转基因豆粕中内源基因和外源基因检测方法的建立

抗草甘膦(Glyphosate)大豆(商品名:Roundup Ready Soybean)是在传统大豆中转入外源基因CaMV-35S启动子、抗草甘膦基因CP4-EPSPS和NOS终止子而得到的[1].由大豆加工而成的豆粕经过高温浸提、脱溶等过程,其中的DNA成分遭到破坏,容易发生降解等现象.因而如何从豆粕中有效提取DNA成分,并进行可靠的检测就成为检测部门的重要问题.     

豆粕饲料中转基因成分的多重PCR快速检测

以大豆内源基因、35 S启动子基因、NOS终止子和35S-CTP4为检测对象,研究了对内源基因与外源基因的引物终浓度配比及退火温度对转基因豆粕多重PCR检测的影响.结果表明,建立的多重PCR方法能够准确的同时检测出豆粕中的内源基因和转基因成分.     

22味中药及其复方对奶牛乳房炎病原菌金黄色葡萄球菌的体外抑菌试验研究

为了筛选有效中药抑制奶牛乳房炎病原菌金黄色葡萄球菌,采用药敏纸片法测定黄芩等22味中药的体外抑菌效果。采用水提法制备中药药液,浓缩为生药1 g·mL^-1,测定22味中药对金黄色葡萄球菌的体外抑菌圈直径、最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明：黄芩和地榆对金黄色葡萄球菌呈高度敏感,白术、丹皮等5味中药均属中度敏感。选取体外抑菌效果最好的黄芩和地榆加上白术、丹皮组成不同比例复方进行抑菌实验,结果表明：复方Ⅱ和复方Ⅶ的抑菌和杀菌效果最佳,其MIC和MBC均为31.25 mg·mL^-1。     

牛奶中兽药残留限量新国标及主要检测方法的国内外比较分析

长期以来我国有关食品中兽药残留限量标准一直沿用农业部于2002年发布的235号公告,2019年9月发布了GB 31650-2019《食品安全国家标准食品中兽药最大残留限量》,与旧标准相比较,新标准在规定的兽药种类和限量要求上均有较大改变。着眼于牛奶产品,从牛奶中兽药残留限量种类、限量值以及检测方法等方面分析了新旧国标以及与国外世界主要乳品贸易国家和组织相关最新规定进行了综述,以期对我国牛奶安全标准法规制修订及产业安全健康发展提供依据和建议。     

我国部分地区乳房炎奶样中大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

为了解我国部分地区奶牛乳房炎奶样中大肠杆菌的耐药情况,以指导牛场合理使用抗生素,提高治疗效果和畜产品质量,从全国六个省市自治区采取158例奶牛乳房炎的奶样,对奶样中的大肠杆菌进行分离纯化与鉴定,并进行药敏试验。结果显示,158份奶样中,共分离出38株大肠杆菌,其中黑龙江18株(分离率为36.0%)、上海3株(分离率6.0%)、北京3株(分离率27.2%)、新疆10株(分离率33.3%)、山东4株(分离率26.7%)、陕西0株(分离率0)。药敏试验显示,磺胺异噁唑耐药率最高,为73.7%;环丙沙星、诺氟沙星、四环素、链霉素药物的敏感率最高,为100%。分离菌株最多耐13种药物,最少耐4种药物,呈现多重耐药性。不同种类的抗生素中,上海和山东对β-内酰胺类药物和氯霉素类药物以及黑龙江、上海和新疆对磺胺类药物的耐药情况比较严重,耐药率高达50%以上。结果表明,各地区分离株对多种抗菌药物产生了不同程度耐药性和多重耐药,临床兽医在治疗时应注意合理用药,提高疗效和畜产品质量,减少耐药性的产生。     

