延黄牛前体脂肪细胞的培养及生物学特性研究

近几年来延黄牛因肉质优良、口味独特、有典型的大理石花纹等特点入选为我国五大良种牛之一,越来越多地受到消费者的青睐。为建立延黄牛前体脂肪细胞的体外培养体系,从细胞和分子水平探索延黄牛脂肪细胞的生物学特性及潜在的分化机制,采用胶原酶消化法对延黄牛皮下前体脂肪细胞进行分离,对其进行形态学观察并绘制生长曲线,油红O染色法检测成脂诱导分化过程中的脂质积累,利用甘油三酯酶法测定细胞内甘油三酯,采用实时荧光定量RT-PCR的方法检测脂肪细胞成脂标志基因过氧化物酶体增殖体激活受体γ(PPARγ)、CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)的mRNA在延黄牛前体脂肪细胞分化过程中的表达。结果表明:经过分离的延黄牛原代脂肪细胞可贴壁生长,传代后成分均一贴壁良好,呈带角的梭型、形似成纤维细胞;第2天开始细胞进入对数生长期,第4天以后为细胞生长的平台期,增殖速度明显变慢,细胞生长曲线近视"S"形,符合正常的细胞生长规律;经诱导分化后的细胞可被油红O染色,呈现典型的圆形脂滴,具有成熟脂肪细胞的典型特征;甘油三酯含量在第0~4天变化缓慢,在第4天以后显著升高;成脂标志基因PPARγ、C/EBPα随着分化过程的进行,在分化早期显著上升,随着分化进程的结束略有下降。综上所述,本研究成功建立了延黄牛前体脂肪细胞的分离培养方法,为进一步研究延黄牛脂肪沉积作用机制以及改善牛肉品质奠定了基础。     

转K2.9基因绒山羊体细胞核移植技术体系的优化研究

【目的】利用体细胞核移植技术制备转毛角蛋白Ⅱ型中间丝K2.9基因的高绒质绒山羊胚胎,为绒山羊优良品种的培育提供一种全新的技术材料。【方法】以含有Neor 基因标记的K2.9 毛囊特异表达载体pcDNA3.1-K转染绒山羊胎儿成纤维细胞,经G418筛选获得转K2.9基因细胞,将获得的转基因阳性细胞与体外成熟的绒山羊卵母细胞进行核移植,并对生产的重构胚进行了体外培养。本文分别进行了激活方法、供体细胞和卵母细胞来源的筛选,且对获得的囊胚进行了PCR鉴定。【结果】（1）Iono+6-D对成年羊卵母细胞的孤雌激活效果好于A23187+6-D,显著提高了胚胎的卵裂率。（2）羔羊孤雌胚的卵裂率显著低于成年羊,但囊胚率差异不显著。（3）来自2只绒山羊胎儿的转基因成纤维细胞对核移植胚的发育没有显著影响,但2号羊的转基因细胞显著提高了融合率。（4）以羔羊卵进行核移植,显著降低了核移植胚的发育率。（5）对获得的囊胚进行PCR鉴定,成功扩增到目的基因。【结论】将K2.9 毛囊特异表达载体pcDNA3.1-K转染的绒山羊胎儿成纤维细胞作为供体细胞,核移植到成年羊卵母细胞中,以Iono+6-D进行激活,首次成功、高效地获得携带K2.9基因的绒山羊囊胚。     

牛泰勒焦虫病的诊治报告

牛泰勒焦虫病的诊治报告朴永成，于永生，杨兴国，韩枫，金鑫沈阳市苏家屯区兽医卫生站（１０１０１）牛泰勒焦虫病是寄生于牛的红细胞内的寄生虫病，由蝉吸血进行传播，其特点是发病率高，表现稽留热、贫血、黄染，死亡率高。此病在我区大沟乡首次发生。病程前后１个月，...     

法国奶牛胚胎移植考察纪实

法国在欧盟十五国中面积最大，也是其中最大的农产品生产国。农业和农业食品工业占国内生产总值的比重约为６％，其中超过５０％的是畜牧业和畜产品加工业的产值。规模庞大的畜牧业生产使得法国农业在欧盟中具有举足轻重的地位。１９９４年以来，法国的畜产品和农业食品出口都在２０００亿法郎左右，位于欧盟第一。在农业进出口贸易中，每年顺差约５００亿法郎，大部分得益于畜牧业。去年１０月，我们在法国考察奶牛胚胎移植过程中，充分感受到庞大的畜牧业生产是胚胎移植这类先进技术得以广泛应用并形成产业化的基础。一、法国奶牛胚胎移植…     

