不同温度对牛精子相关抗原11D基因的影响

为探讨高温对精子膜蛋白牛精子相关抗原11D （sperm associated antigen 11,SPAG11D）表达水平的影响,试验采用了实时荧光定量PCR和Western boltting方法检测了牛睾丸原代细胞和娟姗牛、槟榔江牛、西门塔尔牛的正常精子及低活力精子中SPAG11D的表达。结果显示,牛睾丸原代细胞在不同温度（32、34、36、38和40℃）下培养24 h,SPAG11D的mRNA及蛋白在36℃时表达水平最高,且高温时表达水平比低温时要高;培养48 h时,SPAG11D的mRNA表达基本和24 h相一致,但蛋白表达水平在高温时明显下降。此外,槟榔江牛和娟姗牛低活力精子中SPAG11D的蛋白表达量比正常精子明显降低,而在西门塔尔牛的精液中变化不明显。     

中国南方荷斯坦牛HP基因多态性与产奶性状及血液生理生化指标的关联分析

试验旨在研究中国南方荷斯坦牛触珠蛋白(Haptoglobin,HP)基因的多态性及其对产奶性状、血液生理生化指标的影响。利用直接测序法及SNaPshot技术检测HP基因编码区(Coding sequence, CDS)的单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism, SNP)位点,并对这些多态性位点不同基因型和组合与785头中国南方荷斯坦牛的产奶性状及血液生理生化指标进行关联分析。结果显示,HP基因的CDS区域存在3个SNPs位点,即rs41871650、rs209034260和rs41871651,这3个位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态。在试验群体中,rs41871650位点对305 d奶量、总奶量和高峰奶性状的效应达到显著水平(P<0.05);rs209034260位点对总奶量和高峰奶性状的效应达到显著水平(P<0.05)。rs41871650位点对天门冬氨酸转氨酶(AST)影响极显著(P<0.01),对淋巴细胞百分比(LYMPH%)、白蛋白(ALB)、丙氨酸转氨酶(ALT)及碱性磷酸酶(ALP)影响显著(P<0...     

干扰素-τ调控牛母体妊娠识别分子机制的研究进展

摘.要:奶业是农业现代化的标志性产业,在国民经济中占据重要地位.奶牛养殖是奶业发展的基础.然而,奶牛繁殖率低一直是影响奶业发展和困扰养殖户的重要问题.妊娠早期胚胎损失是导致奶牛繁殖率低的原因之一,而母体妊娠识别期是决定妊娠能否成功建立的关键环节.对妊娠识别分子机制的研究将有助于了解妊娠建立的复杂过程,可为探索减少奶牛早...     

微生态制剂与酶制剂联合使用对断奶仔猪生长性能、血液指标和肠黏膜防御屏障相关蛋白表达的影响

试验旨在研究微生态制剂与酶制剂联合使用对断奶仔猪生长性能、血液指标和肠黏膜防御屏障功能的影响。选取180头体重相近、健康状况良好的24 d断奶的"长×大"仔猪,随机分为两组,每组3个重复,每个重复30头猪。对照组饲喂基础日粮,试验组饲喂在基础日粮中添加100 g/t酶制剂+微生态制剂的试验日粮,试验期25 d。结果显示:①与对照组相比,断奶仔猪日粮中添加酶制剂和微生态制剂有提高其平均日增重和平均日采食量,降低料重比的趋势(P0.05);②试验组猪只血清中谷草转氨酶和谷丙转氨酶活性均显著低于对照组(P0.05),IL-2和TNF-α的含量均显著高于对照组(P0.05),血液抗氧化能力与对照组相比无显著差异(P0.05);③试验组猪只空肠黏膜sIgA的含量显著高于对照组(P0.05);④紧密连接蛋白ZO-1(P0.05)和Occludin(P0.01)在试验组猪只空肠黏膜中的表达量显著高于对照组。综上表明,断奶仔猪日粮中添加100 g/t酶制剂+微生态制剂具有一定改善其生长性能、促进肝脏健康和增强肠黏膜防御屏障功能的作用。     

谷胱甘肽、咖啡因、染料木黄酮及其组合对牛冷冻精液精子运动性和体外受精的影响

为了探究还原型谷胱甘肽(GSH)、咖啡因(caffeine)和染料木黄酮(genistein)及其组合对牛冷冻精液解冻后精子运动能力和体外受精后早期胚胎发育的影响,将精液解冻后用分别添加不同组合GSH、caffeine和genistein的Sp-TALP和Fert-TALP培养基处理,2h后用计算机精子辅助分析(CASA)系统分析精子运动参数;并在受精滴中分别添加不同组合的GSH、caffeine和genistein,统计卵裂率、桑椹胚发育率和囊胚发育率。结果表明:(1)SpTALP培养基中添加5mM GSH+5mM caffeine,精子活率(TM)、平均曲线速度(VCL)以及平均鞭打频率(BCF)均显著高于10μM genistein+5 mM caffeine(P0.05)。(2)FertTALP培养基中添加5 mM GSH+5 mM caffeine和10μM genistein,直线运动精子活率(PM)均显著高于对照组(P0.05);同时5mM GSH+5mM caffeine也显著提高了精子运动参数VCL、BCF以及平均移动角度(MAD)(P0.05)。(3)在Fert-TALP培养基中添加5mM GSH+5mM caffeine,与Sp-TALP培养基相比,精子的VCL显著增加(P0.05),直线性(LIN)、摆动性(WOB)以及非前向运动(C级)精子百分率均显著降低(P0.05)。(4)受精滴中添加5mM GSH+5mM caffeine以及10μM genistein,卵裂率和桑椹胚发育率与对照组相比有较大幅度的提高,但差异不显著(P0.05)。10μM genistein处理组的囊胚发育率最高,但与对照组差异不显著(P0.05)。因此,10μM genistein或5mM caffeine+5mM GSH处理冻精,可以改善牛冷冻精子运动性和生存能力,并轻微促进体外胚胎的发育。     

