新型番鸭呼肠孤病毒σC蛋白的原核表达及其抗原特性

新型番鸭呼肠孤病毒是近年来新发现的一种引起鸭严重疾病的病原,该病毒与经典MDRV主要在病毒宿主范围、体外培养特性、临床致病性和免疫保护特性上存在显著的差异。通过RT\|PCR扩增新型呼肠孤病毒σC基因,经NcoⅠ和XhoⅠ双酶切处理,插入到pET\|28a（+）原核表达载体,获得重组质粒pET\|28a（+）\|σC。将重组阳性质粒转化至BL21（DE3）感受态细胞,诱导表达后经SDS\|PAGE电泳对σC蛋白进行初步分析,蛋白分子量约为36 kDa。重组蛋白经纯化后免疫实验兔,获得抗σC蛋白的高效免疫血清。通过Western Blot与间接免疫荧光实验初步表明,新型鸭呼肠孤病毒σC蛋白具有良好的反应活性。     

表达小鹅瘟病毒VP2蛋白重组鸭瘟病毒的构建及其生物学特性

【目的】鸭瘟和小鹅瘟是番鸭和鹅的两种重要传染病,鸭瘟最主要的防治措施是定期接种鸭瘟病毒减毒活疫苗。根据2012年国际病毒分类委员会（ICTV）的报告,DEV被归为疱疹病毒科的α疱疹病毒亚科马立克氏病毒属。疱疹病毒如伪狂犬病毒、马立克氏病毒、火鸡疱疹病毒等已广泛用于病毒活载体的研究,而近几年也有关于鸭瘟病毒（DEV）作为疫苗活载体的报道。为了为免疫防控鸭瘟和小鹅瘟提供新手段,本研究拟在鸭瘟病毒疫苗株感染性克隆的基础上,构建表达小鹅瘟病毒（GPV）主要免疫原蛋白VP2的重组病毒rDEV-VP2,并研究其生物学特性,进而探讨重组病毒rDEV-VP2作为防治DEV和GPV的二联重组活载体疫苗的可能性。【方法】将密码子优化的GPV VP2基因通过常规基因克隆的方法插入转移载体pEP-BGH-end,构建含有GPV VP2表达框pCMV-VP2-BGH-pA的重组表达质粒。在鸭瘟病毒（DEV）疫苗株细菌人工染色体克隆pDEV-EF1的基础上,通过“Red E/T”两步重组法将GPV VP2基因表达框插入到DEV US7和US8基因之间构建了突变体克隆pDEV-VP2。利用磷酸钙法转染鸡胚成纤维细胞（CEFs）拯救获得重组病毒rDEV-VP2和删除Bac质粒序列的rDEV-VP2-Cre,并对重组病毒细胞体外生长曲线、蚀斑大小和VP2蛋白表达情况进行测定。将rDEV-VP2接种番鸭,在不同时间采集血清,采用间接ELISA法检测血清中GPV VP2抗体产生情况。【结果】间接免疫荧光检测和Western blotting分析表明,外源蛋白VP2在CEFs细胞成功表达。病毒生长曲线和蚀斑大小测定结果显示,rDEV-VP2在CEFs细胞上的增殖滴度与亲本株相比无显著差异,表明外源基因VP2的插入不影响rDEV重组病毒的增殖。动物试验结果表明,7日龄雏番鸭接种rDEV-VP2可以诱导产生针对GPV VP2的抗体,免疫后3周抗体阳性率为50%（4/8）。【结论】本实验将小鹅瘟病毒的主要免疫原基因VP2插入到DEV疫苗株基因组的US7和US8基因间构建了表达该免疫原性基因的重组鸭瘟病毒细菌人工染色体,继而在鸡胚成纤维细胞（CEFs）上拯救获得了重组病毒rDEV-VP2,病毒细胞生长特性与亲本株基本一致,且能诱导鸭体产生GPV VP2特异性的抗体。该研究为研制DEV-GPV二联重组活载体疫苗奠定了基础。     

连作障碍对干旱地区不同马铃薯品种的影响

通过田间试验研究了连作障碍对干旱地区8个马铃薯品种的影响.结果表明:连作总体上抑制了8个品种马铃薯的株高、茎粗、商品率、单株产量和总产量,但抑制程度因马铃薯品种不同而异,其中‘青薯2号’的平均总产量和平均单株产量最高,分别为518.07kg和5.11kg;‘大西洋’的平均商品率最高为75.01%;‘费乌瑞它’的平均总产量最低为276.74kg;‘陇薯3号’的平均单产最低为3.56kg;‘青薯9号’商品率最低为62.69%.综合评价8个马铃薯品种,‘青薯2号’抗(耐)连作障碍能力相对最强,‘费乌瑞它’最弱.     

