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【目的】分析藏绵羊Krüppel样因子7(Krüppel-like factor 7,KLF7)基因表达特征,研究过表达该基因对前脂肪细胞增殖及分化的影响。【方法】从藏绵羊脂肪组织中分离前脂肪细胞进行培养及成脂诱导,应用实时荧光定量PCR技术检测KLF7基因在藏绵羊7个组织(大脑、皮下脂肪、肾脏、背最长肌、瘤胃、睾丸和回肠)和前脂肪细胞不同分化阶段(第0、2、4和8天)的mRNA相对表达水平;应用RT-PCR方法从藏绵羊脂肪组织中扩增KLF7基因CDS区序列,并将其连接到pcDNA3.1(+)真核表达载体获得pcDNA3.1-KLF7过表达质粒,转染前脂肪细胞;应用实时荧光定量PCR方法检测脂肪细胞增殖及分化标志基因mRNA表达水平;采用EdU和CCK-8方法分别检测过表达KLF7基因对EdU阳性细胞数和细胞活力的影响;采用油红O染色检测过表达KLF7基因后脂肪细胞脂滴生成量。【结果】KLF7基因在藏绵羊7个组织中均有表达,其中在大脑中的表达量最高,其次为皮下脂肪和肾脏,均显著高于其他组织(P<0.05);诱导分化第2、4和8天脂肪细胞mRNA表达量均显著高于分化前(P<0.05),且分化第2天表达量最高;pcDNA3.1-KLF7过表达质粒转染前脂肪细胞2 d后显著或极显著抑制增殖标志基因CDK4、CyclinB1和CyclinD1的表达水平(P<0.05;P<0.01),极显著降低细胞活力及EdU阳性细胞数量(P<0.01);pcDNA3.1-KLF7过表达质粒转染前脂肪细胞,诱导分化8 d后,脂肪细胞分化标志基因PPARγ、Glut4和ELOVL6的mRNA相对表达水平显著或极显著下调(P<0.05;P<0.01),且脂质沉积极显著减少(P<0.01),表明过表达KLF7基因可抑制藏绵羊前脂肪细胞增殖及分化。【结论】KLF7基因在藏绵羊多个组织中广泛表达,且大脑、皮下脂肪、肾脏中表达量较高;诱导分化后脂肪细胞表达量显著高于分化前,且分化第2天表达量最高;过表达KLF7基因可抑制藏绵羊前脂肪细胞的增殖及分化。试验结果为阐明藏绵羊脂肪沉积的分子调控机制提供了基础数据。 相似文献
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根据GenBank中已发表的猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒(PRV)和猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)等3种病毒基因序列,对各病毒基因区进行同源性分析,确定PPV VP2、PRV gB、PCV2 ORF1基因的保守区为各病毒的诊断靶序列.在建立各病毒单重PCR技术的基础上,优化多重PCR反应条件,建立了三种病毒的多重PCR技术.用78份临床病料对本研究多重PCR技术和单重PCR技术进行对比验证,结果显示,总符合率为97.4%以上.该方法特异性强、敏感性高,为PPV、PRV和PCV2临床诊断和流行病学调查等研究提供了新手段. 相似文献
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猕猴桃全光喷雾扦插快速育苗研究 总被引:1,自引:0,他引:1
用中华猕猴桃(Actindia chinensis Planch.)‘江西79—1’、‘79—3’、‘奉新79—2’于6月中旬进行嫩枝全光喷雾扦插,苗床温度为25—30℃,叶面相对湿度为85%以上,以蛭石为扦插基质,插条基部用1000ppm吲哚丁酸进行速蘸(30秒)处理。试验结果插条发根率77.1%。插后5天产生愈伤组织,20天生根 40天移栽时单株平均根数为11.8条,平均根长6.9cm,最多根数35条,最长根17.9cm;移栽成活率85%以上。移栽苗当年新梢长2—10cm,第2年枝蔓平均长49.7cm,最长蔓137cm。 相似文献
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本文以不同水平人工草地绵羊放牧系统的监测分析资料为基础,针对原系统中存在的问题,提出了系统优化方案。 相似文献
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为筛选适宜青海省东部农区推广的小黑麦( × Triticosecale Wittmack)与豆科牧草的混播组合及比例,采用裂区设计,研究了‘甘农2号’小黑麦与两种豆科牧草[‘青建1号’饲用豌豆(Pisum sativum)和毛苕子(Vicia villosa)]不同混播比例(0?? 100、20?? 80、30?? 70、40?? 60、50?? 50、60?? 40、70?? 30、80?? 20、100?? 0)的混播效应。结果表明:从混播组合看,‘甘农2号’小黑麦与‘青建1号’饲用豌豆混播的平均鲜草产量(41.80 t·hm–2)最高;从混播比例看,‘甘农2号’小黑麦与豆科牧草50?? 50混播时平均鲜草产量(44.45 t·hm–2)最高,比小黑麦和豆科牧草单播平均分别提高了17.94%和17.53%;混播组合和混播比例间的交互作用表明,‘甘农2号’小黑麦和‘青建1号’饲用豌豆以40?? 60的比例混播时总鲜草产量(45.55 t·hm–2)最高,比小黑麦和饲用豌豆单播分别提高了20.09%和17.00%。相关分析表明,混播群体的鲜草产量与小黑麦株高呈显著正相关关系(P < 0.05),与豆科牧草株高呈极显著正相关关系(P < 0.01)。因此,在青海省东部农区推荐‘甘农2号’小黑麦与‘青建1号’饲用豌豆以40?? 60的比例进行混播。 相似文献
