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【目的】制备鸡环指蛋白165(RNF165)多克隆抗体并对RNF165蛋白进行生物信息学分析,以期为研究鸡RNF165的生物学功能提供参考。【方法】以鸡胚成纤维细胞(DF-1)为试验材料,提取总RNA,反转录获得cDNA,通过PCR扩增RNF165基因,将其连接至pET-28a(+)质粒构建重组表达质粒pET-28a-RNF165。将测序正确的重组表达质粒转化大肠杆菌BL21感受态细胞进行诱导表达,将表达的融合蛋白纯化后按照制定的免疫程序免疫7周龄BALB/c雌鼠。第3次免疫7 d后,分离小鼠血清,用Western blotting检测鼠抗RNF165蛋白多克隆抗体的特异性,间接ELISA法测定其效价。使用在线生物信息学软件对RNF165蛋白理化性质、信号肽、磷酸化位点、亚细胞定位、跨膜结构、二级结构和保守结构域进行分析。【结果】成功扩增得到大小为1 068 bp的RNF165基因。成功构建原核表达载体pET-28a-RNF165,并诱导表达出约43 ku的RNF165蛋白。Western blotting结果显示,制备的鼠抗RNF165蛋白多克隆抗体能特异性识别DF-1细胞中过表达的... 相似文献
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随着农村产业结构的调整,农村中的养牛户越来越多,而农村的经济条件比较差,牛的采食量又大,饲料的供给就成为制约农村养牛业发展的重要因素,通过青贮饲料可较好地解决这个问题。 相似文献
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【目的】评估泛素激活酶(E1)对猪精子获能、膜重构和体外受精的影响。【方法】选取5头长白猪采集精液,以硫醇酯法评估泛素激活酶(ubiquitin activating enzyme, E1)抑制剂(TAK-243)对精子中泛素(ubiquitin, Ub)与E1结合的影响;将精子分为鲜精组(Fresh)、DMSO组(DMSO)、获能组(Capacitated)及2.4、4.8和7.2 nmol/L TAK-243组,鲜精组用2 mL PBS重悬精子沉淀;获能组用2 mL获能液重悬精子沉淀;DMSO组及2.4、4.8和7.2 nmol/L TAK-243组分别用2 mL含0.07%DMSO及2.4、4.8和7.2 nmol/L TAK-243的获能液重悬精子沉淀,使用微生物动(静)态图像检测系统检测精子的动力学参数;以Western blotting法检测精子的酪氨酸磷酸化水平;Zn2+荧光探针检测精子的Zn2+含量;花生凝集素染色检测精子的顶体膜重构;免疫荧光法检测顶体表面精子黏附蛋白(AQN-1、AWN)的表达;体外受精法检测TAK-243... 相似文献
7.
畜牧养殖的关键就在于畜牧动物的防疫工作.为了推动畜牧养殖行业的长远发展,动物防疫单位要定期通过消毒、检疫、免疫等措施对畜牧动物进行处理.基层畜牧兽医动物的防疫工作离不开相关部门的支持以及养殖户的配合. 相似文献
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为了比较亮氨酸对不同动物胰腺消化酶分泌的影响及其是否存在种间差异,试验利用体外组织培养的方法进行研究。试验一:选取5头西门塔尔育肥牛,屠宰后立即取出胰腺组织,切成小块置于含不同浓度亮氨酸的Krebs Ringer bicarbonate buffer(KRB)溶液中,亮氨酸梯度设置为0、2.62、5.24、10.48 mg/mL,每个处理5个重复,培养1 h后取胰腺组织和KRB培养液,测定消化酶活性;用相同方法处理羊、猪、鸡。试验二采用双因素交互试验设计,取牛、羊、猪、鸡胰腺组织,亮氨酸梯度设置为0、5.24 mg/mL,每个处理5个重复,培养1 h后收集胰腺组织和KRB培养液测定酶活性。结果表明:(1)亮氨酸可以线性提高牛胰腺组织释放的α-淀粉酶、胰蛋白酶和糜蛋白酶活性(P<0.05),降低胰腺组织释放的脂肪酶活性(P<0.05),提高羊、猪、鸡胰腺组织释放的α-淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶和糜蛋白酶活性(P<0.05);(2)动物种类显著影响体外胰腺组织释放的α-淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶活性(P<0.05),亮氨酸显著影响胰腺组织释放的α-淀粉酶、胰蛋... 相似文献
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科尔沁沙地灌溉与施肥对退化草地生产力的影响 总被引:2,自引:1,他引:2
在科尔沁沙地典型退化草地上开展了裂区组合设计的灌溉与施肥二因素试验。结果表明,科尔沁沙地退化草地土壤储水量受降水量的影响强烈。由于受到干旱气候和灌溉量的影响,灌水仅对地表0~30 cm的土壤含水量变化有作用,对深层土壤的含水量没有作用。灌溉和施肥对沙地退化草地的植物生物量有着明显的促进作用。灌溉处理中,灌溉90 mm试验区的植被生物量为最高(128.3 g/m2),施肥处理中,每hm2施600 kg氮肥试验区的植被生物量为最高(147.3 g/m2)。灌溉90,60,30 mm和对照试验区的植被耗水量分别为379.00,349.90,313.20和293.50 mm。与其相应的水分利用率分别为0.28,0.38,0.34和0.35 kg/(mm.hm2)。综合分析认为科尔沁沙地退化草地的基本耗水量为294 mm。 相似文献
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