伪狂犬病病毒Ea株UL18基因的克隆、序列分析及表达

本研究以伪狂犬病病毒Ea株基因组DNA为模板,PCR扩增含ULl8全长基因的片段并克隆至pMDl8-T载体,采用双脱氧末端终止法测序.序列分析显示ULl8全长891 bp,可编码297个氨基酸.将该基因亚克隆到原核表达栽体pQE.82L的6×His标签下游,获得原核表达质粒pQE-UL18,转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导在大肠杆菌中成功表达,表达的融合蛋白6 × His-UL18的分子量约为33 ku.Western blot证实,表达的融合蛋白能与抗6×His的单抗发生特异性反应.进一步将UL18基因插入真核表达栽体pEGFP-N1中EGFP基因的5'端,获得与EGFP融合表达的真核表达质粒pEGFP-UL18,转染HeLa细胞,通过激光共聚焦显微镜观察发现,转染后24 h融合蛋白EGFP-UL18主要定位于细胞浆,仅有部分定位于细胞核,而48 h时则主要定位在细胞核.但对照载体pEGFP.N1转染细胞的荧光一直呈弥散型分布于整个细胞中.     

绒山羊绒毛品质遗传研究进展

绒毛品质不仅影响绒山羊养殖的经济效益,还影响绒毛纺织品的质量。近年来,随着产绒量的提高,绒毛品质有下降趋势,为了提高生产效益,在生产过程中提高绒毛品质势在必行。绒毛品质是绒山羊育种中重要的选择参数,而控制绒毛品质的主要性状是数量性状,通过数量遗传学和分子遗传学寻找控制数量性状的主效基因,从而研究其生长机理和控制绒毛生长的基因的表达机制。作者综述了近年来有关绒毛品质的研究成果,其中包括通过表型选择来提高绒毛品质,且找到控制绒毛品质性状的HOX、BMP、KAP基因和色素基因等,还有寻找控制目标性状相应的QTL和对不同序列的SNPs进行GWAS分析,通过基因型的选择来提高绒毛品质,这些研究为提高绒毛品质奠定了理论基础,也为今后研究绒毛品质的遗传因素提供借鉴。     

奶牛酮病红细胞膜上ATP酶活性变化的研究

为了深入研究酮病的发生机理,选择荷斯坦奶牛作为实验动物,应用酮粉法和改良式水杨醛比色法随机检测分组,Ⅰ组为10头对照牛、Ⅱ组为10 头阳性牛。应用试剂盒比色法测定红细胞膜上ATPase 的活性变化。结果表明,阳性组和对照组相比,红细胞膜上ATPase的活性显著下降(P <0.05)。说明奶牛酮病影响红细胞膜上ATPase的活性变化。     

内蒙古寒冷干旱地区苜蓿栽培技术模式

苜蓿是内蒙古寒冷干旱地区重要的牧草之一,在近几年的农业结构调整和生态治理中,得到了快速发展,但缺乏规范的苜蓿种植管理技术。本文阐述的苜蓿栽培技术模式,是在林西县多年苜蓿生产实践基础上产生的,而后又在生产实践中不断改进完善后形成的。该技术模式着重介绍了在内蒙古寒冷干旱地区建植苜蓿人工草地时需着重考虑的四个方面,即苜蓿品种的选择原则、播种要点、田间管理及收获技术。     

液相色谱-串联质谱法同时检测鸡肉中61种抗菌药物

为建立固相萃取结合液相色谱-串联质谱同时测定鸡肉中磺胺类、喹诺酮类、大环内酯类药物残留的分析方法,通过准确称取2 g鸡肉样品,经PBS缓冲液提取,以Agilent Pleax PCX固相萃取柱净化,最后以液相色谱-串联质谱进行检测.结果显示:在最优试验条件下测得磺胺类、喹诺酮类、大环内酯类抗菌药物线性良好,相关系数(R...     

Application of non-structural protein ELISA kits in nationwide FMD surveillance in pigs to demonstrate virus circulation in Taiwan

Large scale surveillance of FMD non-structural protein (NSP) antibody in pigs was conducted to monitor for FMD virus circulation in Taiwan using Ceditest and UBI NSP ELISA kits after recurrence of FMD in 2009. A total of 53,759 serum samples were collected from pigs in the auction markets in 2009. There were 43 farms with positive FMD NSP reactors to both NSP ELISA tests in the nationwide surveillance. After tracing back, clinical examination and the NSP ELISA testing using both Ceditest and UBI on 14 follow-up serum samples from all the herds with confirmed NSP reactors in 2009, there were 4 farms classified as positive on follow-up testing criteria. In this surveillance, we have demonstrated that the NSP ELISA tests of outbreak farms followed by clinical and serological investigation could be used to detect FMD circulation in the pig population in Taiwan even while the national compulsory vaccination program is ongoing.     

猪链球菌2型诊断与防制措施

<正>猪链球菌(Streptococcus suistype 2,SS2)已经成为危害养猪生产及人类健康的重要人畜共患病。可引起猪脑膜炎、关节炎、心内膜炎及猝死等;致人败血症、心内膜炎、脑膜炎,严重的致人链球菌毒素休克综合征而死亡。1998年7月江苏南通某地猪群暴发猪链球菌2型,同时导致21     

紫苏-月苋草复合提取物对肉种鸡生产性能的影响

试验选用1日龄AA肉用种鸡17000羽,随机分成对照组(饲喂基础日粮)和试验组(在基础日粮中添加0.25g/kg紫苏-月苋草复合提取物),研究紫苏-月苋草复合提取物对肉种鸡生产性能和繁殖性能的影响。试验结果表明:添加该复合提取物后,试验鸡育成期体重、均匀度显著提高,死淘率降低,产蛋率和平均蛋重有较大的提高,受精率和入孵蛋健雏率分别提高1.04个百分点和5.35个百分点。     

磺胺二甲嘧啶单克隆抗体的制备及特性鉴定

采用重氮化法合成磺胺二甲嘧啶(SM_2)-人血清白蛋白(HSA)免疫抗原和SM_2~-卵清白蛋白(OVA)包被抗原。经紫外光谱扫描法确认SM_2与载体蛋白偶联成功；经计算SM_2与HSA、OVA的结合比分别为9：1和15：1。利用杂交瘤技术和有限稀释法经过5次亚克隆,得到三株特异性稳定分泌SM_2抗体的杂交瘤细胞,经鉴定该单克隆抗体免疫球蛋白亚类为IgG_1,为入链,分子量为162Ku,染色体数目90条左右,亲和常数为6．1×10~(12)M~(-1)。与其他四种磺胺药和两种载体蛋白HSA、OVA均无交叉反应。     

卵黄免疫球蛋白的应用进展

卵黄免疫球蛋白是一种来源丰富的多克隆抗体。由于卵黄抗体不能激活哺乳动物的补体系统,不与哺乳动物的Fc受体、类风湿因子、葡萄球菌蛋白A和葡萄球菌蛋白G结合,因而作为诊断试剂具有较高的敏感性。卵黄抗体具有良好的免疫活性,作为防治药物具有见效快,疗效高,无毒副作用,无残留等优点,目前卵黄抗体已得到了广泛应用。本文综述了卵黄抗体在动物病毒性疾病、细菌性疾病和寄生虫病诊断、预防和治疗等方面的应用及前景。