PCR鉴定沙门氏菌血清分型方法的建立与应用

为建立快速有效、经济适用的沙门氏菌血清型鉴定方法,利用Primer Plex软件设计畜禽中常见沙门氏菌的菌体(O)抗原和鞭毛抗原(H)的引物,优化引物比例和退火温度等反应条件,建立沙门氏菌血清型鉴定的PCR法,并对46株沙门氏菌分离株进行血清型鉴定,同时与传统玻片凝集法和美国CDC的液相芯片(Luminex-x MAP)法进行比较。优化后获得了O抗原中B、C1、D和E1群的多重PCR引物,以及鞭毛抗原H1相抗原基因(fli C)和H2相抗原基因(flj B)的2对引物;建立了一套基于沙门氏菌O和H抗原的多重PCR血清型鉴定法;PCR法和Luminex-x MAP法鉴定出7种沙门氏菌血清型,传统玻片凝集法鉴定出6种血清型;PCR法与传统玻片凝集法和Luminex-x MAP鉴定结果的符合率均为95.65%。本研究建立的PCR沙门氏菌血清型鉴定法简便、快速,预期可在沙门氏菌的血清分型研究中发挥作用。     

湖北省引入第三方检测机构提升动物产地检疫水平实践

根据规定,产地检疫中对怀疑患有检疫规程规定病种及临床检查发现其他异常情况,以及跨省调运要求实验室检测的动物,需经实验室检测合格后,官方兽医才能出具动物检疫合格证明。湖北省开展试点,引入第三方检测机构,为养殖企业提供相关动物疫病的实验室检测服务,借此提升动物产地检疫技术含量,取得了较好效果。本文介绍了湖北省引入第三方检测机构的试点情况,分析了引入第三方开展动物疫病实验室检测的意义并提出了有关思考,以期为各地提供借鉴。引入第三方检测机构,有助于提升动物产地检疫的技术水平,减少动物疫病跨区域传播风险,提升养殖企业的动物疫病防控主体责任意识,弥补动物疫病预防控制机构检测资源与能力的不足。因此,建议正确认识第三方检测机构的作用;适时修订《动物防疫法》及配套规章;借鉴国外经验,探索建立有效的第三方检测机制;将第三方检测机构的检测服务范围拓展到散养户和小型养殖企业,从而整体提升动物产地检疫水平。     

重庆市部分地区H5和H7重组禽流感病毒二价灭活苗免疫效果监测

2017年7月7日,农业部决定对全国家禽开展H7亚型流感免疫。为了掌握重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活苗的免疫效果,2017年8—9月,重庆市动物疫病预防控制中心进行了控制性试验和大面积临床监测。控制试验结果表明:首免15 d后,H7亚型禽流感抗体合格率可达70.00%,H5亚型抗体合格率仅为10.00%;首免22 d后,H7亚型禽流感抗体合格率达到93.33%,H5亚型抗体合格率达到60.00%;该疫苗未出现严重免疫副反应;H7亚型禽流感抗体产生的时间早于H5亚型。随机选取5个区县,采集414份免疫血清进行监测。结果显示:二价灭活苗免疫21 d后,H5和H7亚型禽流感抗体平均合格率分别为92.27%和76.00%;5个区县的抗体水平存在差异;蛋鸡抗体水平高于肉鸡。控制试验及临床监测结果提示,该疫苗免疫效果确实,但部分区县仍存在免疫抗体水平不高的养禽场。因此,在新旧疫苗交替使用期间,各地应高度重视高致病性H5和H7亚型禽流感防治工作,尤其是肉鸡。     

陕西省榆林市某鸡场家禽H7N9流感紧急流行病学调查

2017年5月21日,陕西省榆林市某养殖场的蛋鸡出现异常死亡。经国家参考实验室确诊,该起疫情为H7N9流感疫情。为找出引发疫情的可能原因,采用描述性流行病学方法,描述疫情的三间分布,分析发病的风险因素。调查结果显示:该场饲养规模较大,共有8栋鸡舍,饲养4.5万只蛋鸡;疫情暴发突然,病程仅为5 d;蛋鸡死亡2.2万只,死亡率为48.9%;疫情具有明显的场内传播规律,从靠近鸡场入口的鸡舍逐渐向内蔓延;产蛋高峰期蛋鸡的发病风险是雏鸡的37.458倍,差异显著(P0.05);所分离毒株的HA基因裂解位点有4个氨基酸插入,为变异株;该起疫情可能是通过运输淘汰蛋鸡的车辆、野鸟、饲料和饮水,以及调入雏鸡等途径引入的。疫情发生后,当地政府按照《高致病性禽流感防治技术规范》,发布了封锁令,划定了疫点、疫区和受威胁区;在疫区采取了扑杀、无害化处理、关闭疫区内所有禽类产品交易市场等控制措施。采取以上处置措施后,疫情得以快速有效控制。     

