鱼苗的饲养方法

鱼苗的饲养方法山东栖霞县农业局于力１．豆浆饲莽法鱼苗下塘后半天即开始投喂豆浆。先将黄豆或豆饼用水浸泡，在水温２５～３０℃条件下，浸泡６～７小时。１公斤黄豆可磨成１５公斤浆，１公斤豆饼可磨成１０～１２公斤浆。磨浆时要将黄豆或豆饼与水同时加入，不能磨好后...     

苯并噻二唑诱导番茄对番茄黄化曲叶病毒病的抗性

以番茄感病品种1479和2300为材料,研究了苯并噻二唑(BTH)诱导番茄对番茄黄化曲叶病毒病的抗性,并测定BTH处理和番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)接种对番茄叶片几种防御酶活性的影响。结果表明,0.1～2.0mmol/L BTH能有效诱导番茄产生对番茄黄化曲叶病的抗性,其中0.5 mmol/L BTH处理效果明显,诱导效率可达42.7%。喷施BTH或接种TYLCV均可提高番茄叶片超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性,但诱导并接种处理的植株叶片上述酶活性比只诱导不接种处理高。说明BTH处理可以诱导番茄增强防御酶活性,降低病情指数,增强对番茄黄化曲叶病的抗性。     

抗Asia1型口蹄疫病毒单克隆抗体的制备及抗原捕获ELISA检测口蹄疫病毒的研究

本研究用纯化的Asial型口蹄疫病毒(Foot and mouth disease virus,FMDV)免疫BALB/c小鼠,按常规单克隆抗体技术方法,经筛选获得6株能稳定分泌抗Asial型FMDV单抗的杂交瘤细胞株。以牛抗口蹄疫病毒IgG为捕获抗体,选择一株单抗(184)用辣根过氧化物酶标记(HRP-184)作为检测抗体,建立了检测Asial型FMDV的抗原捕获ELISA方法。该方法可检出0.5859μg纯化Asial型FMDV抗原和2.5×10~3TCID_(50)病毒,对O型FMDV、牛结核病、牛肺疫、牛流热、赤羽病、牛传染性鼻炎等病毒进行检测,均为阴性,无交叉反应发生。本研究建立的FMDV抗原捕获ELISA方法,具有敏感性高、特异性强和重复性好的特点,可用于Asial型FMDV的特异性检测。     

表达A型口蹄疫病毒衣壳蛋白重组腺病毒的构建

为构建表达A型口蹄疫病毒(FMDV)衣壳蛋白的重组腺病毒,本研究通过人工合成A型FMDVP1-2A、2B和3C融合基因,将其克隆到腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV中,利用E.coli BJ5183内同源重组将目的基因插入腺病毒骨架质粒pAdEasy-1中,获得携带A型FMDV P1-2A-2B-3C基因的重组AdEasy-1。该重组质粒经PacⅠ线性化后转染AD-293细胞,获得重组腺病毒rAd-A09。经PCR检测,该重组腺病毒在传代过程中目的基因稳定存在,病毒滴度在第8代时可达到108.5TCID50/mL。间接免疫荧光检测和western blot分析表明,rAd-A09在AD-293细胞中产生FMDV的结构蛋白VP0、VP1和VP3。该重组腺病毒的构建为口蹄疫新型疫苗的研究奠定了基础。     

牛白血病病毒感染的免疫学

牛感染牛白血病病毒(BLV)后,受宿主遗传因素的控制,有三种表现形式:(1)只产生 BLV 抗体;(2)产生抗体及发生淋巴细胞增生症(PL);(3)产生抗体及发生淋巴肉瘤(LS),同时伴有或不伴有 PL。到目前的研究结果认为,PL 不是恶性增生,只有LS 才是恶性增生并导致病牛死亡。因此,对于 BLV 感染来说,只有后一种表现形式才     

牛嵴病毒VP3蛋白的原核表达及初步应用

牛嵴病-毒(BKV)是近几年在牛消化道中新发现的病毒,其致病性尚不清楚.我们的相关研究已表明,该病毒在我国的牛群中普遍存在.为重组表达BKV VP3蛋白,本研究采用RT-PCR方法从牛腹泻粪便样品中扩增BKV VP3蛋白的编码基因,将其克隆至pET-28a(+)载体中构建原核重组表达质粒pET-VP3.将pET-VP3转化至大肠杆菌BL21(DE3)中.经IPTG诱导表达及SDS -PAGE分析表明重组蛋白分子量约为27.8 ku,以包涵体形式存在.采用电洗脱方法纯化该重组蛋白并免疫BALB/c小鼠,制备抗BKV VP3的多克隆抗体.以纯化的重组蛋白作为包被抗原,初步建立了间接ELISA抗体检测方法.小范围调查结果显示,在检测的牛群中BKV感染率较高.