鱼类病毒性出血性败血症病毒诊断胶体金免疫层析方法的建立

为建立一种快速检测鱼类病毒性出血性败血症病毒(Viral haemorrhagic septicaemia virus,VHSV)的胶体金免疫层析方法(GICA),采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,以标记纯化的VHSV G蛋白单克隆抗体(MAb)10A7为捕捉抗体,将纯化的抗VHSV N蛋白的MAb 10EN单克隆抗体和羊抗鼠IgG抗体包被在硝酸纤维素膜上,作为检测带与质控带,经试验条件优化,组装形成胶体金免疫层析试纸条。用本试验研制的胶体金试纸条检测VHSV感染的CHSE细胞培养物。结果显示:在检测线和质控线均呈现红色条带,而健康的CHSE细胞培养物对照仅在质控线呈现红色条带;试纸条检出病毒培养物的病毒量最低限为10~(4.0) TCID_(50);随机挑取3个不同批次的试纸条,对阳性样品和阴性样品进行重复试验,未发现差异。特异性试验表明,该试纸条与传染性造血器官坏死病毒(IHNV)、传染性胰坏死病毒(IPNV)、鲤春病毒血症病毒(SVCV)、牙鲆弹状病毒(HRV)、草鱼呼肠孤病毒(GCRV)无交叉反应。将同一批次的试纸条在4℃条件下保存不同时间后进行检测,发现保存6个月的试纸条仍具有良好的稳定性。本试验研发的胶体金诊断试纸条具有良好的特异性、灵敏性和重复性,在快速辅助检测方面具有推广应用价值。     

25个酿酒葡萄品种DNA指纹鉴定

以取自华东酒庄、烟台酒堡、宁夏葡萄园的25个葡萄(Vitis vinifera)品种为试材,对葡萄叶片进行DNA提取,选用4对核心引物进行PCR扩增,扩增产物进行毛细管电泳,所得微卫星等位基因数据与瑞士葡萄数据库进行比对,来鉴定25个葡萄品种。结果表明:利用4对基本核心引物对位于不同染色体上的SSR位点进行PCR扩增,对扩增产物进行拼接,通过得到的微卫星等位基因与葡萄数据库进行比对,可以准确鉴别19个酿酒葡萄品种,其他6个品种的3对引物得到的微卫星数据与数据库一致,其品种的鉴定需进一步实验确定。     

一氧化碳还原氧化铁实验改进

阐述了教科书上一氧化碳与氧化铁的反应实验的几处不足;设计了一种改进方案.能提高实验的安全性和简洁性。     

蓝氏贾第鞭毛虫检测技术研究进展

蓝氏贾第鞭毛虫是一种分布广、危害严重的水源性人兽共患的寄生虫原虫,可致人和动物严重腹泻.由于其种类繁多,易传染,传播快,对公共卫生安全造成严重威胁.传统的贾第鞭毛虫检测方法主要为粪便样本的显微镜检查.随着免疫学和现代分子生物学的不断发展,很多分子生物学检测技术不断涌现,并成功应用到对贾第鞭毛虫的快速检测.论文就近年来贾第鞭毛虫的检测技术进展情况进行综述.     

葡萄品种鉴定技术及其在遗传多样性研究中的应用进展

葡萄品种的鉴定是葡萄种质资源研究和新品种保护的基础。为了对葡萄种质资源的安全引进和输出提供技术保障,本文归纳了葡萄品种鉴定中常用技术及其在遗传多样性领域的研究进展,总结了在葡萄品种鉴定过程中存在的问题,分析了分子技术在葡萄品种鉴定中的发展趋势,并对今后品种鉴定工作进行了展望。     

兰郑长成品油管道投产运行问题

2009年兰郑长成品油管道试运投产期间,出现了流量监测设备不具备投用条件,充水初期流量控制难度较大,兰州低压区停泵超压,清管器发送时机选择不当,气阻影响输油泵正常运行,以及过滤器误切换等问题.指出了问题产生的原因及相应的处理措施,比如根据泵机组的"流量-扬程"特性曲线,通过计算泵机组提供的扬程,推断出站流量;控制干线流量的出站调节阀开度宜小不宜大;在给油泵和输油主泵之间设置安全阀;在水充满0号高点和7号阀室的第2个U形管段后发球等.其中的实践经验对今后成品油管道的投产作业具有工程借鉴意义.     

苏北稻麦周年绿色高效栽培关键技术

随着农业现代化技术的推广,越来越多的地区开始发展高效、绿色农业。苏北地区农业发展优势突出,在稻麦生产中走出了属于自己的特色道路。文章分析了苏北地区稻麦周年高产面临的主要问题,阐述了稻麦周年高产栽培模式,总结了小麦栽培关键技术,旨在为相关人员提供参考。     

绿色蔬菜生产的技术措施

绿色蔬菜生产,就是遵循绿色生产标准,配送低投入、高产出的原则,从农田生态系统的总体出发,在合理选择基地和加强植物检疫的基础上,协调运用农业、生物、化学等综合技术措施,创造有利于作物生产的良好生态环境,来生产安全和营养双重质量都达到绿色食品标准要求的高产、优质、无公害的蔬菜产品。具体地说,应重点掌握以下几项技术。     

进出口动物中新霉素ELISA检测方法的建立

应用碳二亚胺法合成人工抗原得到卵清蛋白偶联新霉素,通过方阵试验确定最佳抗原包被浓度与抗体稀释倍数,以新霉素质量浓度对数为横坐标、抗体抑制率为纵坐标绘制标准曲线,建立了进出口食用动物中新霉素ELISA快速检测技术,并对建立的方法进行了回收率和特异性试验。结果表明,建立的检测方法包被人工合成抗原的最适稀释度为1：200,抗体的最佳稀释度为1：2 000,半数抑制浓度（IC₅₀）为6.99 ng/mL;该方法的最低检测限达40 ng/mL,与庆大霉素、卡那霉素、链霉素、托普霉素、阿米卡星、双氢链霉素的交叉反应率均小于0.1%,平均加标回收率83.77%。标准曲线在1.5~40 ng/mL范围内是线性的,相关系数为0.987,标准曲线方程为y=-37.66x+94.592;与常规液相检测方法相比操作简单、快速。本研究建立了一种快速、高效、特异的新霉素ELISA检测方法。     

马冠状病毒感染：马的新发病毒性传染病

马冠状病毒(equine coronavirus,ECoV)感染是马的新发胃肠道病毒病,成年马感染后的临床症状多表现为发烧、沉郁、厌食,偶尔可见腹痛和腹泻,幼年马常为无症状感染。日本、美国、巴西以及欧洲部分国家均有散发性病例的报道。初步流行病学研究证明,ECoV可通过粪—口途径传播,马因摄入被粪便污染的饲料和饮水而感染。通过临床表现、血液学异常(如白细胞减少)可作出初步诊断。通过荧光定量PCR(qPCR)在粪便中检出特异性ECoV核酸可作出确诊。由于大多数ECoV感染是自限性疾病,所以马通常在支持性治疗下康复。由于目前还没有可供使用的ECoV疫苗,因此该病预防仅限于基本的生物安全措施。本文通过综述ECoV的病原学、流行病学以及马感染的临床体征、诊断、病理、治疗和预防等内容,以期为该病的防控提供参考。