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本文以λEMBL3为克隆栽体,构建了玉米(Zea mays)基因组文库,通过人工合成的探针进行原位杂交和斑点杂交,从文库中筛选到4个含有组蛋白H_3基因的阳性克隆。另外,通过多聚酶链式反应(PCR),从玉米核DNA中扩增了组蛋白H_4基因。这些基因可以在转基因植物研究中作为辅助序列提高外源基因的整合频率。 相似文献
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用基因枪将高赖氨酸基因导入玉米及转基因植株的检测 总被引:47,自引:3,他引:47
构建了两个含高赖氨酸蛋白质基因cDNA的表达载体,用基因枪法将其导入玉米不同杂交组合的胚性愈伤组织,经潮霉素抗性筛选,得到了可育的再生植株,经PCR扩增分析。点杂交,及Southem杂交检测,表明该基因已整合到玉米的基因组中。测定13株T1代种子中赖氨酸的含量,其中有3株赖氨酸含量提高10%以上。 相似文献
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高赖氨到基因导入玉米自交系的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
通过对18个玉米自交系的组织培养,筛选到8个可以正常分化的自交系。用基因枪的方法对其中的4个自交系进行了遗传转化,将高赖氨酸基因导入玉米的胚性愈伤组织,以减少潮霉素筛选次数和筛选浓度的方法,得到分化再生植株,经分子检测,证明外源基因已成功整合到玉米基因组中。部分T0代植株正常结实,通过对T1代植株的分子检测,表明外源基因可以稳定遗传,对其中的转化植株所结的种子进行了赖氨酸含量的检测,发现赖氨酸含量最高提高了16%。 相似文献
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本文首次报道从谷子(Setaria italica)未成熟种子cDNA文库中克隆到一个新基因f103。序列分析表明.该基因由819个核苷酸组成,推测其编码的蛋白质有130个氨基酸,分子质量为14113u。Southern杂交结果显示f103基因以单拷贝存在于谷子基因组中,并且在玉米基因组中存在同源基因。Northern杂交表明f103基因在谷子茎、幼穗及未成熟种子中表达,在叶片组织中未检测到其表达活性。生物学软件分析结果显示,F103蛋白是亲水蛋白,定位于核内,肽链上有多个可以被磷酸化修饰的位点。这些特点可能是F103蛋白生理功能的结构基础。 相似文献
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以烟草(Nicotiana tabacum var.samsum)叶片为材料,提取RNA,分离mRNA,进行RT-PCR扩增编码二氢吡啶二羧酸合成酶(DHDPS)的cDNA片段。序列分析表明,得到971个核苷酸的片段。与发表的序列相比,成熟蛋白N-端编码区缺失了21个核苷酸,且第627位核苷酸发生了C到T的改变,但没有引起氨基酸的变化。将ahaps cDNA编码区的第410和411位核苷酸由AC突变为TT,这一突变使DHDPS成熟蛋白的第104位氨基酸由天冬酰胺变为异亮氨酸。以玉米(Zea mays L.)总DNA为模板,PCR扩增DHDPS叶绿体转运肽的编码序列,序列分析结果显示,扩增片段中含有DHDPS转运肽完整编码区162个核苷酸及成熟蛋白N-端编码区21个核苷酸。将突变后的础(天冬氨酸激酶)基因和dhdps cDNA与CaMV35S启动子、转运肽序列及潮霉素抗性基因连接,构建表达载体pRHAK和pRHDH,用基因枪轰击法将pRHAK和pRTDH转入玉米胚性愈伤组织,得到再生植株。经分子检测证明,目的片段已整合到玉米基因组中。T1代植株的游离氨基酸含量测定显示,部分转入础基因的植株中,叶片和种子中游离苏氨酸的含量提高3~5倍。部分转入dhdps cDNA的植株中,叶片和种子中游离赖氨酸含量分别提高了4倍和1倍。 相似文献
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高赖氨酸蛋白质基因和bar基因导入水稻及转基因植株的检测 总被引:2,自引:0,他引:2
构建了1个含高赖氨酸蛋白质基因和bar基因的植物表达载体,用基因枪法将其分别导入籼稻(Oryza sativa ssp.indica)中优早5号幼胚和龙特甫B成熟胚诱导的愈伤组织中,筛选后得到16株可育的再生植株。PCR和Southern blot检测结果表明,外源基因已整合到水稻的基因组中。T1代植株表现出对PPT的抗性。对部分T1代转基因水稻种子进行分析表明,中优早5号种子中蛋白质含量(12.07%~16.2%)和赖氨酸含量(0.52%-0.67%)分别提高了35.18%和45.09%,龙特甫B种子中蛋白质含量(11.92%,12.87%)和赖氨酸含量(0.51%-0.57%)分别提高了27.69%和16.15%。 相似文献
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外源高赖氨酸蛋白质基因对转基因玉米种子中蛋白质和氨基酸组分的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
分析了将高赖氨酸蛋白质基因导入玉米后,转基因玉米种子中水溶蛋白、盐溶蛋白、醇溶蛋白和碱溶蛋白组分的变化。结果表明,醇溶蛋白和盐溶蛋白总量发生了增加,水溶蛋白总量保持稳定,而碱溶蛋白量有所下降。免疫印迹结果表明,外源高赖氨酸蛋白的表达量与转基因种子中赖氨酸含量呈正相关性。推测外源高赖氨酸蛋白的表达及富含赖氨酸的水溶蛋白和盐溶蛋白组成的改变是转基因玉米种子中赖氨酸提高的主要原因;转基因玉米种子蛋白质可能是外源基因通过非直接的方式导致的结果。 相似文献
10.
用照射花粉授粉在黑麦上获得单倍体 总被引:1,自引:0,他引:1
一、引言自从 Katayama(1934)在一粒小麦(Triticum monococcum)上,用 X 射线照射花粉授粉,从91株后代中获得16个(17.58%)单倍体后代以后,陆续有人在这方面作了一 相似文献