小麦谷氨酰胺合成酶基因克隆与其表达特性分析

为了研究小麦谷氨酰胺合成酶(Glutamine synthetase,GS)的功能,利用RACE及RT-PCR技术克隆了小麦GS1(GenBank登录号:HQ840647)和GS2(GenBank登录号:JF894116)基因的全长cDNA.小麦GS1的cDNA全长为1 494 bp,GS2的cDNA全长为1 631 bp,并利用生物信息软件对GS1和GS2的基因序列以及所表达的蛋白特性进行了分析.利用半定量PCR和Western-bolt技术分别分析了小麦苗期叶片发育过程中GS同工酶基因转录和表达特点,结果表明,GS1在叶片开始衰老时转录和表达水平较高,GS2从叶片伸长期到定长期转录和表达水平最高.     

Application Study on Optimal Sensor Placement Technique of Cable-stayed Bridge

Based on the modal assurance criterion, using simulated annealing algorithm, the dynamic characteristic data of cable-stayed bridge are extracted, optimal acceleration sensor layout scheme of main beam is obtained. According to this optimization scheme, we carry out a dynamic characteristics test on one cable-stayed bridge. The results between test data and finite element modal calculation are very closely. Theory technique research and field modal test demonstrated that the simulated annealing algorithm based on modal assurance criterion is effective and viable for optimal acceleration sensors placement of cable-stayed bridge.     

青稞种质资源遗传多样性分析与核心种质群体的构建

为有针对性地利用青稞种质资源,收集世界各地青稞种质资源共1 220份,利用95对SSR引物评估其遗传多样性与亲缘关系。结果表明,利用95对SSR引物总共检测到451个等位变异,平均每对引物4.74个,变化范围为1~19。1 220份青稞种质可被划分为A1和A2两个亚群,A1亚群有192份材料,主要为国外青稞种质;A2亚群有1 028份材料,主要为青藏高原地区种质;与A2亚群相比,A1亚群具有较高的遗传多样性和等位变异丰度。分子方差分析和遗传分化分析显示,A1和A2亚群间具有显著的群体分化,群体间遗传差异能解释17.29% 群体方差。构建的青稞核心种质群体包括300个材料,代表了原始群体约98.4%的遗传变异和94.7%以上的表型变异。     

Chronic inhibition of cilazapril on pulmonary vascular and myocardial cell proliferation in hypoxic rats

AIM: To explore the mechanism of cilazapril inhibiting proliferation of pulmonary vascular and myocardial cells in hypoxic rats. METHODS: 30 male Wistar rats were used and divided into three groups: normal control (group A)， intermittent hypoxia for 4 weeks (group B) and intermittent hypoxia for 4 weeks plus cilazapril treatment (group C). The cell proliferation and structural remodeling in pulmonary vasculature and myocardium during hypoxia were studied by biochemical analysis, radioimmunoassay, immunohistochemistry, terminal deoxyuridine tripnosphate nick end labeling and correlated with hemodynamic. RESULTS: (1) The mean pulmonary artery pressure (mPAP) and the right ventricle to left ventricle plus ventricular septum ratio (R/L±S) were significantly higher in the hypoxic rat than that in control animals, while increased thickness of the pulmonary vascular wall and vascular lumen with decrease in the caliber as well as myocardial hypertrophy were observed in hypoxic rats. (2) The proliferative index (PI) of pulmonary arteria and myocardium was significantly higher in group B and C than that in group A. The distribution of ET-1 positive cells was seen in pulmonary arterial wall and cardiomyocytes. The ET-1 immunoreactivity was group B>group C>group A by turns. (3) The concentrations of plasma endothelin-1 (ET-1) and angiotensin converting enzyme (ACE) were significantly higher in group B than that in group A. However, the ET-1 and ACE were significantly lower in group C than those in group B. (4) The ET-1 and ACE had a significant positive correlation with R/L+S, mPAP and PI, respectively. The multivariate linear regression analysis revealed that ET-1 and ACE were major factor affecting PI. CONCLUSION: The pulmonary vascular and myocardial structural remodeling are one of the pathogenesis accompanied with excessive cell proliferation in hypoxic pulmonary hypertension (PH). Cilazapril effectively prevents and treats the hypoxic PH by inhibiting cell proliferation and structural remodeling of pulmonary circulation, as induced by ET-1 and ACE.     

与家蚕细胞凋亡相关的Caspase基因Bmlce的克隆和序列分析

Drlce基因在果蝇的细胞调亡代谢途径中起着重要作用。采用tblastn程序将DrICE在家蚕EST数据库中进行同源性检索，检索到的EST序列进行电子延伸，根据延伸结果设计引物，用RT-PCR检测和克隆测序验证，成功地克隆到家蚕第二种Caspase基因的全长cDNA（GenBank登录号为：AY885228）。克隆的cDNA长l410bp，ORF长825bp，编码275个氨基酸残基，预测分子量为31．8kD，等电点为6．15，基因名定为Bmlce。将Bmlce的cD-NA与家蚕基因组序列进行比对，结果表明该基因具有6个外显子，外显子／内含子边界处均符合GT-AG规则。BmICE在氨基酸水平上与果蝇DrICE、线虫的CED-3的一致性分别为34％和29％，在第169个氨基酸残基处具有QACRG的五肽活性位点．该活性位点是Caspase家族的典型结构。与果蝇Caspase家族聚类分析中，BmICE与果蝇中具有短的N端结构域的DrICE、DCP．1及DECAY聚为一类，根据其结构分析和聚类分析，推测家蚕Bmlce基因可能参与细胞凋亡的执行作用。     

