原肌球蛋白诱导小鼠过敏性哮喘气道重塑模型的研究

以虾原肌球蛋白每周腹腔注射致敏小鼠1次,连续3周,再持续进行6周滴鼻激发诱导小鼠发生气道重塑.采用ELISA法检测血清总IgE水平,测定肺气道阻力,HE染色观察肺组织形态学变化,PAS染色观察气道上皮细胞黏液分泌状态,Masson三色法检测胶原纤维增生,免疫组织化学法检测肺组织a-平滑肌肌动蛋白的表达,以探索建立一种以...     

谷氨酰胺对免疫应激仔猪免疫器官指数的影响

本试验研究谷氨酰胺对免疫应激仔猪免疫器官指数的影响。采用2×2析因设计,选用28 d±2 d断奶的大白×长白断奶仔猪96头,按体重相近原则随机分为4组。第1组为对照组,第2组为免疫应激组,第3组为谷氨酰胺组,第4组为谷氨酰胺+免疫应激组。试验期14 d。结果显示,免疫应激降低了脾脏指数和胸腺指数(P0.01);谷氨酰胺的添加提高了免疫器官指数(P0.01)。表明日粮谷氨酰胺可显著缓解仔猪脂多糖应激引起的免疫器官的发育受阻。     

烟区气候因子与烟叶化学成分的相关性分析研究

通过收集云南昭通烟区气象条件、化学分析和现代数理统计分析等方法,系统研究了云南昭通烟区气候因子与烟叶化学成分的相关性关系。结果表明,气候因子与烟叶化学成分关系密切,在一定范围内,随着气温的升高和日照时数的增加以及降水量的减少,烟叶氯、硫以及石油醚提取物含量呈现增加的趋势;降水量增加,烟叶烟碱和烟叶中氯、石油醚提取物含量呈现增加的趋势。     

企业管理与激励机制研究

管理与人类的实践活动犹如时间与物质运动。没有脱离时间的物质运动,也没有脱离管理的实践活动。当今社会,管理水平的高低代表了生产力水平发展的高低,发展中国家经济之所以落后,可以归结为管理落后;发达国家经济之所以发达,可以归结为管理先进。一个企业的兴衰在于管理,一个集团的荣辱在于管理,一个国家的存亡依然在于管理。那如何提高管理者的能力,又如何提高管理者的管理水平呢?这正是本文所要探讨的。