重金属污染的蔬菜修复机制初探

通过各种蔬菜的重金属污染现状,了解蔬菜对重金属的吸收与富集规律,探讨蔬菜修复重金属污染的机理,为进一步开展蔬菜治理重金属污染提供参考。     

基于专用性投资水平视角下的农地流转交易费用研究

针对农地流转产生的较高交易费用这一问题,运用交易费用及不完全契约理论,通过不完全契约模型,分析了农地流转中的交易费用的核心部分——专用性投资的水平.研究表明在“买方市场”下,农地流入方获得了流出方改善土地质量等方面投资的剩余决策权;专用性投资水平较高,有利于农地的可持续利用.但是,较高的专用性投资水平却增加了流入农户的负担.最后针对这一矛盾关系提出了一些相应建议,以期达到合理控制交易费用、促进农地流转的目标.     

西葫芦病毒病识别与综合防治技术

西葫芦病毒病又称花叶病,是葫芦科蔬菜的一个重要病害。据近几年调查,无论是露地栽培还是保护地栽培均有发生,一般露地发病率为50%～60%,高者90%～100%,病情指数为9～15,发病后一般减产10%～15%,重者造成3～4成的减产。而大棚西葫芦发病率在3%左右,在葫芦科蔬菜中以西葫芦发病最严重。     

发展无公害农业植保的科研思路探讨

植物保护是我国农业生产过程中的重要保障,其中化学防治更是不可或缺的关键措施,但是化学防治具有两面性,其虽然可以起到较好的防治害虫的目的,但是同时也容易造成土壤污染等弊端,这些负面影响给农业植保带来的危害也是不可忽视的。因此,无公害农业成为了我国乃至世界各国的追求,无公害农业的概念在我国逐渐被推动,它能够有效地降低化学防治给农业植保带来的消极影响,有利于促进我国农业植保工作的顺利发展。就发展无公害农业植保科研思路展开了讨论,供参考。     

保护秦岭子午古道南豆角村落文明实地研究

本研究采取问卷调查和现场走访、查阅史料等方式,通过对秦岭子午古道——南豆角村古村落文明面临消失的问题与实施保护性开发的有利条件进行了分析,提出了解决途径,以期为国内外学者研究中国古村落文明提供理论借鉴。     

微囊藻毒素多克隆抗体的纯化及F(ab′)_2片段的制备

为制备微囊藻毒素(MCYST-LR)多克隆抗体F(ab′)2片段的方法。采用Protein G亲和柱纯化微囊藻毒素多克隆抗体,经木瓜蛋白酶在温和条件下酶切抗体,利用DEAE-52离子交换树脂柱分离抗体酶切片段,获得F(ab′)2片段。SDS-PAGE分析表明,MCYST-LR多克隆抗体得到有效纯化,木瓜蛋白酶酶切后出现明显F(ab′)2片段的对应谱带;利用紫外分光光度计法测得F(ab′)2片段的产率为30.6%。采用木瓜蛋白酶法成功制备了MCYST-LR多克隆抗体的F(ab′)2片段。     

保定市鸡源致病性大肠杆菌的流行病学及药敏试验

从保定市不同鸡场疑似大肠杆菌病的病鸡中,分离到致病性大肠杆菌54株,对此54株大肠杆菌进行血清型鉴定,除了6株未能定型外,其余分离株的O血清型共有8个,分别为O1、O2、O5、O18、O78、O26、O76和O88,其中O78、O26、O1为主要血清型,分别占鉴定菌株的39.6%、27.1%和16.7%。用20种临床常用的抗菌药物对分离菌株进行药物敏感性试验,结果表明,分离菌株呈现出不同程度的耐药性,其中氨苄青霉素和四环素的耐药率最高,其次为阿莫西林。大多数为多重联合耐药;而阿米卡星、头孢噻呋和头孢噻吩的敏感率较高,其中以头孢噻呋(94.5%)最敏感。     

