四种金鱼的遗传多样性研究

利用随机扩增多态DNA(RAPD)技术对红白龙睛蝶尾、狮头、黑龙睛、红白高头珍珠鳞四个品种金鱼进行基因组DNA的遗传多样性分析。在事先优化的条件下,试验从选用的40个随机引物中筛选出8个有效引物。共检测到72个清晰稳定的位点,大小为300bp～2500bp,其中48个位点具有多态性,各品种的多态位点比例分别为38.98%,40.29%,48.61%,30.56%,Shannon信息指数为0.1704～0.2954。遗传距离显示四个品种金鱼有一定遗传分化,其中狮头与红白高头珍珠鳞遗传距离最大(0.2303),红白龙睛蝶尾与黑龙睛遗传距离最小(0.0784)。利用UPGMA进行聚类分析表明,红白龙睛蝶尾和黑龙睛亲缘关系最密切,其次是狮头,最后为红白高头珍珠鳞。引物OPY17扩增获得的350bp片段为红白高头珍珠鳞的特异分子标记,可用于红白高头珍珠鳞的鉴别。     

杂交青虾“太湖1号”肌肉营养成分分析

本试验以池塘养殖太湖青虾为对照,对杂交青虾"太湖1号"营养成分进行了分析。结果显示:杂交青虾"太湖1号"肌肉的水分、粗灰分、粗脂肪、粗蛋白含量与对照组差异不显著(P>0.05)。实验组与对照组氨基酸总量分别为79.5%和80.84%,差异不显著(P>0.05);必需氨基酸指数(EAAI)分别为66.32%和66.94%,构成比例符合联合国粮农组织/世界卫生组织(FAO/WHO)的标准,差异不显著(P>0.05);脂肪酸中EPA和DHA总量分别为0.83%和1.74%,差异不显著(P>0.05);主要微量元素比例合理,与对照组差异不显著(P>0.05)。研究表明,杂交青虾"太湖1号"肌肉主要营养成分与太湖青虾基本一致,两者没有显著差异。     

青虾新品种池塘主养技术

正青虾主养是以青虾为主的养殖模式,主要放养青虾,可搭养少量鲢鳙鱼等调控水质。长江流域青虾主养模式通常一年养殖两季,即春季主养和秋季主养。春季主养是指1月上旬至3月上旬放苗养殖,至6月底捕捞结束的整个过程;秋季主养是指6月底至8月上旬放苗养殖,至年底或次年春节成品虾捕捞上市结束的整个过程。青虾新品种主养过程中,种源、水草、水质、饲料和捕捞是影响商品虾产量和规格的关键     

青虾transformer-2基因RNA干扰规律的研究

通过对青虾性别调控相关基因transformer-2（tra-2）的RNA干扰规律进行研究,探讨了tra-2 基因RNA干扰的最适注射部位、注射剂量、干扰效果以及干扰规律等。通过对青虾肌肉、心脏、围心腔和眼柄基部注射比较发现,围心腔注射死亡率最低,适宜RNA干扰研究。采用4 μg/g 的dsRNA剂量进行时间依赖性干扰试验,RT-PCR检验注射后第1,7,14 天的卵巢tra-2 表达量,结果显示第7 天基因表达量出现显著降低（P<0.05）。不同剂量水平（0.4 μg/g、4 μg/g 以及12 μg/g）干扰研究发现,0.4 μg/g dsRNA没有干扰结果,4 μg/g 和12 μg/g 剂量的干扰效果均显著。与4 μg/g 的剂量相比,12 μg/g 的dsRNA能在较短时间内起到明显的干扰效果,且能持续较长的时间,表明干扰规律会随着剂量的改变而变化。但两组tra-2的最低表达量分别为正常水平的23%和21%,无显著差异（P>0.05）。     

青虾新品种培育与推广

青虾(Macrobrachium nipponense),俗称河虾,全国年养殖产量超过27万吨,是我国重要的淡水养殖虾类。青虾肉质细嫩、味道鲜美、营养丰富,是深受广大消费者喜爱的优质水产品。青虾具有生长快、养殖周期短、上市时间灵活、投资少、见效快、风险小、收益高等优势,青虾养殖已成为我国农业增效、农民增收的重要途径之一;同时青虾养殖过程绿色环保,具有良好的产业发展前景。     

