原生质体非对称电融合获得不结球白菜胞质杂种

 以不结球白菜OguCMS‘91H 秋-100’ ( 不育系) 和‘91H 秋-1’( 保持系) 为试材, 研究了不同交流场强、交流频率、直流脉冲场强、直流幅宽及脉冲次数对非对称细胞融合效果的影响。结果表明, 不结球白菜电融合的最适电场条件为交流场强20 V/ cm、交流频率1500 kHz、直流场强200 V/ cm、直流脉冲幅宽40 􀀁s、直流脉冲次数3 次。融合产物用KM8P1培养基进行包埋培养, 获得了383 块小愈伤组织, 其中32 块分化出芽, 形成20 株完整植株,驯化后栽培成活8 株, ZS2、ZS6、ZS8 等3 株不育, 后用保持系花粉授粉, 分别收获种子。对胞质杂种的分子、细胞及生化分析将在其后代中继续进行。     

12份蕨类材料亲缘关系的SSR分析

利用SSR分子标记技术对12份蕨类材料进行亲缘关系分析。结果表明,从180对引物中筛选出15对多态性高、重复性好的引物,对12份蕨类材料基因组DNA进行扩增,共扩增出117条带,其中多态性带98条,平均每对引物产生6．53条多态性带,多态性比例为83．76％。通过NTSYS—pc2．10e软件计算不同蕨类材料之间的遗传相似系数,并进行聚类分析。遗传分析表明,12份材料间的遗传相似系数为0．351～0．857,且聚类分析表明,遗传相似系数在0．61—0．63可将供试材料分为3个类群。应用SSR分子标记技术能较准确地分析蕨类不同材料之间的亲缘关系及遗传多样性。     

海雀稗体细胞低温筛选获得耐寒突变体

旨在细胞水平上建立海雀稗(Paspalum vaginatum Sw.)低温胁迫定向筛选耐寒突变体技术,为开展海雀稗耐寒品种选育提供新途经。于2008年1月以海雀稗Adalay品种(P.vaginatum cv.Adalay)的幼穗诱导产生的颗粒状愈伤组织为材料,分别在6℃和0℃低温条件下进行培养和筛选。试验结果:在6℃和0℃下,培养30 d,愈伤组织的绿苗分化率均在80%以上,比对照处理(培养温度26℃)绿苗分化率略有下降;培养45 d,绿苗分化率分别为60%和50%;培养60 d,绿苗分化率分别降至33%和23%。在0℃下培养75 d,愈伤组织完全丧失分化植株的能力;0℃培养0、30、45和60 d的再生植株叶片的半致死温度分别为:-5.69℃、-6.07℃、-6.35℃和-6.63℃。SRAP分子标记测定结果显示,特异性SRAP标记与海雀稗体细胞突变体的耐寒性相关。海雀稗颗粒状愈伤组织在0℃下培养和筛选45 d和60 d获得了耐寒突变体植株。     

棉花愈伤组织原生质体分离技术研究

自1974年Beasley等人首次从陆地棉纤维游离得到原生质体以来,已先后从陆地棉和克劳茨基棉下胚轴形成的愈伤组织,陆地棉和海岛棉子叶和真叶分离出原生质体。本     

葡萄茎尖快速繁殖技术

近几年来,葡萄栽培面积迅速扩大,一批鲜食用人粒葡萄品种相继引入我国,用常规繁殖方法已远远跟不上生产发展的需要。六十年代起国内外曾研究用组织培养方法,从葡萄茎尖组织培养得到植株,但由于在培养技术上存在一些问题,使这项技术不能用于生产。我们自1934年起开展茎尖培养技术研究工作,并获得了初步成功。     

35杨微繁殖与叶片不定芽再生研究

以35杨茎段外植体为供试材料,对腋芽微繁殖、叶片不定芽再生、生根以及移植的离体培养技术体系进行了研究,结果表明：获得初始无菌苗的取材以4月取田间杨树新枝茎段外植体为最好;茎段外植体的启动培养基以附加NAA0．1mCL、0．5mg／L6-BA及GA,0．5mg／L的WPM培养基为优;腋芽微繁殖最快的培养基为WPM＋0．2mg／L6-BA＋0．1mg／LIAA＋0．1mg／LIBA;生根培养基以3／5WPM＋0．1mg／LIBA为好;叶片不定芽再生培养基以WPM＋0．2mg／L 6-BA＋0．1mg／LIAA＋0．1mg／LIBA再生频率最高,达92．86％;叶片不定芽在生根培养基上培养20d后获健壮生根苗,移栽成活率达100％。     

沟叶结缕草遗传转化体系的建立

为构建有效的沟叶结缕草遗传转化体系,以沟叶结缕草愈伤组织为受体材料,通过农杆菌介导法将笔者单位克隆的耐盐相关基因ZmPDI基因转入野生型植株中,研究共培养时间、侵染液浓度、侵染时间和抗生素浓度等因子对转化效率的影响。结果表明：最佳遗传转化体系为菌株OD₆₀₀值为0.4,侵染30 min,共培养3 d后进行选择培养。特美汀在选择培养阶段最适抑菌浓度为250 mg/L,潮霉素愈伤组织筛选的最适选择压力为40 mg/L,苗筛的最适浓度为15 mg/L。通过GUS活性的组织化学分析和PCR鉴定,显示目的基因已成功转入沟叶结缕草基因组中。     

影响大白菜离体再生及基因转化的因素研究

以耐热大白菜42 号自交不亲和系的子叶为外植体,研究了几种因素对大白菜植株再生的影响和农杆菌介导法转CpTI基因的条件。含0.1 m g/LNAA, 1.0～2.0 m g/LCPPU, 5.0～10.0 m g/LAgNO3 的MS培养基较适合于大白菜42 号自交不亲和系的子叶离体培养再生植株。测定了在含不同激素组合的培养基上离体培养7 d 后的子叶的内源激素含量,在不定芽诱导培养基上子叶内源IAA、ABA 含量分别比培养在不含激素的培养基上下降42.6% 、10.5% , 比培养在生根培养基上下降52.4% 、19.0% ; iPAs 含量、GA1 3 含量分别比培养在不含激素的培养基上上升510.9% 、143.9% ,比培养在生根培养基上上升860.5% 、558.3% 。头孢霉素抑制子叶再生不定芽,而羧苄青霉素则有促进作用。筛选转化体的适宜卡那霉素浓度为5～10 m g/L。