烤烟生长发育过程中叶片转化酶活性变化初探

研究表明，烤烟叶片中转化酶活性与叶片生长发育密切相关，叶片从发生到发育20d酶活性最强。其作用最适温度为45℃，最适pH值5．6。同一烟株由下向上不同叶位酶活性呈增大趋势，同一叶片不同叶脉间以主脉两侧第5－8条支脉间酶活性较强，且靠近主脉部位酶活性高于近叶缘部位。     

不同有机质土壤饼肥用量对烤烟产量和质量的影响

通过在华宁县不同有机质含量土壤上饼肥用量试验，结果表明：土壤有机质含量在2%以下的植烟土壤，通过增施有机饼肥，能明显的提高上等烟的比例，改善烟叶的品质。土壤有机质含量在2%以上，增施饼肥对上等烟的比例没有明显影响。试验结果还表明：在目前大量施用化肥的条件下，有机肥能改良土壤的物理性能，创造良好的团粒结构，增加土壤微生物的活力；土壤有机质含量在2%以下的植烟土壤施有机饼肥300~450kg/hm2能提高烟叶的产值和上等烟的比例。在有机质含量大于4%的土壤上以不施或者饼肥为宜。     

氮素用量及有机无机肥料配比对烤烟产质量的影响

通过田间小区试验,初步研究了土壤不同氮素用量及有机无机肥料配比对烤烟产质量的影响,试验结果表明:每株烟施纯氮7g、油枯28g,烟叶产量适中、上等烟比例高、效益最好。     

拟南芥GA20氧化酶家族的生物信息学分析

采用生物信息学的方法对拟南芥中多个GA20氧化酶(GA20ox)氨基酸序列的理化性质、亚细胞定位、进化关系、基序和磷酸化修饰位点进行了预测和分析.结果表明,拟南芥中的GA20ox可被划分为2个亚类,1个亚类被预测定位于细胞质,另1个亚类被预测定位于叶绿体.     

烟草硝酸还原酶的生物信息学分析

为深入研究烟草中硝酸还原酶(nitrate reductase,NR)的功能,采用生物信息学方法,对烟草、拟南芥和水稻中的NR氨基酸序列进行了预测和分析。通过构建系统进化树,发现烟草与拟南芥NR的遗传距离较近,而与水稻中NR的遗传距离较远;蛋白质二级结构分析表明,烟草、拟南芥和水稻NR序列的C末端较为相似,而N末端差别较大;所有NR序列中都预测到5个结构域,且磷酸化位点主要位于N末端。但烟草中NR预测到的磷酸化位点少于拟南芥中预测到的,说明拟南芥中NR的活性受到更复杂的调控。     

打顶烟草根尖组织抑制性消减cDNA文库的构建及其序列分析

[目的]构建烟草打顶后根尖组织的消减文库,寻找调控烟碱生物合成的相关候选基因.[方法]以打顶株为测验子(tester)、以非打顶株为驱赶子(driver),利用抑制性消减杂交(suppression subtractivehybridization,SSH)和反向Northern杂交技术构建和筛选烟草打顶前后根尖组织消减文库,并对差异表达克隆进行生物信息学分析.[结果]构建了具有高消减效率的cDNA文库.PCR验证消减文库阳性克隆的插入片段为200-1 000 bp.经反向Northern杂交,从850个克隆中筛选到560个杂交信号差异明显的克隆,测序后得到273条有效序列.对273个已知功能基因的ESTs进行分类,生物碱合成类占4%、植物激素代谢类占3%、信号转导和转录因子类占18%、胁迫和防御类占32%、蛋白质代谢占9%,碳代谢占6%、其它代谢占15%,功能未知类占13%.RT-PCR结果显示,NTAT84和NTAT71序列在烟株打顶后转录活性均升高.[结论]应用SSH技术构建了烟草打顶前后根尖组织消减cDNA文库.     

玉米杂种优势与过氧化物酶同工酶的关系的研究

本研究以192个玉米单交种及其亲本为材料,对4—5叶期幼苗自上而下的第二片展开叶,用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行过氧化物酶同工酶的分析。其结果为:玉米幼苗第二片全展叶中过氧化物酶同工酶图谱较稳定,重演性良好,尤其是主酶带最为明显;无差异型酶谱的杂种中有89％属于产量低优势杂种;有差别型酶谱的杂种中有85％属于产量高优势杂种。     

烟草转录因子基因NtGRAS-R1的克隆与功能分析

为了分析NtGRAS-R1的生物学功能,在NCBI上BLAST植物的EST数据库拼接获得Nt-GRAS-R1的全长序列;根据该序列设计特异引物,利用PCR方法从烟草根系cDNA 中扩增Nt-GRAS-R1,将其连接到pS1300表达载体上,采用农杆菌介导的花序侵染法转化拟南芥,采用RT-PCR法检测转基因拟南芥植株;获得稳定转基因拟南芥后观察生长性状,并用qPCR方法检测At-CLV3基因的表达情况。结果显示,NtGRAS-R1基因属于HAM亚家族,编码508个氨基酸;观察发现,转基因拟南芥植株根长和根体积明显大于野生型;qPCR结果表明,转基因拟南芥AtCLV3的表达量明显低于野生型拟南芥。初步表明NtGRAS-R1参与根系生长发育调控过程。     

氮、磷、钾对烤烟碳氮代谢关键酶活性及其经济效益的影响

为探讨氮、磷、钾肥对烤烟碳氮代谢关键酶活性及其经济效益影响,采用田间小区试验,测定了缺氮、缺磷、缺钾和氮磷钾正常(CK)处理烤烟不同生育时期碳氮代谢关键酶即硝酸还原酶(NR)、谷氨酰胺合成酶(GS)、蔗糖磷酸合成酶(SPS))、蔗糖合成酶(SS)和转化酶(INV)的活性变化。结果表明:在烟叶的氮代谢过程中,NR活性主要在烟叶生长发育前期起作用,与CK相比,氮、磷、钾素缺乏分别使烟叶NR活性下降35.9%,13.4%,19.5%,但移栽后85 d无差异显著性;在碳代谢过程中,SPS,SS和INV活性主要在烟叶生育中期起作用,缺氮能显著降低碳代谢关键酶活性,而缺磷、钾素则表现不明显,很可能与试验田磷钾含量较高有关。缺氮处理对烟叶的产量、产值影响最大,与CK处理相比,分别降低了19.7%,13.2%,缺磷、钾素处理与CK差异不显著。因此,烤烟为达到优质高产,首先要确保氮肥供应充足,同时要适当控制磷钾肥用量。