猪CD3ε分子的cDNA 克隆与序列分析

应用RT-PCR和3′RACE技术，本研究从猪外周血淋巴细胞总RNA中扩增克隆了猪CD3ε基因并进行了序列分析。序列分析结果表明，猪CD3ε cDNA序列长1241nt，其中5′非翻译区80nt，3′非翻译区570nt，开放阅读框591nt，该开放阅读框编码196个氨基酸残基的CD3ε前体蛋白(无糖基化位点)；在猪CD3ε蛋白的胞外区，Cys^49、Cys^91、Cys^108和Cys^111为保守性氨基酸残基，它们与CD3ε免疫球蛋白样结构的形成有关。在猪CD3ε蛋白胞浆区，存在免疫受体酪氨酸活化基序(ITAM)、内质网潴留基序和1个SH3结合基序，其中ITAM基序含有2个SH2结合基序和2个潜在酪氨酸磷酸化位点Tyr^177和Tyr^188，这些基序是猪CD3分子参与T细胞活化信号转导和TCR-CD3复合体装配的结构基础。推导氨基酸序列分析结果表明，猪与人、鼠、狗、牛和绵羊CD3ε蛋白的氨基酸同源性分别为61．2％、58．7％、58．7％、65．1％和65．6％。     

不同紫花苜蓿品种的TWINSPAN分类与筛选

应用“康乃尔生态学”程序（Comelle cological program，CEP）中的二歧指示种分析TWINSPAN（Two-Way Indicators Species Analysis）数量分析方法，以不同紫花苜蓿品种的生理生态特性值和牧草产量值为指标对16个紫花苜蓿品种进行分类。结果表明：用TWINSPAN可将16个品种划分为7类，并且根据试验站所在地区的干旱半干旱的气候特征，筛选出高产、高水分利用效率、高光能利用效率的3个优良品种，分别为肇东苜蓿、德宝苜蓿和草原2号苜蓿。     

不同磷、钾和多效唑用量对越冬期沟叶结缕草生理特性的影响

采用三因素再裂区设计,研究了不同磷、钾及多效唑处理对越冬期沟叶结缕草生理特性的影响。结果表明,入冬前施用适量的磷、钾肥及多效唑能明显提高沟叶结缕草SOD、POD和CAT酶活性,自由基含量相应减少,膜脂过氧化程度减轻,抗逆性增强,且对N、P、K养分的吸收增多,为沟叶结缕草越冬奠定了物质基础。施肥能促进沟叶结缕草生长并改善外观品质,表现为叶绿素含量提高,密度增加,以施磷量60kg/hm^2、施钾量140kg/hm^2和多效唑浓度250mg/L处理效果最佳,而多效唑处理浓度为500mg/L会抑制沟叶结缕草的生长,并降低草坪草品质。     

五个品种(系)鸡的RAPD亲缘关系分析

本试验用DNA池法从40条随机引物中筛选出29条多态性、重复性好的引物,对贵州黄鸡、兴黔黄鸡、乌骨鸡三个培育品种(系)和地方品种兴义矮脚鸡及引进选育品种矮脚黄鸡共五个品种(系)进行随机扩增多态亲缘关系分析。结果表明,29条引物共扩增出稳定、清晰、重复性好的条带190条,其中多态性片段127条,在300bp￣3000bp之间。单个引物扩增出的RAPD条带在4￣13条之间,平均为6.55条。五个品种(系)间的亲缘关系符合它们的育种背景[1,2,3]。     

鸡GH基因内含子1 MspⅠ位点多态性及其与生长及繁殖性状的相关性

以泰和乌骨鸡等6个江西地方鸡种和罗曼蛋鸡等2个商业鸡种为试验材料，采用PCR—RFLP技术，对鸡生长激素基因内含子1MspⅠ位点多态性及其与生长、繁殖性状的相关性开展研究。结果表明：（1）产蛋性能较高的品种中以C基因为主，生长较快的品种中A基因频率和C基因频率较接近，其它品种则以A基因为主；地方鸡种均以A基因为主，而外来鸡种均以C基因为主。（2）泰和乌骨鸡和万载康乐黄鸡均表现为杂合型个体有较迟的开产日龄（P〈0．05），产蛋数问均表现为差异不显著；在万载康乐黄鸡中，各基因型间开产蛋重表现为极显著差异（P〈0．01）。（3）与体重的相关分析结果显示，在宁都三黄鸡中，该位点仅对其母鸡1月龄体重影响差异极显著（P〈0．01），对公鸡及母鸡的其它各阶段影响均不显著（P〉0．05）；在万载康乐黄鸡中，8周龄体重表现为差异不显著（P〉0．05），12、18周龄时表现为差异极显著（P〈0．01）。（4）AA和BB型有较早的开产日龄，但在开产较早的鸡中并不是频率最大的基因型；在万载康乐黄鸡中，AB型有较大体重趋势，在宁都三黄鸡种中，以AA型有体重最大趋势，在生长较快的品种中它们也并不是频率最高的基因型。