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为了解石河子地区犬埃立克体的流行状况,本研究从石河子市宠物医院及周边地区采集犬血液和体表寄生蜱,利用间接ELISA对采集的血清样品进行血清学调查,并通过PCR扩增犬埃立克体16S rRNA基因和及系统进化分析进行其分子流行病学调查。血清学检测结果显示,犬埃立克体抗体阳性率为22.40%,表明石河子地区犬中存在埃立克体的感染。从犬体表蜱样本中扩增出埃立克体452 bp特异片段,测序和比对结果证实这些片段为犬埃立克体;遗传进化分析显示,犬源埃立克体石河子流行株,与Fujian、Yonaguni206、Yunnan、Ehrlichia muris(AY587608.2)、Ehrlichia chaffeensis(NR_074500.1)等流行株具有较近的亲缘关系,首次证实石河子地区存在犬埃立克体的感染和流行,为埃立克体病的防控提供了流行病学资料。 相似文献
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为了解单增李斯特菌(LM)核糖核酸酶RNaseⅢRncS的生物学活性,本研究通过PCR方法对该菌LM-SB5野毒株中编码RNaseⅢ的rncS基因进行扩增、克隆及测序并对其进行生物信息学分析;将rncS基因克隆至表达载体p ET-32a(+),转化至大肠杆菌中进行诱导表达。通过体外酶活实验研究目的蛋白对RNA的降解活性。序列分析结果显示,rncS基因全长690 bp,编码229个氨基酸;生物信息学分析结果显示,该基因编码的蛋白含有由9个保守氨基酸(ERLEFLGDA)组成的基序,2个N-酰基化位点、3个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、2个蛋白激酶C磷酸化位点,提示该酶蛋白活性受磷酸化的调控。同源性分析显示,LM-SB5 rncS基因编码的蛋白氨基酸序列与LM标准株CAC99883.1的同源性为99.13%。SDS-PAGE检测结果显示,表达的RncS蛋白相对分子量约为42.5 ku,与理论值相符;western blot分析表明重组RncS蛋白具有较强的反应原性。体外酶活实验表明,RncS是一种依赖于二价金属离子的核酸酶,且二价金属离子浓度不同其RNaseⅢ的切割活性则不同。本研究为进一步研究RncS在LM中调控ncRNAs的分子机制奠定前期基础。 相似文献
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