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本文采用高效液相色谱法,以乙腈 水为流动相,使用以ZORBAX 80A Extend-C18、5μm为填料的不锈钢柱和二极管阵列检测器,在240nm波长下对氟唑磺隆原药进行分离和定量分析.结果表明氟唑磺隆的线性相关系数为1.0000;标准偏差为0.37;变异系数为0.41%;平均回收率为99.8%. 相似文献
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Methyl donors dietary supplementation to gestating sows diet improves the growth rate of offspring and is associating with changes in expression and DNA methylation of insulin‐like growth factor‐1 gene 下载免费PDF全文
Yang Zhao Yuedong Xuan Daolin Mou Hong Liu Pan Zhou Zhengfeng Fang Lianqiang Che Shengyu Xu Bin Feng Jian Li Xuemei Jiang Yan Lin De Wu 《Journal of animal physiology and animal nutrition》2018,102(5):1340-1350
The study aimed to investigate the effects of maternal dietary methyl donors on the performance of sows and their offspring, and the associated hepatic insulin‐like growth factor‐1 (IGF‐1) expression of the offspring. A total of 24 multiparous sows were randomly fed the control (CON) or the CON diet supplemented with methyl donors (MD) at 3 g/kg betaine, 15 mg/kg folic acid, 400 mg/kg choline and 150 μg/kg VB12, from mating until delivery. After farrowing, sows were fed a common lactation diet through a 28‐days lactation period and six litters per treatment were selected to be fed until at approximately 110 kg BW. Maternal MD supplementation resulted in greater birthweight (p < 0.05) and increased the piglet weights (p < 0.01) and litter weights (p < 0.05) at the age of day 28, compared with that in CON group. The offspring pigs in the MD group had greater ADG (p < 0.05) and tended to lower F:G ratio (p = 0.07) compared with that of CON group from day 28 to 180 of age. The offspring pigs from MD group had greater serum IGF‐1 concentrations and expressions of hepatic IGF‐1 gene and muscular IGF‐1 receptor (IGF‐1r) protein at birth (p < 0.05), and greater hepatic IGF‐1 protein (p = 0.03) and muscular IGF‐1r gene expressions (p < 0.05) at slaughter, than that from the CON group. Moreover, the methylation at the promoter of IGF‐1 gene in the liver of newborn piglets and finishing pigs was greater in the MD group than that of the CON group (p < 0.05). In conclusion, maternal MD supplementation throughout gestation could enhance the birthweight and postnatal growth rate of offspring, associated with an increased expression of the IGF‐1 gene and IGF‐1r, as well as the altered DNA methylation of IGF‐1 gene promotor. 相似文献