猪囊尾蚴头节单链抗体-PE40重组载体的构建及表达

从绿脓杆菌ATCC27853菌株中提取基因组,PCR扩增PE40基因,与pMD18-T栽体连接并转化感受态大肠杆菌JM109中,构建重组质粒pMD-PE40;经鉴定正确后将PE40基因插入抗猪囊尾蚴头节单链抗体基因重组质粒pMD-ScFv中,构建重组质粒pMD-ScFv-PE40,经酶切、电泳回收目的片段,并亚克隆到表达栽体pET-28a中,构建重组表达载体pET-ScFv-PE40;鉴定后转化E.coli BL21,IPTG诱导后进行SDS-PAGE和Western blotting验证.结果表明,试验成功构建了重组表达载体pET-ScFv-PE40,目的片段约为1800 bp;Western blotting证明重组蛋白具有一定的反应原性,为重组免疫毒素的制备及动物保护性试验奠定了基础.     

非洲猪瘟疫情形势下生长育肥猪饲养管理关键技术

育肥猪的科学饲养与管理直接影响猪场经济效益,非洲猪瘟疫情形势下的育肥猪生产更是充满挑战与压力。文章旨在针对生长育肥猪养殖的基本环节及操作要点,从环境控制、科学饲养与管理、严格防疫等方面阐述了育肥猪养殖的关键技术,为非洲猪瘟疫情防控形势下的生猪保供复产提供技术支撑。     

新生仔猪的护理——以上海某规模猪场为例

我国养猪业发展迅速,整体水平在不断提高,但是与养殖业较为发达的国家相比仍有一些差距。以每年每头母猪断奶的仔猪数（PSY）为例,目前国外养猪发达国家PSY普遍已超30头,而我国却仍在25头左右,仍有较大的提升空间。仔猪护理工作在生猪生产过程中尤为重要,一旦护理措施不当就会造成仔猪死亡,从而降低PSY,直接影响到养猪企业的经济效益。规模猪场仔猪死亡的主要原因就是由于仔猪护理不当所引起的,仔猪护理问题一直是养猪业的一个难题。文内以2020年4—5月上海某规模猪场某栋产房新生仔猪（共477头,其中压死8头,瘦弱致死12头,腹泻致死亡的32头）为例,介绍规模猪场的仔猪护理及注意事项,以期为仔猪护理工作提供借鉴。     

静电场对三种固沙饲用植物种子萌发及其活力的影响

用1.5KV/cm×10(20,30)min、2.5KV/cm×10(20,30)min、3.5KV/cm×10(20,30)min 9个组合的静电场强处理柠条、沙蒿、沙打旺3种固沙饲用植物的种子,研究了静电对其种子萌发及活力的效应.结果表明,所有静电处理组合对3种植物种子发芽率(势)、胚根生长、简化活力指数、细胞膜透性均无显著影响.     

静注克洛素隆在绵羊体内的药代动力学研究

应用YWG-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),WatersTM 486型可调波长紫外检测器(检测波长265 nm);0.01 M磷酸钾(pH=7)乙腈(3 1)为流动相;含量测定采用标准曲线法,建立了RP-HPLC法检测绵羊血浆中克洛素隆含量的方法.同时对绵羊单剂量静脉注射7 mg/kg克洛素隆的药代动力学进行了研究.血药浓度在0.005～2.0 μg/ml及2.0～50.0μg/ml范围呈良好线性关系(r=0.9941、0.9970),平均回收率93.2%,血药最低检测浓度0.005μg/ml,日内日间变异系数分别小于10%、11%.血药浓度结果经MCPKP药代动力学统计软件处理,体内药物运转符合三室开放模型,主要药物动力学参数t1/2γ=14.14 h,Kel=0.3260 h-1,AUC=153.95 mg/l@h,fc=0.055.结果表明克洛素隆静脉单次给药后体内分布较为广泛,持续作用时间长,主要通过肾脏排泄.     