马铃薯悬浮细胞对温度胁迫的生理响应机制

选择马铃薯品种大西洋和甘农薯5号的悬浮细胞为研究对象,通过分析其在5 ℃、20 ℃及40 ℃环境下的细胞相对生长量、质膜离子渗漏率、细胞活力值、渗透调节物质质量分数、光合系统ⅡFv/Fm来阐明马铃薯在温度胁迫下的生理适应机制。结果表明,不同马铃薯品种对温度胁迫的适应性不同,环境温度为5 ℃时马铃薯悬浮细胞的生长状态最好。     

“最镁”在十字花科蔬菜上的应用效果

试验研究了碱性镁肥——"最镁"对酸性土壤p H、阳离子交换量、硅铝率及十字花科蔬菜产量和外观品质的影响。结果表明,在常规施肥的基础上增施"最镁"可以提高肥料利用率,增加十字花科蔬菜产量,提升其外观品质和商品价值,整齐度提高,抗病力增强,生育期缩短、可提前上市,增加土壤p H、阳离子交换量和硅铝率,有效改良酸性土壤。与对照相比,每公顷施用150 kg"最镁",十字花科蔬菜产量增加8.14%~29.24%,土壤p H增加0.14~0.30,土壤阳离子交换量增加0.5~0.8 cmol/kg,土壤硅铝率增加4.35%~9.68%,生育期提前5~10 d,综合病株率降低17%。     

引进马铃薯种质资源块茎及全粉色泽品质性状的评价研究

【目的】对引进的具有优良田间农艺性状的马铃薯种质材料进行块茎及全粉色泽品质分析,探究贮藏环境对马铃薯块茎内成分及全粉色泽品质的影响,丰富全粉加工型马铃薯种质资源.【方法】将引进的11个马铃薯种质材料分别贮藏在4、25℃条件下0、60、120 d后进行块茎及全粉色泽品质分析,测定材料块茎内淀粉、可溶性糖、还原糖的含量,分析在不同贮藏条件下块茎和全粉的色泽变化特性,分析块茎内淀粉、可溶性糖、还原糖的含量与块茎和全粉色泽的相关性.【结果】试验材料在25℃贮藏120 d时块茎和全粉的色泽变化最大.短时期内60 d、4℃低温贮藏环境对马铃薯鲜薯块茎和全粉色泽影响的程度显著大于25℃贮藏环境,而在长时间120 d、4℃低温贮藏环境对马铃薯鲜薯块茎和全粉色泽的变化具有抑制效应.在贮藏过程中,马铃薯块茎色泽的变化与块茎内可溶性糖和还原糖含量显著相关,块茎内可溶性糖含量越高,其全粉的光泽度越暗.【结论】马铃薯块茎内可溶性糖含量与其全粉色泽显著相关,是判定全粉加工型品种的重要指标.引进材料中CIP301040.63和CIP397067.2是适合全粉加工的潜在品种及优良亲本材料,可有效补充我国马铃薯种质资源,有利于全粉加工型马铃薯品种的选育.     

行业特色高校应积极创建服务国家战略需求的新模式

适应建设高等教育强国、创新型国家等国家重大战略需求,行业特色高校应坚持"用特色和优势服务国家战略需求,在服务国家战略需求中发展特色和优势"的思路,探索"领军人才-创新团队-优势学科-富民产业"有效聚合、互促共进,服务国家战略需求的新模式.     

木薯秸秆化学成分与应用分析

为合理开发利用木薯秸秆,扩大造纸及纤维板生产原料来源,就其化学成分及应用进行研究,结果表明:4年生木薯秸秆的纤维素含量(44.70%~49.74%)和木质素含量(27.06%~27.45%)与9年尾叶桉、18年火炬松相当,热水抽提物含量(9.58%~17.90%)是这两种木材的2~4倍;1年生木薯秸秆的纤维素含量(34.37%)低于棉秸秆、烟秸秆和豆秸秆,木质素含量(36.25%)和热水抽提物含量(24.94%)高于这些农作物秸秆;采用木薯秸秆制浆时应注意溶出物对生产的影响;1年生木薯秸秆木质部粗蛋白5.46%、钙0.33%、粗脂肪0.11%,髓心粗蛋白1.49%、钙1.09%、粗脂肪0.32%;木薯秸秆收集和贮存时应重视防腐和防虫。     

山药病虫害防治

山药是薯蓣科薯蓣属中能形成地下肉质块茎的栽培种,一年生或多年生缠绕性藤本植物,药食兼用,营养丰富,既是高档蔬菜,又可作为药用保健品,营养和经济价值很高,是我县南部山区农民致富的主要经济作物之一。实践证明,发展山药生产是促进山区农业结构调整,     

创新教育质量观,不断提高高等农业教育教学质量

教育质量是高等教育界永恒的主题。文章从探讨高等农业教育质量的发展与创新入手,分析了高等农业教育质量提高过程中面临的主要困难和问题,结合华中农业大学的实际,对学校创新高等教育质量观、提高教育教学质量方面的探索与实践进行了阐述。