发病鲆鲽类分离菌株的16S rRNA基因测序分析

细菌性疾病是中国海水养殖鲆鲽类的主要病害,为全面了解病原菌种类,本研究对1999~2012年从山东、江苏、河北、天津等沿海地区养殖场发病鲆鲽鱼类中分离得到的124株优势菌株进行了16S rRNA基因测序和系统发育学分析。将基因序列与GenBank核酸序列数据库进行相似度比对分析,结果显示,有83株与弧菌属(Vibriosp.)细菌相似度最高,11株与气单胞菌属(Aeromonas sp.)细菌相似度最高,4株与爱德华氏菌属(Edwardsiella sp.)细菌相似度最高,26株为其他15种属的细菌。根据系统发育学分析结果,进一步将66株菌鉴定为16个种,优势种为溶藻弧菌(V.alginolyticus)、哈氏弧菌(V.harveyi)、鳗弧菌(V.anguillarum)、杀鲑气单胞菌(A.salmonicida)和迟缓爱德华氏菌(E.tarda)。选择其中的9株鳗弧菌和4株迟缓爱德华氏菌进行人工感染实验,结果显示,其中7株鳗弧菌和3株迟缓爱德华氏菌对大菱鲆(Scophthalmus maximus)有较强的致病性。研究结果可为阐明中国海水养殖鲆鲽类的流行病发生历史、病原种类、病原监测及疾病控制提供重要参考。     

猪伪狂犬病病毒双基因缺失突变株(HB-98株)安全性、稳定性和免疫原性测定

对以伪狂犬病病毒鄂A株为亲本毒株构建的TK和gG双基因缺失突变株（PrV HB-98株）的增殖能力、安全性、毒力稳定性和免疫原性进行了测定。结果表明，PrV HB-98株在BHK-21细胞上的增殖滴度为10^7.0 TCID50／0．1mL以上，与亲本毒株相当，但高于Bartha株；与PrV鄂A株相比，病毒量为10^7.0TCID50的PrV HB-98株不引起BALB／c小鼠的死亡，毒力也低于Bartha株；将PrV HB-98株在PK-15细胞连续培养25代和在猪体内上连续继代5次，各代次突变株TK基因和LacZ基因能被稳定扩增，未出现毒力回复现象．表明该毒株具有良好的遗传稳定性；以10^5.0、10^6.0、10^7.0TCID50等3个不同剂量的PrV HB-98株接种于妊娠50～60d母猪和1日龄仔猪，母猪均能正常产仔．仔猪也未出现任何临床症状，证明该毒株有较好的安全性。另外，以10^5.0TCID50的PrV HB-98株接种于妊娠50～60d母猪和1日龄仔猪，分别于接种后28d和20d，用10^7.0TCID50 PrV鄂A强毒进行攻击．结果免疫猪都能抵抗强毒的攻击．获得保护，表明该毒株具有很强的免疫原性。综合上述结果表明，PrV HB-98株可以作为候选毒株．用于伪狂犬病基因工程疫苗的研制。     

弧菌属PCR检测方法的建立与应用

根据弧菌属细菌(Vibrio spp.)共有的rpo A基因序列,比对和设计了一对PCR引物,建立了能够快速而准确地检测弧菌属细菌的通用PCR检测方法,该方法对靶标DNA的检测灵敏度为58 fg/μL,对菌液的检测灵敏度为2.7×102cfu/m L,能够区分该属细菌与其它属的细菌,具有极高的特异性。使用建立的方法对分离自南美白对虾的病原菌进行了检验,并结合16S r DNA序列分析,结果显示待检测病原均为弧菌属的细菌,与测序结果一致,说明该检测方法可用于弧菌属细菌的检测和诊断。     

60Co辐射诱变姬松茸突变株J3子实体不同部位的氨基酸分析研究

测定并比较了60Co辐射诱变姬松茸突变株J3与原菌株J1子实体不同部位的氨基酸含量.结果表明,除菌柄和盖皮外,姬松茸突变株J3子实体其它部位的必需氨基酸、儿童氨基酸、硫氨酸、支链氨基酸、鲜味氨基酸、芳香族氨基酸和甜味氨基酸均高于原菌株J1.姬松茸突变株J3子实体中谷氨酸含量占氨基酸总量的比例分别比原菌株J1、α-酪蛋白和卵清蛋白提高34.88%、56.68%和122.32%.     

Calreticulin promotes migration and invasion of nasopharyngeal carcinoma cells by inducing cell EMT

AIM:To observe the expression of calreticulin (CRT) in nasopharyngeal carcinoma tissues, analyze the significance of clinical pathology and the influence on epithelial-mesencymal transition (EMT) of CNE2 cells. METHODS:The expression of calreticulin was detected by immunohistochemistry in 52 nasopharyngeal carcinoma and 57 nasopharyngeal benign tissues, and the significance of clinical pathology was evaluated. The calreticulin gene-specific small interfering RNA was constructed, and then was transfected into the NPC cell line CNE2 using the cationic liposome method. The effect of CRT on the morphological changes of the CNE2 cells was observed under light microscope. The effect of CRT on the cell migration and invasion abilities of the CNE2 cells was detected by Transwell migration and invasion assays. The expression of EMT-related proteins E-cadherin, vimentin, transforming growth factor (TGF)-β and matrix metalloproteinase (MMP)-9 in the CNE2 cells was determined by Western blot. RESULTS:The positive expression rate of CRT in the benign lesion tissues was 19.29% (11/57), which was significantly increased in the nasopharyngeal carcinoma tissues as 82.69% (43/52). The expression rate of CRT was positively correlated with the stage of nasopharyngeal carcinoma and lymph node metastasis (P<0.05). Knockdown of CRT expression made the CNE2 cells showing a spindle shape to a flat, cobblestone-like epithelial state change, arranged more compact, and the migration and invasion abilities were significantly decreased (P<0.05). Knockdown of CRT expression resulted in significant increase in the protein expression of E-cadhe-rin, and the decreases in the protein expression of vimentin, TGF-β and MMP-9 in the CNE2 cells (P<0.05). CONCLUSION:Calreticulin expression in nasopharyngeal carcinoma is significantly higher and positively correlated with nasopharyngeal carcinoma stage and lymph node metastasis. Calreticulin promotes cell migration and invasion of nasopharyngeal carcinoma CNE2 cells by inducing EMT.     