杂种优势预测研究进展

杂种优势预测对于杂种优势的利用具有重要意义,然而传统的杂种优势预测方法由于要花费大量的人力、物力和财力,限制了杂种优势的进一步利用。几十年来,育种工作者从亲缘关系、生态类型、生理生化和数量遗传等不同方面,进行了大量的研究,提出了许多预测杂种优势的方法。通过概述有关杂种优势预测,及数量性状、同工酶、分子标记亲本间遗传距离和杂种优势关系的研究现状．对杂种优势预测的发展方向进行了展望。     

鲍曼不动杆菌CRISPR系统筛查及对靶基因的调控作用

对89株临床分离株采用PCR产物克隆测序和成簇规律间隔短回文重复序列(CRISPR)系统生物信息学分析等方法研究鲍曼不动杆菌CRISPR系统对靶基因的调控作用。结果表明:2株分离株(AB43与ATCC19606)具有CRISPR系统,它们间区靶向的基因有Ⅳ型分泌蛋白Virb5、带状黏附毒素蛋白、噬菌体蛋白、DNA聚合酶等。CRISPR系统抑制Virb5、带状黏附毒素蛋白基因的编码与表达,可能对鲍曼不动杆菌的生物膜形成具有一定调控作用。     

青虾Ran基因的克隆、表达及其在卵巢发育中的功能

本研究应用RACE技术克隆了青虾(Macrobrachium nipponensis)Ran(Ras related nuclear protein,Ras相关核蛋白)基因全长cDNA序列,该基因cDNA全长1191 bp,包括218 bp的5'UTR,648 bp的开放阅读框(ORF),405 bp的3'UTR,编码215个氨基酸。青虾Ran基因属于P-loop-NTPase超级家族,拥有PTZ00132跨结构域,多肽分子量约为24.57 kDa,理论等电点7.13。系统进化树分析表明,在动物界进化中非常保守的青虾Ran多肽与罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)聚为一支,具有最近的亲缘关系。使用荧光定量PCR技术检测Ran基因在成体青虾不同组织和卵巢不同发育期的表达差异,结果显示,Ran基因在青虾不同组织中均有表达,其表达量在卵巢中最高,是精巢表达量的7~8倍;随着卵巢的发育,Ran基因的表达水平呈现上升趋势,在卵巢消退期又恢复到较低水平。RNA干扰后,实验组Ran基因表达量显著低于对照组(P0.05),同时卵巢发育关键基因Vg(vitellogenin)在卵巢中的表达量也显著低于对照组(P0.05),推测Ran基因参与雌性卵巢发育过程并对Vg基因的表达起到调控作用。     

青虾无公害养殖技术（一）

青虾，又名河虾，学名日本沼虾，分类学上隶属于甲壳纲，十足目，游泳亚目，真虾派，长臂虾科，沼虾属。青虾是一种纯淡水虾，其繁殖和生长均在淡水中完成，但在沿海低盐度水域中也能生存。青虾广泛分布于全国各地的自然水域，几乎所有的内陆水域及低盐度的河口地区均有分布。太湖、微山湖、龙感湖、白洋淀、鄱阳湖等出产的野生青虾享有盛名，其中又以太湖青虾最为有名。青虾已成为我国重要的淡水养殖虾类，是农业增效、农民增收的重要途径之一。     

青虾高血糖激素基因全长cDNA序列的克隆及表达分析

本研究首次克隆了青虾(Macrobrachium nipponense)高血糖激素(crustacean hyperglycemic homone,CHH)基因全长cDNA序列,并使用荧光定量PCR技术首次检测了CHH基因在青虾不同组织中的表达。青虾CHH基因cDNA全长1 017 bp,包括241 bp的5′UTR,408 bp的开放阅读框(ORF),355 bp的3′UTR,开放阅读框编码135个氨基酸。成熟肽包含6个CHH家族中位置保守的Cys残基。青虾CHH成熟肽C端为GK,确定为ES型CHH基因。蛋白相似度比对显示,所分离的青虾CHH被归为CHH家族I型肽。系统进化树分析表明,青虾CHH多肽与罗氏沼虾聚在一起,具有最近的亲缘关系。荧光定量PCR检测显示,CHH基因在青虾不同组织中均有表达,其表达量由高到依次为眼柄、精巢、腹神经节、脑、肠、肝、心脏、卵巢。以卵巢为参照其表达量设为1时,眼柄与精巢CHH基因表达量分别为卵巢的500倍和250倍,由此推测CHH基因可能与雄性生殖过程相关。