不同水分环境下小麦粒重QTL定位及遗传分析

为探讨小麦千粒重(TGW)分子数量性状遗传,及QTL与水分环境互作关系,本文以抗旱性强的冬小麦品种陇鉴19与水地高产品种Q9086杂交创建的重组近交系(recombinant inbred lines,RIL)群体120个株系为供试材料,采用条件复合区间作图法对3个环境不同水分条件下TGW进行QTL定位和遗传分析。结果表明,小麦RIL群体TGW对水分环境反应敏感,群体中各株系呈现广泛变异和超亲分离,属于微效多基因控制的复杂数量性状,易受水分环境影响。共检测到19个和38对控制TGW的加性QTL(A-QTL)和上位性QTL(AA-QTL),分布在除1A、3B、4D和6A以外的其他17条染色体上。这些A-QTL和AA-QTL表达通过正向或负向调控影响TGW表型变异,贡献率分别在1.24%~10.94%和0.38%~2.89%。发现了3个多环境均能稳定表达的A-QTL(Qtgw.acs-1B.1,Qtgw.acs-2A.1和Qtgw.acs-4A.1),以及4个A-QTL热点区域 [Xmag2064-Xbarc181(1B),Xwmc522-Xgwn122(2A),Xwmc446-Xgwm610(4A)和Xwmc603-Xbarc195(7A)]。所检测到的A-QTL和AA-QTL与干旱胁迫环境互作普遍负向调控TGW表型。加性效应和加性与环境的互作效应是决定小麦TGW的主要遗传因子。在干旱胁迫条件下,这种遗传主效应均不同程度降低TGW表型。本研究结果可为小麦抗旱遗传改良和分子标记辅助选择育种奠定理论基础。     

Bt Cry1类毒素共性结构域的分析、表达及鉴定

【目的】分析定位Bt Cry1类毒素Cry1Ab、Cry1Ac、Cry1B、Cry1C、Cry1F的共性结构域,克隆并表达共性结构域蛋白,为筛选Bt毒素广谱抗体及建立广谱检测方法打下基础。【方法】利用生物信息学和分子模拟技术,通过SWISS-MODEL同源建模分别对5种Cry1类毒素进行三维建模,并结合Ramachandran plot、ERRAT和Verify3D方法评价模型构象的合理性。通过分析比对5种Cry1类毒素的三维结构,确定DomainⅠ区域作为5种Cry1毒素的共性结构域。以含Cry1Ac基因的苏云金芽孢杆菌库斯塔克亚种为模板设计引物,PCR扩增获得共性结构域DomainⅠ基因,将其经NcoⅠ和NotⅠ双酶切连接至原核表达载体pET-26b(+),构建原核表达载体pET-26b-DomainⅠ。重组质粒经菌液PCR、双酶切以及测序鉴定验证正确后,转化至E.coli BL21(DE3),经终浓度为1 mmol·L~(-1)的IPTG在20℃下诱导表达16h后检测共性结构域蛋白的表达情况。离心收集诱导表达的大肠杆菌菌液,进行超声波破碎处理,收集上清及沉淀,采用SDS-PAGE分析融合蛋白的表达。利用His-Trap HP镍亲和柱纯化上清中的可溶性融合蛋白,经SDS-PAGE电泳、Western blot和ELISA试验验证纯化的共性结构域蛋白的生物活性。【结果】基于氨基酸序列及三维空间比对分析,发现5种Cry1类毒素的DomainⅠ的序列一致性最高,而且它们的DomainⅠ三维结构几乎完全重合,确定DomainⅠ区域作为5种Cry1毒素的共性结构域,通过PCR、双酶切及测序鉴定成功构建原核表达载体pET-26b-DomainⅠ,经IPTG诱导表达、His-Trap HP镍亲和柱纯化获得了可溶性的DomainⅠ共性结构域蛋白,SDS-PAGE和Western blot证实表达的共性结构域蛋白的分子量约为33.4 kD,且能与抗His标签鼠单克隆抗体发生特异性反应,ELISA试验证实共性结构域蛋白与5种Cry1类毒素特异性抗体均具有很强的结合能力,抗原表位分析结果显示共性结构域蛋白具有和完整的Cry蛋白存在多个潜在抗原表位位点的特征,抗原表位区域所占的比例分别为48.4%和63.6%,表明共性结构域蛋白具有良好的免疫原性和免疫反应性。【结论】基于分子模拟与分子克隆技术,成功定位及表达纯化获得共性结构域蛋白,为下一步利用共性结构域为靶标分子制备广谱特异性识别Cry1类毒素抗体打下基础。     

Bt(Cry1F)毒素多克隆抗体制备及其检测应用

通过免疫新西兰大白兔,制备并纯化Bt(Cry1F)毒素多克隆抗体,建立针对Cry1F毒素检测的免疫学分析方法,用于室内分析毒素在农产品和土壤中的残留情况。采用皮下注射法,经4次级联免疫,获得免疫血清效价为1:2 500 000,经柱纯化后,测得抗体浓度为4.70 mg/m L;并以其建立的针对Cry1F毒素的间接非竞争时间分辨荧光免疫分析方法(TRFIA),测得线性检测范围在0.04~2 000 ng/m L,最低检测灵敏度为0.03 ng/m L,对5种供试毒素类似物(Cry1Ab、Cry1Ac、Cry1B、Cry1C、Cry2A)均具一定交叉识别能力。分别以稻米和黄土为基质,进行添加回收试验,测得批内、批间的稳定性和重复性均达到室内仪器检测要求。