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为构建有效的沟叶结缕草遗传转化体系,以沟叶结缕草愈伤组织为受体材料,通过农杆菌介导法将笔者单位克隆的耐盐相关基因ZmPDI基因转入野生型植株中,研究共培养时间、侵染液浓度、侵染时间和抗生素浓度等因子对转化效率的影响。结果表明:最佳遗传转化体系为菌株OD600值为0.4,侵染30 min,共培养3 d后进行选择培养。特美汀在选择培养阶段最适抑菌浓度为250 mg/L,潮霉素愈伤组织筛选的最适选择压力为40 mg/L,苗筛的最适浓度为15 mg/L。通过GUS活性的组织化学分析和PCR鉴定,显示目的基因已成功转入沟叶结缕草基因组中。 相似文献
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原生质体非对称电融合获得不结球白菜胞质杂种 总被引:19,自引:1,他引:19
以不结球白菜OguCMS‘91H 秋-100’ ( 不育系) 和‘91H 秋-1’( 保持系) 为试材, 研究了不同交流场强、交流频率、直流脉冲场强、直流幅宽及脉冲次数对非对称细胞融合效果的影响。结果表明, 不结球白菜电融合的最适电场条件为交流场强20 V/ cm、交流频率1500 kHz、直流场强200 V/ cm、直流脉冲幅宽40 1048577;s、直流脉冲次数3 次。融合产物用KM8P1培养基进行包埋培养, 获得了383 块小愈伤组织, 其中32 块分化出芽, 形成20 株完整植株,驯化后栽培成活8 株, ZS2、ZS6、ZS8 等3 株不育, 后用保持系花粉授粉, 分别收获种子。对胞质杂种的分子、细胞及生化分析将在其后代中继续进行。 相似文献
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海雀稗体细胞低温筛选获得耐寒突变体 总被引:4,自引:1,他引:3
旨在细胞水平上建立海雀稗(Paspalum vaginatum Sw.)低温胁迫定向筛选耐寒突变体技术,为开展海雀稗耐寒品种选育提供新途经。于2008年1月以海雀稗Adalay品种(P.vaginatum cv.Adalay)的幼穗诱导产生的颗粒状愈伤组织为材料,分别在6℃和0℃低温条件下进行培养和筛选。试验结果:在6℃和0℃下,培养30 d,愈伤组织的绿苗分化率均在80%以上,比对照处理(培养温度26℃)绿苗分化率略有下降;培养45 d,绿苗分化率分别为60%和50%;培养60 d,绿苗分化率分别降至33%和23%。在0℃下培养75 d,愈伤组织完全丧失分化植株的能力;0℃培养0、30、45和60 d的再生植株叶片的半致死温度分别为:-5.69℃、-6.07℃、-6.35℃和-6.63℃。SRAP分子标记测定结果显示,特异性SRAP标记与海雀稗体细胞突变体的耐寒性相关。海雀稗颗粒状愈伤组织在0℃下培养和筛选45 d和60 d获得了耐寒突变体植株。 相似文献
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35杨微繁殖与叶片不定芽再生研究 总被引:2,自引:0,他引:2
以35杨茎段外植体为供试材料,对腋芽微繁殖、叶片不定芽再生、生根以及移植的离体培养技术体系进行了研究,结果表明:获得初始无菌苗的取材以4月取田间杨树新枝茎段外植体为最好;茎段外植体的启动培养基以附加NAA0.1mCL、0.5mg/L6-BA及GA,0.5mg/L的WPM培养基为优;腋芽微繁殖最快的培养基为WPM+0.2mg/L6-BA+0.1mg/LIAA+0.1mg/LIBA;生根培养基以3/5WPM+0.1mg/LIBA为好;叶片不定芽再生培养基以WPM+0.2mg/L 6-BA+0.1mg/LIAA+0.1mg/LIBA再生频率最高,达92.86%;叶片不定芽在生根培养基上培养20d后获健壮生根苗,移栽成活率达100%。 相似文献