罗氏沼虾TLRs基因表达差异分析

[目的]探究罗氏沼虾Toll样受体(TLRs)基因(MrToll1、MrToll2和MrToll3)在不同组织中及感染溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)后不同时间鳃组织的表达量差异变化,为揭示罗氏沼虾TLRs在应对病害等免疫方面的表现和作用机理提供参考依据.[方法]利用实时荧光定量RT-PCR分别检测MrToll1、MrToll2和MrToll3基因在罗氏沼虾肌肉、鳃、肝胰腺、心脏、胃、肠、血淋巴、神经节、眼柄等不同组织中的相对表达量,并以同样方法检测罗氏沼虾感染溶藻弧菌后TLRs基因的相对表达量变化情况.[结果]罗氏沼虾MrToll1、MrToll2和MrToll3基因在各组织中广泛表达,但存在组织表达差异性.MrToll1和MrToll2基因在鳃组织中的相对表达量最高,分别是在肝胰腺中相对表达量的19.26和20.03倍;MrToll3基因在神经节中的相对表达量最高,是在肝胰腺中的10.13倍.感染溶藻弧菌悬液后,罗氏沼虾死亡率随时间的推移不断升高,至注射感染72 h时死亡率达峰值(64%),随后不再出现死亡.感染溶藻弧菌后罗氏沼虾MrToll1基因表达量呈先升高后下降的变化趋势,注射感染后24 h的表达量达峰值;Mrtoll2基因表达量呈下降—升高—下降—升高的波动变化趋势,注射感染后24 h的表达量达峰值;MrToll3基因表达量急剧下降,且维持在较低水平.[结论]罗氏沼虾MrToll1基因是鳃组织抵御细菌感染的主要应答基因,MrToll2基因可能参与鳃组织的其他免疫活动,MrToll3基因的调控机制尚未清晰.     

罗氏沼虾育苗废水净化再利用技术研究

采用不同浓度的3种消毒剂再处理经过暗沉淀、过滤初级处理的罗氏沼虾育苗废水24 h后,开展小球藻、蒙古裸腹溞培养与罗氏沼虾育苗的小型试验和生产性试验,依据培育效果探讨再处理废水的消毒剂适宜浓度.结果表明:培养小球藻的百杀迪、溴氯海因、臭氧再处理废水24 h的适宜浓度分别为10.0 mg/L、0.35 mg/L和28 mg/L,培养蒙古裸腹溞的百杀迪、溴氯海因、臭氧再处理废水24 h的适宜浓度分别为1.5 mg/L、3.0 mg和28 mg/L,培育罗氏沼虾幼体的百杀迪、溴氯海因、臭氧再处理废水24 h的适宜浓度分别为10.0 mg/L、10.0 mg/L和28 mg/L;并成功取得10 mg/L溴氯海因、28 mg/L臭氧再处理的废水培育罗氏沼虾幼体出苗率分别为30%、37%的生产性试验结果.     

不同生长阶段和养殖水位凡纳滨对虾酶活性变化状况

分别在卤虫孵化池和育苗池中进行了80 d和81 d的凡纳滨对虾养殖试验,旨在研究该虾在不同生长阶段消化酶和免疫酶的活性变化以及在单位水体养殖密度相同的条件下不同养殖水位对凡纳滨对虾酶活性的影响,从而了解对虾在不同时期的生长状况,为合理搭配饲料营养,探索新的对虾养殖模式提供科学依据。试验结果表明:胃蛋白酶和类胰蛋白酶的活性随着养殖时间的延长逐渐升高,而脂肪酶活性则逐渐降低;在养殖开始后的前40 d,淀粉酶活性逐渐升高,之后至80 d,酶活性呈下降趋势;在养殖开始后的前20 d,超氧化物歧化酶(SOD)活性和A/T值升高至最大值(142.81 U/mg×prot,76.8),之后两者均逐渐降低,而碱性磷酸酶(ALP)活性的变化则与之相反,且在60～80 d时,呈极显著下降(P<0.01)。试验还表明,低水位组(40 cm)对虾的生长状况要好于高水位组(80、110 cm)。     