山羊多羔性状候选基因的研究进展

多羔性状是肉用山羊的重要经济性状之一,针对该性状的品种改良及选育一直都是产业关注的重点。随着以基因组测序为代表的分子生物学技术的不断发展,分子辅助标记及基因编辑等分子育种技术为地方山羊品种改良及多羔山羊新品种培育提供了效率高、成本低、耗时短的新路径。基于此,多羔性状候选基因的筛选及鉴定工作已成为山羊遗传改良领域的研究热点,并且取得了重要进展。文章对卵泡刺激素受体(follicle stimulating hormone receptor, FSHR)基因、促性腺激素释放激素受体(gonadotropin releasing hormone receptor, GnRHR)基因、促黄体生成素β(luteinizing hormone β, LHβ)基因、骨形态发生蛋白15(bone morphogenetic protein 15, BMP15)基因、骨形态发生蛋白受体1B(bone morphogenetic protein receptor 1B BMPR-1B)基因、生长分化因子9(growth differentiation factor 9, GDF9)基因、吻素(kisspe...     

siRNA抑制牛子宫内膜上皮细胞Nrf2基因的表达研究

为探讨核因子E2相关因子（nuclear factor E2 related factor，Nrf2）基因沉默及激活后对牛子宫内膜上皮细胞的影响，本试验利用小分子干扰（siRNA）技术及Nrf2的激动剂叔丁基对苯二酚（tBHQ），分别从Nrf2基因的下调和上调表达来研究Nrf2对牛子宫内膜上皮细胞中血红素加氧酶-1（HO-1）和Homebox A10（HOXA10）基因表达的影响。结果显示，经实时荧光定量PCR方法检测，在设计的2条siRNA序列（siRNA-1209和siRNA-1672）中，siRNA-1672在终浓度为75 nmol/L、作用时间24 h时抑制效果较好，抑制效率在80%以上；经Western blotting方法检测，Nrf2蛋白表达水平在转染后96 h极显著下降（P<0.01），而HO-1和HOXA10的mRNA表达量分别下降了60%和70%（P<0.01），蛋白表达量在96 h后极显著或显著下降（P<0.01；P<0.05）。此外，经CCK8方法检测，Nrf2基因表达沉默后，牛子宫内膜上皮细胞增殖能力减弱。而在tBHQ激活Nrf2试验中，经Western blotting方法检测，tBHQ终浓度为30 μmol/L时Nrf2蛋白表达量最高，极显著高于对照组（P<0.01），且HO-1和HOXA10的蛋白表达量与对照组相比也明显上升。结果表明，本试验设计的siRNA-1672能特异性地抑制牛子宫内膜上皮细胞Nrf2的表达，而抑制Nrf2的表达会导致牛子宫内膜上皮细胞增殖能力下降，且Nrf2对牛子宫内膜上皮细胞HO-1和HOXA10基因表达存在调控作用。     

妊娠失败水牛血常规分析

[目的]通过分析空怀水牛血常规数据,从血液生理变化层面探讨水牛人工授精后早期妊娠失败的原因。[方法]采集14头摩拉水牛人工授精后0d、18d、20d、23d和28d血液样本,利用全自动血液细胞分析仪进行血常规检测。于人工授精后的42d进行直肠检查和B超诊断,对确诊为空怀的摩拉水牛血液参数进行统计分析。[结果]人工授精后0d和18d白细胞(WBC)参数均在正常值范围或接近正常值。20d、23d和28d白细胞数显著高于0d(P0.05),并且超出正常值范围;其中,18d和20d嗜中性粒细胞绝对值(NEU)及其比例显著低于0d(P0.05),18d~28d淋巴细胞绝对值(LYM)及其比例均高于0d。与0d相比,18d及之后,红细胞数(RBC)和红细胞压积(HCT)均极显著下降(P0.01),但红细胞平均体积(MCV)和红细胞分布宽度变异数(RDW)均极显著上升(P0.01)。[结论]妊娠失败摩拉水牛中淋巴细胞及其比例上升是导致外周血白细胞数显著上升的主要原因;妊娠失败一方面与胚胎发育早期母体较弱的免疫耐受/妊娠识别能力有关,另一方面,人工授精后牛群的贫血体况也提示有必要进一步加强对与配母牛的繁殖管理。     

siRNA抑制牛睾丸细胞Nrf2基因表达的研究

为了探讨Nrf2基因被干扰后对牛睾丸细胞的影响,试验采用了实时荧光定量PCR和Western boltting方法检测了牛睾丸细胞中HO-1和NQO1基因的表达.结果显示,设计的siRNA-1672在终浓度为50nmol/L时抑制效果较好,Nrf2基因表达显著下降,HO-1和NQO1基因在mRNA水平上表达显著下降.N...