试论我国“注水肉”监管技术体系建设

"注水肉"监管存在判定标准单一的问题,亟须建立畜禽肉监管技术体系。本文借鉴发达国家"消费理念引导"和"市场行为约束"理念,提出以"正常为主"为判定原则,从畜禽宰前管理、屠宰及市场监管多环节入手,通过畜禽行为学、组织形态学、正常肉敏感指标范围、近红外等特征图谱,以及畜禽肉水分限量等指标,提出了构建"注水肉"监管技术体系的新思路。     

新疆阿勒泰垦区规模化羊群弓形虫病血清流行病学调查

为摸清新疆阿勒泰垦区兵团第十师北屯市规模化羊群的弓形虫感染情况,采用间接血凝试验(IHA),对采集自第十师所属7个团场的890份羊血清进行了弓形虫血清抗体检测。结果显示:该地区规模化羊群的弓形虫血清抗体平均阳性率为6.18%(55/890);不同羊群均有感染,表明感染分布广泛;母羊群感染率较高,为9.36%;羊群感染率随羊年龄增加而升高。这些情况需引起足够重视。     

云贵川三省部分地区警犬狂犬病血清中和抗体调查

为评价警犬的狂犬病免疫效果,了解影响免疫效果的因素,2017年在云南、贵州、四川三省部分地区免疫狂犬病疫苗的警犬中随机抽样,采用荧光抗体病毒中和试验(FAVN),检测血清中狂犬病病毒中和抗体效价。结果显示,共抽检187只警犬,中和抗体阳性127只(≥0.50 IU/m L),总体免疫合格率为67.91%,其中云南、贵州、四川3省的免疫合格率分别为57.14%、68.33%、76.06%。结果分析表明,警犬狂犬病免疫合格率与犬的年龄、免疫次数、疫苗类型等因素有关,而与性别和品种无关。建议完善警犬免疫程序,加大血清中和抗体监测力度,对不合格警犬及时加强免疫;对每个影响因素进行连续性分析,以确定影响警犬狂犬病免疫合格率的具体因素。     

水貂变形杆菌病的检测与防治

为给水貂变形杆菌病的临床诊断和治疗提供依据,对发病水貂进行了临床和病理学诊断、细菌分离培养、生化试验、药敏试验及动物试验,同时进行了病毒检测,从病貂体内分离出革兰氏阴性、多形性杆菌。该菌在十六烷培养基上呈扩散生长,能够发酵葡萄糖,硫化氢、苯丙氨酸、脲酶试验均为阳性。最终通过动物试验,验证分离到的杆菌为变形杆菌。随后以药敏试验为依据,选择对该变形杆菌敏感的丙氟哌酸给予治疗,最终达到良好的治疗效果。     

湖南省某生猪批发市场疫病传播风险评估

为评估湖南省某生猪批发市场猪群疫病的发生风险,找出可能的风险因素,便于提出针对性预防措施,采用自行设计的调查问卷,结合访谈和现场调查,对27户经营户进行了调查,并将调查结果和调运数据相结合进行了疫病传播风险定性评估。结果显示:该市场疫病传入的可能性"高",内部传播的可能性"中等",疫病传出的可能性"高"。生猪调运频次多、数量大,经纪人行为复杂,运输车辆清洗消毒不彻底是可能的风险因素。评估结果提示,应尽量减少经纪人行为影响,重点加强对运输车辆的清洗消毒。     

肉鸡屠宰加工过程中沙门菌污染定量风险评估

为了构建肉鸡屠宰加工过程中沙门菌污染定量风险评估模型,分析鸡肉中沙门菌的消长变化规律,明确关键风险防控点,采用2015年部分肉鸡屠宰场沙门菌污染监测和调研数据,构建以烫煺后为评估过程起点,包括净膛、清洗预冷和分割传送的模块化过程风险评估模型,以不同分布描述各变量,并通过@RISK软件模拟运行。结果显示,通过构建的模型模拟屠宰加工后终端鸡肉产品中的沙门菌污染量,90%的可能分布在0~9MPN之间,而依据实际监测数据换算为5.3 MPN,说明模型可信。根据过程中各环节的模拟数据,分析了肉鸡携带的沙门菌消长变化,发现预冷后沙门菌污染总量明显下降,但分割传送后污染总量又有所回升。通过拟合的相关系数分析,明确了传送带上的沙门菌是影响终端鸡肉沙门菌污染的最关键风险点。本研究构建的肉鸡屠宰加工全过程沙门菌定量风险评估模型,可为肉鸡屠宰场沙门菌污染的卫生监管和风险管理提供理论依据。