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试验旨在探究内皮素3(endothelin 3,EDN3)在不同毛囊时期小鼠皮肤中是否存在差异表达及其对黑色素细胞黑色素沉着相关基因表达的影响。通过RT-PCR技术对EDN3、EDNRB在不同毛囊时期小鼠皮肤的表达情况进行定量分析发现,EDN3和EDNRB在小鼠不同毛囊时期皮肤样品中均有表达,在毛囊生长初期和中期小鼠皮肤中EDN3 mRNA表达量是末期的2.18倍(P < 0.05)和1.15倍(P > 0.05),毛囊生长初期和中期EDNRB mRNA表达量是末期的16.8倍(P < 0.01)和9.9倍(P < 0.01)。为了进一步揭示EDN3在黑色素细胞色素沉着中的重要作用,通过细胞转染技术使小鼠黑色素细胞过表达EDN3并测定其黑色素含量及色素沉着相关基因的表达水平发现,与空载组相比,体外转染EDN3的黑色素细胞黑色素含量明显增加。此外,MITF mRNA显著降低(P < 0.05);TYR、TYRP2、EDNRB、c-Kit和EDN1 mRNA显著升高2.04倍(P < 0.05)、1.44倍(P < 0.05)、1.41倍(P < 0.05)、5.21倍(P < 0.01)和3.27倍(P < 0.01)。MITF蛋白水平显著降低(P < 0.05),TYR、TYRP2、EDNRB和c-Kit蛋白水平显著升高1.48倍(P < 0.01)、4.61倍(P < 0.01)、1.27倍(P < 0.05)和2.64倍(P < 0.01)。综上所述,EDN3在不同毛囊时期小鼠皮肤中均可有效表达,且表达量存在显著差异。黑色素细胞中过量表达EDN3,使色素沉着相关基因的表达量及黑色素含量增加。 相似文献
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本实验采用PCR技术检测出猪下丘脑有HGF的表达,并测定了其部分序列,共281bp,并与其它物种HGF基因进行同源序列比较得出:猪下丘脑扩增出HGF与其他物种HGF基因具有很高的同源性。本研究为诠释下丘脑的内分泌功能提供新的基础,HGF在下丘脑分泌机制和作用途径还需进一步研究证实。 相似文献
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探究黑素皮质素受体1(melanocortin 1-receptor,MC1R)基因型与羊驼毛色形成之间的关系,研究采用PCR-SSCP结合DNA测序方法,对60头羊驼个体(51头白色被毛,9头有色被毛)的MC1R基因的多态性进行检测,并分析了MC1R基因位点突变与羊驼不同毛色之间的相关性.结果表明,羊驼MC1R基因存在SSCP多态性,初步判定为AB和AA两种基因型,其中A基因的基因频率为55.0%,B基因的基因频率为45.0%,AB型的基因型频率为90.0%,AA型的基因型频率为10.0%,6个AA基因型均在有色被毛羊驼个体中检出;测序检测显示,AA型羊驼MC1R基因的第801号碱基发生突变,该碱基突变导致编码的氨基酸由异亮氨酸(I)突变为缬氨酸(V). 相似文献
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Myf5在不同生长阶段小鼠心肌中的定位与表达 总被引:1,自引:1,他引:0
Myf5是生肌调节因子MRFs家族的重要成员,在肌细胞的增殖和发育过程中发挥着重要的调控作用。通过对心肌组织进行HE染色和免疫组化试验,观察心肌纤维细胞核的大小和数量、肌纤维体积和肌纤维之间的间隙变化,了解心肌组织不同发育阶段的显微结构,对比各组的阳性着色部位和着色程度的变化,从而对Myf5因子在不同发育阶段小鼠心肌组织的表达进行初步定性、定量和定位分析。并通过实时荧光定量PCR技术对小鼠的不同发育阶段中的心肌组织的Myf5基因表达做出准确的定量分析。结果表明,在小鼠心肌组织发育的不同阶段,Myf5均显示阳性,幼年鼠表达量最高;Myf5 m RNA表达量幼年鼠最高,性成熟鼠最低,呈现先降低后缓慢上升的趋势,并且幼年阶段与性成熟、体成熟阶段呈现极显著差异,与老年阶段无明显差异。研究表明,Myf5表达与小鼠心肌组织发育具有相关性,可进一步揭示Myf5在心脏发育的病理状况差异性和调控机制。 相似文献
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PR-39通过非穿孔形式抑制DNA和蛋白质的合成,从而对革兰氏阴性菌和阳性菌具有抗菌活性。此外,在伤口修复、炎症、缺血再灌注损伤以及诱导血管生成等方面也发挥着重要的生物学功能,因此开发PR-39具有重大的意义。用人工合成的PR-39基因为模板,通过PCR扩增获得PR-39片段,将其克隆到载体pHIL-S1构建重组质粒pHIL-S1-PR-39,并电转化至毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中,用MD和MM平板筛选重组子,经甲醇诱导其表达后,Tricine-SDS-PAGE分析表达蛋白,通过琼脂扩散试验检测PR-39的抑菌活性。通过MD和MM平板筛选出Mut+的转化子,甲醇诱导表达产物经Tricine-SDS-PAGE得到大约4kD的重组蛋白,并能够抑制大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的生长。本研究获得了能高效稳定表达具有生物学活性的重组PR-39的基因工程菌,为抗菌肽工业化生产奠定了实验基础。 相似文献
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Myogenin是骨骼肌生长发育过程中的重要调控因子之一。采用H.E.染色法观察小鼠骨骼肌组织不同发育阶段的形态特征,通过免疫组织化学法观察在不同发育阶段因子是否表达,并通过实时荧光定量PCR技术对Myogenin在不同发育时期的表达量进行分析,旨在研究不同发育阶段小鼠骨骼肌中Myogenin的表达差异。结果表明,Myogenin在不同发育阶段小鼠骨骼肌的表达位置均为细胞质,且在4个阶段的表达量间存在显著差异,幼年时期表达量最高。 相似文献