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试验旨在构建鸡Prnp基因原核表达载体,并在大肠埃希菌中进行表达,为制备鸡朊蛋白单克隆抗体提供材料。根据GenBank已报道的鸡Prnp基因组序列和pET-28a质粒多克隆位点设计引物,以健康的鸡全血基因组DNA为材料,采用PCR的方法扩增鸡的Prnp基因,将目的基因片段与pET-28a载体连接,构建重组原核表达载体。重组菌转化到E. coli BL21(DE3)感受态细胞中,并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactoside,IPTG)进行诱导表达,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定表达的重组蛋白。结果表明,重组蛋白在诱导剂的终浓度为0.08 mmol·L-1,16 ℃,220 r·min-1诱导7 h,蛋白表达量最高。综上所述,本研究成功构建了pET-28a-ChPrnp重组表达菌株,为Prnp朊蛋白的结构、生理功能和致病机制研究提供方法。 相似文献
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【目的】作为重要的自然环境与社会发展要素,农业水资源是人类进行农业生产活动的重要基础,对于保障粮食安全具有重要作用。文章对农业水资源监测领域研究态势进行定量分析,为未来研究提供参考依据。【方法】基于文献计量学方法,利用Web of Science核心数据库检索,应用VOSviewer、CiteSpace和Derwent Data Analyzer等软件构建文献数据的关系和可视化,分析1999—2018年农业水资源监测领域发文量趋势、主要研究力量和研究热点。【结果】(1)全球发文量呈上升趋势,2008年后发展速度明显提升,中国的发文量趋势与全球发展基本保持一致,整体处于上升趋势。(2)欧盟、美国、中国、澳大利亚和加拿大为全球在农业水资源监测技术领域的主要研究国家/地区,中国的发文量持续攀升但篇均被引较低。在前5名科研机构中,中国科学院发文量最高,美国地质调查局的篇均被引位居第1。(3)在研究热点方面,水质(water quality)是农业水资源持续监测的热点,近10年,气候变化(climate-change)成为关注的热点。【结论】目前,美国和欧盟在该领域具有较高发展水平,中国虽然在发文量上具有较快发展,但研究的竞争力有待提高。未来的农业水资源监测需从系统性和整体性等多角度开展研究,综合集成多源数据、多技术研发、大数据平台,实现农业水资源的可持续发展。 相似文献
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沪旱5A属感温型节水抗旱稻三系不育系,具有抗性好,配合力强,易于制繁种,适应性强等特性。根据沪旱5A亲本的生长特征、开花习性以及上海的气象特点,结合多年的亲本繁殖实践经验,总结了沪旱5A的高产繁殖技术。 相似文献
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目的:分析广东省茂名市麻风病的流行情况,评价近5年的麻风病防治效果。方法:对茂名市2000-2004年麻风病疫情进行回顾性分析。结果:2000-2004年共新发现麻风患者43例,至2004年有现症患者23例,患病率为0.34/10万。5a间平均患病率为0.46/10万,平均发现率为0.14/10万。结论:茂名市麻风病的各项指标均已达到基本消灭麻风病的标准,流行范围缩小,强度减弱,流行已得到有效控制。 相似文献
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随着生猪产业的发展、地方猪种遗传资源保护意识的日益提高以及疫情防控的需要,猪冷冻精液制作越来越受到重视,并成了现代生猪育种和生产的重要手段.本文从种公猪饲养管理、采精准备、操作及鲜精处理、冻精制作等方面,介绍了猪冷冻精液制作的全过程. 相似文献
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