氯虫苯甲酰胺对小菜蛾的室内毒力测定及防治效果

为研究5%氯虫苯甲酰胺悬浮剂（SC）对小菜蛾的防治效果,利用4种药剂进行了室内毒力测定和田间药效试验。室内毒力测定结果表明：药后48 h 5%氯虫苯甲酰胺SC对小菜蛾的毒力最高,LC50为0.563 0 mg·L-1|其次是10%多杀霉素水分散粒剂（WG）,LC50为0.856 7 mg·L-1|1.9%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐乳油（EC）和1%阿维菌素EC的毒力较低。田间药效试验结果表明：5%氯虫苯甲酰胺SC 1 000倍液对小菜蛾的防效最好,达到95.04%,显著优于其他3种药剂|10%多杀霉素WG 5 000倍液的防效次之,为82.01%|而1.9%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐EC 1 500倍液和1%阿维菌素EC 750倍液的防效较低,分别为71.67%和63.95%。     

在继代培养中贡蕉胚性悬浮细胞的分化能力和染色体数目的变化

将贡蕉[Musa acuminata cv.Mas(AA)]胚性悬浮细胞通过不同时间的培养后,对其体胚发生能力和染色体数目进行了分析。结果表明,随着培养时间的延长,贡蕉胚性悬浮细胞的体胚发生能力下降,继代培养1.5a的悬浮细胞体胚发生能力为1.76×104个/mLPCV(packed cell volume,细胞密实体积)胚性悬浮细胞,继代培养3a后下降到0.85×104个/mL PCV胚性悬浮细胞。整个胚性细胞悬浮系为混倍体,细胞的染色体数目变化从3个到70个不等,既有含染色体数目为整倍体的细胞,也含有大量染色体数目为非整倍体的细胞;继代培养1.5a时,含正常二倍体染色体数目的细胞比例为15.8%,继代培养3.0a时下降到9.7%。     

赣北二化螟卵寄生蜂寄生率动态及其对景观结构的响应

为探索南方稻区二化螟卵寄生蜂生防功能、评估卵寄生蜂在田间寄生动态并探讨对不同景观结构的响应,本文采用对比盆栽稻株叶片载卵、离体新鲜稻叶载卵和滤纸卵卡比对二化螟卵寄生蜂寄生率差异;利用盆栽稻株叶片载卵调查卵寄生蜂在稻田中的寄生率季节动态变化;在5月初、7月初和9月初分别调查了在不同景观样点二化螟卵寄生蜂寄生率,对不同空间尺度下（0.2,0.5,1.0,1.5,2.0 km）景观变量与卵寄生率进行模型分析,评估不同景观变量对卵寄生率的影响。结果表明,三种诱集方法差异显著,盆栽稻株叶片载二化螟卵被寄生的比率最高,其次为离体新鲜稻叶,滤纸卵卡效果最差。田间寄生动态调查表明,早稻卵被寄生比率偏低,中稻寄生率较高,在7月中旬二化螟卵被寄生率达到高峰（66.7%）,8月下旬以后,晚稻寄生率逐步下降。对不同空间尺度下景观结构变量与卵寄生率分析表明,1.5 km尺度下的林地与二化螟卵寄生蜂有着密切关系。低于40%林地面积比例时,二化螟卵寄生蜂寄生率随林地面积增加而降低;而在高于40%林地面积比例时,二化螟卵寄生率随林地面积增加而增加。综上所述,对于中国南方的小规模稻田景观,林地比例与二化螟卵寄生率有关,但相关效应并非单一地增加或减少的线性响应。研究结果可为南方稻区二化螟卵寄生蜂提供简便、有效的评估方法,并为综合利用二化螟卵寄生蜂控害功能,发展二化螟生防策略提供参考依据。     

蚕粉复合物对小鼠若干生理指标的影响

以小鼠为试验动物 ,对以全蚕粉为主要成分的降血糖复合物 (SPC)的生理作用和药效进行了探讨。结果表明 ,该复合物可以显著降低小鼠的食后血糖 ,并能提高小鼠抗疲劳能力和耐力 ,对小鼠的生长发育、繁殖等无不良影响 ,未发现有任何毒副作用。     

禁牧对退化草地恢复的作用

草地是我国重要的农业自然资源之一,但目前草地退化的现象十分严重,超载过牧是主要原因之一。本文就针对草地退化提出的围封禁牧措施对草地植被、土壤及草地生态系统恢复过程中的作用进行综述,发现适度放牧对草地恢复是必需的,但采取长期围封禁牧恢复与重建草地的做法不可取,围栏封育并非恢复退化草地的万全之计。建议在我国要因地制宜,根据草地的退化程度,采取合理的划区轮牧强度和放牧时间,与退化草地生态恢复的围封措施结合,以达到既能恢复退化草地,又可收获畜产品的双赢目的,实现草地生态系统持续平衡发展的目标。