小鼠胚胎干细胞向骨骼肌细胞分化的研究进展

近年来,胚胎干细胞的应用越来越广泛,在体外将小鼠胚胎干细胞诱导分化为肌肉细胞,并且利用这些分化得来的肌肉细胞治疗肌肉退行性疾病,一直是胚胎干细胞研究领域的热点,而胚胎干细胞的分化机制更是其中的难点。目前,用于诱导小鼠胚胎干细胞分化为骨骼肌细胞的方法很多,但分化的效率并不是很高,所以研究胚胎干细胞向骨骼肌细胞方向分化的机制显得尤为重要。文章仅就最近几年对小鼠胚胎干细胞向骨骼肌细胞方向分化的一些方法及其机制作一综述。     

脂肪酸与细胞凋亡的研究进展

近年来,国际上在脂肪酸对细胞的作用及可能机制方面做了大量研究。新近的研究结果表明,不同种类、结构的脂肪酸对于不同类型细胞会产生不同的影响,即使是对于相同细胞也有不同的作用。如饱和脂肪酸大多都可诱导胰岛β细胞、乳腺癌细胞、内皮细胞、神经细胞和生殖细胞等产生凋亡,而不饱和脂肪酸则没有这种作用或作用很小。由于细胞凋亡发生的机理不尽相同,因此研究范围广泛,侧重点亦不同。文章对脂肪酸诱导细胞凋亡以及可能的机制做一综述。     

牛肌肉抑制素前肽对牛肌卫星细胞增殖的影响

通过PCR扩增目的基因,构建真核表达载体,利用PEI转染牛肌卫星细胞,转染后48与72 h通过CCK-8与流式细胞术检测细胞增殖的变化,通过RT-PCR检测目的基因的表达,通过RT-PCR与Western blot检测下游基因P21,CDK2的表达变化.结果表明,在两个时间点,实验组细胞活力明显升高(P<0.01),G0/G1期细胞所占的比例明显下降(P<0.01),S期细胞所占比例明显上升(P<0.01),MSTN前肽基因有大量表达,P21表达下降,CDK2表达上升.结果揭示,在牛肌卫星细胞中,MSTN前肽通过下调P21,上调CDK2的表达量促进细胞增殖.旨在揭示牛MSTN前肽基因对牛肌卫星细胞(MDSC)增殖的影响,为后续的转基因牛试验提供理论依据.     

猪输卵管和子宫中EGF表达的研究

研究EGF mRNA在猪输卵管、子宫中的表达。采用RT—PCR技术检测猪卵泡期、排卵期和孕期的输卵管伞部、壶腹部、峡部和子宫中EGF的mRNA的表达。结果表明：各期卵管伞部、壶腹部、峡部和子宫中EGF的mRNA都强烈表达，但看不出明显的强弱变化，进步证实EGF在猪雌性生殖程中起着重要的作用。     

牛myf6基因克隆及在成纤维细胞中的表达

克隆了牛的myf6基因并构建真核表达载体pIRES2-EGFP-myf6,用脂质体技术转染鲁西黄牛成纤维细胞,通过G418筛选出稳定转染的细胞株,利用Western印记、Real-time PCR技术检测myf6对成纤维细胞的影响。结果表明,与对照组相比,稳定转染后的成纤维细胞myf6蛋白和mRNA的表达量提高(P0.01),肌肉肌酸激酶基因mRNA表达量升高(P0.05),肌球蛋白轻链基因的mRNA表达量也提高(P0.01)。细胞形态观察显示转染后的成纤维细胞未融合为肌管。由此可知,牛myf6基因可以在成纤维细胞中表达并且有促进成纤维细胞向肌肉细胞分化的功能。     

牛myf6基因真核表达载体的构建及在成肌细胞中的表达

【目的】构建牛myf6基因真核表达载体,并观察myf6真核表达载体转染鲁西黄牛成肌细胞后基因的表达和细胞形态的变化。【方法】在质粒pIRES2-EGFP的多克隆位点插入myf6基因构建真核表达载体pIRES2-EGFP-myf6,用脂质体技术转染鲁西黄牛成肌细胞,通过G418 筛选出稳定转染的细胞株。利用Western印记、Real-time PCR技术检测成肌细胞转染前后myf6基因、肌肉肌酸激酶基因和肌球蛋白轻链基因的表达量。【结果】与对照组相比,转染质粒的成肌细胞myf6蛋白和mRNA的表达量提高（P＜0.01）,肌肉肌酸激酶基因和肌球蛋白轻链基因的mRNA表达量提高（P＜0.01）。细胞形态观察显示成肌细胞融合为肌管。【结论】构建的真核表达载体pIRES2-EGFP-myf6能在成肌细胞中高效表达,myf6基因促进了成肌细胞向肌肉细胞分化。     

Ca^＋＋与哺乳动物卵母细胞成熟调控机制的研究

哺乳动物卵母细胞的生长发育与减数分裂成熟的调控机制是十分复杂的,激素、生长因子等都参与其中的调控,这些调控往往又与Ca~(++)在卵母细胞减数分裂成熟中的调控作用密切相关。本文着重阐述Ca~(++)在卵母细胞减数分裂成熟中的调控作用。     

小鼠输卵管、子宫和卵巢组织中的TGF-α mRNA活性

采用ＲＴ－ＰＣＲ技术分别检测了排卵期和怀孕１￣５ｄ小鼠输卵管、子宫及卵巢组织中的转化生长因子－α（ＴＧＦ－α）ｍＲＮＡ活性。结果发现,这一期间内小鼠输卵管、子宫及卵巢中均有较强的ＴＧＦ－αｍＲＮＡ表达,其中输卵管和卵巢中的表达量变化不大,而子宫中的表达量在怀孕５ｄ时明显减少,这进一步证外源（旁分泌）ＴＧＦ－α在早期胚胎发育中可能起重要作用。