全价饲料和浓缩饲料饲养育肥猪的比较研究

现在农村养殖户大多使用浓缩饲料加能量饲料饲喂猪,全价饲料应用的并不多。事实上,全价饲料具有价格低、适口性好、饲料转化率高、成本低的优点[1-2]。试验通过直观的数据和分析,阐明了这2种饲料对育肥猪的不同饲喂效果,现报道如下。1材料与方法1.1试验用具、饲料及试验动物     

新疆、内蒙古部分地区乳房炎奶样中金黄色葡萄球菌的流行性与耐药性分析

为确定患乳房炎奶牛乳中金黄色葡萄球菌的流行性和耐药性状况,试验自2018年4月至2018年5月采集了新疆地区70例和内蒙古地区50例患乳房炎奶牛生鲜乳样。通过对奶样中金黄色葡萄球菌进行增菌培养、分离纯化,KB纸片扩散法药敏试验及PCR耐药基因检测发现,新疆和内蒙古地区奶样中金黄色葡萄球菌分离率分别为28.6%和54.0%;新疆地区分离的金黄色葡萄球菌菌株对青霉素G的耐药性最高(75.0%),其次是磺胺异噁唑(60.0%)、林可霉素(55.0%);内蒙古地区的金黄色葡萄球菌菌株同样对青霉素G高度耐受,耐药率为70.4%,其次为林可霉素(63.0%)、克林霉素(51.9%);两地区所分离菌株中,88.9%以上携带多种耐药基因,呈现多重耐药性;两地区所检出的高频耐药基因分别是新疆地区的ermA(30.0%)、dfrS1(30.0%)基因和内蒙古地区的lnuA(46.2%)基因。     

应用PCR-ELISA技术检测转基因豆粕

以共价交联在PCR管壁上的寡核苷酸作为固相引物进行PCR扩增,液相产物进行电泳检测,固相产物杂交后通过ELISA检测。利用该方法可以检测到1%的转基因产品,并且具有高效性和高特异性,可以进行半定量检测。     

动物解剖学课程的教学改革与实践——以青岛农业大学海都学院动物医学专业为例

为了提高动物解剖学的教育教学质量,充分发挥专业育人的作用,笔者以青岛农业大学海都学院动物医学专业为例,从教育理念、教学目标、教学内容、教学方法、挖掘课程育人点和就业点、实验教学和考核体系等多个方面阐述了动物解剖学课程进行的改革与实践。通过动物解剖学课程的改革实践,搭建了师生交流、生生交流的平台,发挥了教师的主导作用,体现了学生的主体地位,提高了学生的学习力,起到了良好的育人作用,增强了学生的综合素质,提高了动物解剖学课程的教育教学质量。     

抗禽流感病毒免疫相关基因的筛选与鉴定

 【目的】研究抗禽流感病毒免疫的分子机制,发现新的抗禽流感病毒免疫相关基因,为抗禽流感转基因育种的研究奠定基础。【方法】随机选取40只30日龄AA白羽肉鸡,其中20只鸡注射禽流感H5亚型禽流感灭活疫苗,另20只未注射疫苗鸡作为对照,在注射后第9天取脾脏保存在液氮中。应用mRNA差异显示技术,结合反向northern dot blot鉴定技术,来筛选注射疫苗组和未注射疫苗组的差异表达基因。【结果】筛选出13条差异表达EST,其中未注射疫苗组4条,注射组9条表达量增高。应用BLAST工具将EST对核酸数据库nr和dbEST中所有序列进行了同源性分析。DD3、DD4、DD6、DD9、DD11、DD12与已有核酸数据库中的基因克隆或EST具有较高相似性,为已知的EST,但功能未知。DD10、DD13与鸡核糖体蛋白L7a基因具有很高的相似性。DD1、DD2、DD5、DD8为新的EST,提交到GenBank,分别获得登录号为EB714185、EB714186、EB714187、EB714188。【结论】本研究筛选出的鸡核糖体蛋白L7a基因和其它EST对应的未知功能基因可以作为抗禽流感病毒研究中的候选基因,其具体的功能有待今后进一步研究。