硫丹对罗氏沼虾溞状幼体及仔虾的急性毒性作用

在室内静水条件下,考察硫丹对罗氏沼虾溞状幼体(Z5、Z7、Z9)及仔虾(P4)的急性毒性,并测定在硫丹中暴露96 h后存活仔虾体内碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)及Na+/K+-ATPase酶活力.结果表明,硫丹对Z5、Z7、Z9的24、48 h LC50和安全浓度分别为2.086、0.391、0.004 μg/L,2.985、0.843、0.02 μg/L,4.430、2.000、0.123μμg/L;对仔虾的24、48、72、96 h LC50分别为5.479、1.853、0.617、0.471 g/L;硫丹对Z5、Z7、Z9及仔虾的毒性大小依次为SCZ5＞SCZ7＞SCP4＞SCZ9.暴露在0.010～6.982μg/L硫丹中,各试验组仔虾体内ACP酶和AKP酶活性与对照组差异不显著,但暴露在0.264～6.982 μg/L硫丹中的各试验组仔虾体内AKP酶活性较对照组降低16.6％～45.5％;暴露在0.010～0.264 μg/L硫丹内,各试验组仔虾体内Na+/K+-ATPase活性要显著高于对照组.     

罗氏沼虾池塘间歇运转人工湿地调控水质效果及其生长特征

兼用塘内微泡增氧机与净水网,以间歇运转人工湿地生态系统循环处理罗氏沼虾生产性养殖废水,研究间歇运转湿地调控虾塘水质效果与虾生长特征。由表面流与水平潜流组成的复合人工湿地生态系统(582.2 m2)水力负荷1.03 m/d,含斜坡区、挺水植物区与蓄水池。养殖周期内(117 d)无换水与用药,31 d后间歇运转湿地循环处理虾塘水,NO3--N与CODMn去除率分别为66.4%、39.6%(P≤0.01),TAN显著去除(45.0%,P≤0.05),NO2--N去除率为33.3%,维持极低浓度[(0.006±0.005)mg/L]。试验塘主要水化指标处于罗氏沼虾生长适宜与安全范围,蓝绿藻得以有效抑制。对照塘遭受蓝绿藻毒性作用,收获虾规格与产量(8.70 g,0.32 kg/m2)均低于试验塘(9.51~10.72 g,0.38~0.41 kg/m2)。试验建立了表征罗氏沼虾体重与体长、体重和体长分别与养殖时间的3组生长方程,可为制定罗氏沼虾养殖生产计划、调整生产措施以及预估产量提供科学依据。试验结果表明,在未用药与换水条件下,兼用塘内简易设施,间歇运转人工湿地可节省能源,有效调控虾塘水质,确保养殖成功。     

凡纳滨对虾瞬时耗氧速率和体长及溶氧水平的关系

研究了在水温为28℃，盐度为5．5的条件下，凡纳滨对虾瞬时耗氧速率和体长及溶解氧水平的关系。共测定了6种不同体长（1．36～10．84cm）凡纳滨对虾的瞬时耗氧速率。结果表明，凡纳滨对虾的瞬时耗氧速率V随时间的增加而降低，两者之间存有良好的线性相关，呼吸类型属于顺应型；V随水环境中溶解氧含量DO升高而增加，V与DO之间呈良好的线性相关；V随虾体长的增长而降低，两者之间也具有良好的线性关系。     

河口区斑节对虾三种淡化养殖模式的比较

提出了河口区斑节对虾(Penaeus mortodon)三种淡化养殖模式，在全封闭、半封闭与逐添换淡水的三种水质管理方式下，养殖管理的关键技术为：虾苗放养前需经6d以上淡化驯养至养殖池水盐度，待幼虾体长至4cm时，按日-均降盐度1．2％～1．6％的速率，逐步添加淡水，缓慢递降池水盐度，幼虾体长至8～l0cm时，幼虾可在近淡水(S≥0．55)水中养殖，但虾塘水质类型始终保持为海水类型(ClⅢ^Na)；养殖周期内，池水处于高溶解氧状态。试验结果显示，在71～90d养殖周期内，斑节对虾生长良好，起捕虾体长为11．0～13．0cm，产量达到2310．0～2557．5kg／hm^2。     