Inhibition of FGF Signalling Pathway Augments the Expression of Pluripotency and Trophoblast Lineage Marker Genes in Porcine Parthenogenetic Blastocyst

The consistent failure to isolate bona fide pluripotent cell lines from livestock indicates that the underlying mechanisms of early lineage specification are poorly defined. Unlike other species, the contrivances of segregation have been comprehensively studied in the mouse. In mouse, FGF/MAPK signalling pathway dictates the segregation of hypoblast (primitive endoderm). However, it is not evident whether this mechanism is also conserved in livestock. Here, in this study, we examined the roles of FGF/MAP kinase signalling pathways in porcine parthenogenetic embryos during the early development. Porcine parthenogenetic embryos were cultured in the medium addition with FGFR inhibitor BGJ398 (10 μm ) or DEMOS. Pluripotency‐ and lineage‐related gene expressions in the early porcine embryos were determined. Compared to control, total cell numbers on day 7 were significantly higher (55 ± 5.96 vs 47 ± 1.97, p < 0.05) in embryos cultured in the presence of BGJ398, but had no significant effect on the rate of blastocyst development (47% vs 44%, p > 0.05). Nonetheless, BGJ398 treatment significantly augmented the expression of pluripotency and trophoblast marker genes (SOX2, OCT4, KLF4 and CDX2), but did not significantly change the expression of NANOG and hypoblast marker gene (GATA4). Furthermore, the addition of FGF signalling agonist (FGF2) during the embryo development significantly decreased the expression of pluripotency and trophoblast marker genes (SOX2, NANOG, KLF4 and CDX2), but no significant effect on the expression of OCT4 and GATA4 was observed. Here, we exhibit that inhibition of FGF signalling could improve the quality of the porcine embryo and escalate the chance to capture pluripotency. Besides, it also promotes the trophoblast development of porcine parthenogenetic embryo. In addition, the data suggested that FGF signalling pathway is dispensable for the segregation of hypoblast and epiblast lineages in porcine embryo during the early development.     

口蹄疫病毒VP1基因密码子偏好性分析

VP1蛋白是口蹄疫病毒(FMDV)的主要结构蛋白,可诱导机体产生中和抗体以及激发保护性免疫应答。为探究VP1基因密码子偏好性,筛选出其最佳体外表达系统,使用Visual Gene Developer、CodonW、GraphPad Prism等软件,对VP1基因进行密码子偏好性分析,同时将VP1基因密码子使用频率与大肠杆菌、毕赤酵母、昆虫杆状病毒和哺乳动物细胞表达系统作了比较。结果显示,VP1基因的CAI为0.21,ENC为55.43,GC3S为65.26%,表明该基因密码子使用偏好较弱并且密码子偏好以G/C碱基结尾。结合VP1基因与各表达系统密码子使用频率比值,发现其与昆虫杆状病毒表达系统频率比值差异最小且CAI最大,因此推断昆虫杆状病毒表达系统是FMDV VP1基因最适体外表达系统。本研究为FMDV亚单位疫苗研制等提供了技术基础。     

钾肥对不同收获时期青贮玉米碳水化合物积累的影响

为探讨不同施钾量对不同收获时期青贮玉米(Zea mays L.)中碳水化合物积累的影响,以青贮玉米东青1号(Z.mays L.cv.Dongqing No.1)为材料,设4个施钾用量,其中K₂O施用量分别为0,56,112和168kg·hm^-2,分别于乳熟初期(8月21日)、乳熟中期(8月28日)、乳熟末期(9月4日)、蜡熟初期(9月10日)、蜡熟中期(9月15日)和蜡熟末期(9月20日)收割取样,测定其碳水化合物含量和鲜草产量。结果表明:青贮玉米中果糖含量在乳熟初期收获最高(P<0.05),蔗糖含量在乳熟末期收获最高(P<0.05),可溶性总糖含量和鲜草产量在蜡熟初期收获最高(P<0.05),淀粉含量在蜡熟末期收获最高(P<0.05);施用钾肥可显著提高青贮玉米中果糖、蔗糖、可溶性总糖和淀粉含量和鲜草产量(P<0.05),其中施钾(K₂O)112kg·hm^-2效果最佳。综合施钾肥对不同收获时期青贮玉米鲜草产量和碳水化合物积累的影响,施钾(K₂O)112 kg·hm^-2并于蜡熟初期收获是青贮玉米东青1号栽培利用的适宜组合。