SAH对猪成纤维细胞体外增殖及甲基化水平的影响

本文旨在研究DNA甲基转移酶抑制剂S-腺苷高半胱氨酸（SAH）对猪成纤维细胞体外增殖活力、周期、凋亡和DNA甲基化水平的影响,为SAH在猪体细胞核移植上的应用提供理论基础。使用不同浓度的SAH(0、0.01、0.1、0.5、1mmol/L)处理猪成纤维细胞,通过CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期与凋亡,ELISA检测DNA甲基化水平,qRT-PCR检测相关基因表达情况。结果表明：与其余各组相比,0.1mmol/LSAH处理猪成纤维细胞24h对细胞活力和凋亡无明显影响,但可将细胞周期阻滞在G0/G1期（P<0.05）;与对照组相比,0.1 mmol/L SAH处理24 h可显著降低细胞中DNA甲基化水平及DNA甲基转移酶相关基因DNMT1、DNMT3A、DNMT3B的表达,同时,显著提高细胞周期调控基因P21、P27的表达,但对凋亡相关基因Bax、Bcl-2的表达无明显影响。总的来说,0.1 mmol/L SAH处理24 h效果优于其他组,对细胞损伤较小,可通过影响DNA甲基转移酶相关基因表达来参与调控DNA甲基化水平。