杭州湾漕泾沿岸水化学状况

报道了 2 0 0 1年 1- 12月杭州湾畔金山漕泾地区用于水产养殖的河口沿岸水化学状况 :总含盐量 (12 .2 4± 1.92 )g/L ,碱度 (2 .12± 0 .2 7)mmol/L ,pH值为 7.99± 0 .11,阴阳离子中含量最高者分别为Cl-(6 .6 4± 1.0 4)g/L与Na+ +K+ (3.76± 0 .6 0 )g/L ,属典型河口区水质特点 ,系海水水质类型 (ClNaⅢ)。常规水质指标如下 :Nt为 (1.32± 0 .44 )mg/L ,其中NH3 Nt占 19.7%,NO-3 N占 78.8%,NO-2 N占 1.6 %,活性磷PO3 -4 P含量为 (2 .0 4± 1.5 7) μg/L ,氮磷比 (N/P)为 6 47(原子比 ) ;化学需氧量 (CODMn)为 (6 .89± 1.76 )mg/L ;五日生化需氧量(BOD5)为 (2 .5 6± 0 .5 2 )mg/L ;溶解氧 (DO)为 (7.95± 0 .5 6 )mg/L。     

养殖密度对罗氏沼虾生长、性别分化与性腺发育的影响

通过比较4个养殖密度(7.50×104、12.75×104、42.00×104、97.50×104尾/hm~2)条件下罗氏沼虾的生长、存活、性别分化、性腺发育等指标,研究养殖密度对罗氏沼虾生长、性别分化和早期性腺发育的影响。结果显示,在实验密度范围内,养殖密度显著影响罗氏沼虾的生长、规格整齐度、性别分化与性腺发育,随着实验时间延长,密度对生长的抑制效应越明显;7.50×104尾/hm~2组罗氏沼虾体质量增速加速度与97.50×104尾/hm~2组的倍数由养殖10 d时的2.3上升到80 d时的3.4;低密度组罗氏沼虾性别分化与性腺发育比高密度组早约10 d,但规格显著大于高密度组;7.50×104尾/hm~2组雌虾初始平均体长(4.158±0.592)cm比97.50×104尾/hm~2组大1.09 cm;养殖密度对性别比没有影响,但对雌虾成活率影响较大。研究表明,养殖密度显著影响罗氏沼虾生长和性腺发育,合适的养殖密度是预防罗氏沼虾性早熟的有效措施。     

人工湿地联合塘内设施调控生产性虾塘水环境的效果与技术

研究了由表面流与水平潜流组成的复合人工湿地联合使用塘内曝气增氧机与人工净化网调控生产性淡水对虾养殖塘水环境的效果与技术。养殖中后期(约60 d后), 湿地以1.65 m/d水力负荷, 3次循环处理虾塘废水, 有效调控虾塘水质, 确保养殖成功。结果表明湿地对废水中有害物质均可程度不等地去除, 蓝绿藻得以控制, 出口水 -N与BOD5分别为极显著(P<0.01)与显著(P<0.05)去除, 去除率与去除速率分别为72.6%, 0.467 g/(m²·d)与29.7%, 2.651 g/(m²·d), -P为41.7%, 0.022 g/(m²·d), TN为26.1%, 2.619 g / (m2?d), CODMn为15.9%, 3.738 g/(m²·d), -N去除率仅3.6%, 但去除速率较高[0.462 g/(m²·d)]。湿地静止4 d期间, 废水中 -N与 -N去除率达96.8%与93.3%, 均极显著去除(P<0.01)。养殖周期试验塘水化学指标均维持在虾安全生长范围内, 收获虾8.81 g, 9.36 cm; 对照塘因爆发蓝绿藻仅养殖60 d, 收获虾3.06 g, 6.54 cm。试验表明, 在不用药、不换水条件下, 联合塘内设施, 人工湿地以较高水力负荷与低频率运转可有效调控虾塘水质, 确保养殖成功。