犊牛断奶管理获益的评判

除了产犊外,小牛的断奶期也是最关键的时期,这一时期母犊的生产性能也非常重要.对于大多数饲养员而言,断奶是母牛产期结束和最能影响到年收益的时期.通过采取对小牛的各种补救措施减少应激,以确保这一年的努力没有白费,并继续生产培育,最终才能送上消费者的餐桌。     

中国草原红牛CAPN I基因的遗传多样性分析

［目的］利用PCR SSCP技术研究中国草原红牛CAPN I基因的多态性。［方法］以90头草原红牛的全血为试材,用酚/氯仿/异戊醇法提取基因组DNA,采用PCR SSCP技术分析了钙蛋白酶 I 基因（CAPN I）在草原红牛群体中的多态性。［结果］试验所设计的18对引物用于PCR扩增均获得良好的结果。经PCR SSCP 分析,E7 1引物扩增的群体出现了AA、BB、AB和AC 4种基因型;E14 1引物扩增的群体出现了 AA和BB 2种基因型,E14 5、E14 6和 E20 2引物扩增的群体出现了 AA、BB和AB 3种基因型。对不同基因型的测序表明,在第14内含子4 685 bp处发生了CT的碱基突变,在第17内含子6 545 bp处发生了CT的碱基突变,在第21内含子上8 462 bp处发生了G A、8 561 bp处A G、8 696 bp处A T的碱基突变。［结论］该研究为改善牛肉质性状的分子育种提供新的分子生物学基础数据。     

延边黄牛PRKAG3基因第10外显子单核苷酸多态性及其与肉质性状的相关分析

采用PCR-SSCP方法对120头延边黄牛PRKAG3基因的多态性进行检测,结果发现第10外显子存在C4738T突变,产生3种基因型。不同基因型与肉质性状均值差异显著性检验结果发现,基因型CT与a2*4、b2*4、油酸存在一定的负相关(P0.05);与嫩度、谷氨酸、精氨酸、丙氨酸、缬氨酸和脯氨酸有一定的正相关(P0.05);基因型CC与天冬氨酸存在一定的正相关(P0.05)。     

丹系长白、大白猪繁殖性能分析

为研究胎次、年度、季节对丹系长白猪、大白猪窝产仔数、仔猪初生重、仔猪均匀度等繁殖性能指标的影响,并比较两个品种的差异,对300头丹系长白猪、299头丹系大白猪繁殖记录进行分析。结果显示：丹系长白猪、大白猪初产母猪窝产仔数低于经产母猪,长白猪仔猪初生重随胎次的增加逐渐降低,而大白仔猪初生重随着胎次的增加逐渐升高;仔猪均匀度均随着胎次的增加而升高;2018—2021年窝产仔数逐年升高,仔猪均匀度年度间没有表现出规律性;春季与秋季分娩的母猪窝产仔数高于夏季和冬季,秋季仔猪初生重表现最差,仔猪均匀度秋季表现最佳;从窝产仔数、初生重与仔猪均匀度来看丹系长白猪性能略优于大白猪。     

不同日龄东北民猪与大白猪背最长肌游离水和肌内脂肪含量的测定

研究测定了60、120、150、180、210日龄东北民猪与大白猪背最长肌游离水和肌内脂肪的含量,结果显示,120日龄大白猪背最长肌游离水含量极显著高于东北民猪1.25个百分点(P0.01),而210日龄东北民猪极显著高于大白猪2.27个百分点(P0.01),其他阶段无显著差异;60日龄东北民猪肌内脂肪含量极显著高于大白猪1.08个百分点(P0.01),180日龄东北民猪肌内脂肪含量显著高于大白猪0.94个百分点(P0.05),其他日龄无显著差异。上述结果表明,东北民猪背最长肌内游离水含量随着机体生长逐渐接近并超过大白猪,而大白猪背最长肌肌内脂肪沉积开始较晚,随着机体生长肌内脂肪含量逐渐接近东北民猪。     

催情散对秦川牛催情效果研究

对直肠检查发现的发情而卵巢上无卵泡发育或长期不发情母牛，采用口服催情散与肌注前列腺素F2α进行治疗。结果表明：口服催情散后120－240h有96．3％（52／54）母牛发情，发情母牛中有92．3％（48／52）母牛排卵，第一情期受胎率为89．6％（43／48）：肌注前列腺素F2α后60－100h有80％（16／20）母牛发情，发情母牛中有81．3％（13／16）母牛排卵，第一情期受胎率为53．8％（7／13）。两种药物作用结果差异极显著（p＜0．01)。