小鼠桑椹胚OPS管内解冻和直接移植

本实验对昆明白系小鼠的桑椹胚实施OPS法玻璃化冷冻,研究不同管内解冻程序对胚胎体内外发育的影响,旨在为小家畜胚胎冷冻、解冻和移植提供技术参数。采用OPS冷冻两步法(10%(体积分数)EG 10%(体积分数)DMSO溶液中平衡30 s,移入EDFS30平衡25 s)保存小鼠桑椹胚。一步法解冻是将OPS直接插到盛有0.5mol/L蔗糖的离心管中分别平衡1、2、3、4、5和6 min,解冻后经体外培养结果表明,平衡2~4 min组囊胚发育率(93.58%~97.22%)与对照组(100%)无显著差异(P>0 05);实施两步法解冻时将OPS先后插入0.5和0.25mol/L蔗糖中,体外培养结果显示,先后平衡3和2 min组囊胚发育率(100%)最佳,同对照组无显著差异(P>0.05)。将以上方法管内解冻最佳组的胚胎用OPS管作移植导管,直接移植到受体子宫角中,其妊娠产仔率(38.57%)和管外解冻组(42.86%)及新鲜对照组(51.19%)均无显著性差异(P>0.05)。证明OPS玻璃化冷冻的小鼠桑椹胚可以进行管内解冻和直接移植,为小家畜胚胎移植提供了模型。     

猪精液冷冻与常温保存技术的研究

为研究冷冻保存和常温((17±0.5)℃)保存后猪精子活率、活力和顶体完整率,比较了猪精液冷冻稀释液中2种甘油含量细管法的快速冷冻效果,以及不同解冻温度对冷冻精液的影响,采用细胞计数法、FDA-PI双重染色法与Giemsa染色方法检测精子的活率、活力和顶体完整率。结果显示:3%(体积分数,下同)甘油冷冻解冻后精液的活率、活力(38.54%、52.24%)显著(P<0.05)高于2%甘油组(15.63%、28.22%),但3%甘油组顶体完整率(11.55%)显著(P<0.05)低于2%甘油组(21.71%)。38℃水浴解冻后的精子在39℃培养箱中4 h内活率高于0.3,而50℃水浴解冻后1 h后的活率低于0.3。精液稀释液Anderohep和BTS在常温((17±0.5)℃)保存新鲜猪精子的活率与顶体完整率上效果相似,保存3 d内精子活率达0.6以上,保存6 d内精子活率为0.3以上。结果表明,使用3%甘油冷冻保存及2种常温保存稀释液均可以较好地保存精子。     

乳酸脱氢酶对科尔沁细毛羊后代性比的影响

试验以科尔沁细毛羊为对象,研究了乳酸脱氢酶(LDH)处理对其产羔性别比例的影响。将80只母羊随机分为组LDH处理组和对照组2,然后采用孕酮海绵阴道栓对母羊实施同期发情的第4天开始对处理组按300IU/50kg体重进行LDH处理,每48h注射1次,连续注射3次;待其发情后用鲜精进行人工授精,并对输精后母羊阴道分泌物pH和妊娠后母羊血液中的乳酸脱氢酶比活性及乳酸含量进行测定;同时对LDH处理后其后代的性别比例进行了统计。结果表明:LDH处理组母羊阴道分泌物pH与对照组无显著差异(6.83±0.2vs.7.00±0.2)(P>0.05),但其妊娠母羊血液中总LDH比活性、乳酸浓度及后代雄雌性别比例与对照组均存在显著差异(356.5±137.0、9.64±0.2mmol/L)和0.4∶1vs.157.6±39.5、(1.85±0.2mmol/L)和1.1∶1(P<0.05)。由此得出∶用LDH处理可明显改变妊娠母羊血液中总LDH比活性及乳酸浓度,并可显著提高其后代雌性羔羊比例。