DNA Barcoding:An Effective Tool for Species Identification of Lepidopteran Oak Pests

[Objective] The paper was to improve the efficiency and accuracy of early forecast of Lepidopteran oak-infesting pests.[Method] DNA barcoding technique was established for quick species identification using mitochondrial cytochrome C oxidase subunit Ⅰ(COⅠ) as the standard gene.This barcoding technique was used to amplify and sequence genomic DNA samples from eggs and pupae of 11 species of Lepidopteran pests collected from oak.[Result] The DNA barcoding standard genes of 594-708 bp were determined from eggs and pupae of Lepidopteran insects.There were differences of 0-2 bases in DNA barcode sequences between conspecific eggs and pupae,with the sequence identity of 99.7%-100%.The average content of A,T,G and C of DNA barcode sequences from Lepidopteran insects were 30.7%,38.5%,14.9% and 15.9%,respectively.The obtained DNA barcode sequences had 91.4%-100% identity and 0-8.6% difference degree with GenBank-deposited DNA barcode sequences from organisms of the genetically-closest relationship.Among them,DNA barcode sequences from egg and pupa samples of 10 Lepidopteran insects(No.1-20) had 99%-100% identity and 0-1.0% difference degree with homologous sequences in GenBank database,while the remaining samples(No.21-22) had high difference degree(8.6%) with homologous sequences.[Conclusion] The established DNA barcoding technique is an effeetive tool for species identification of Lepidopteran pests using genomic DNA from eggs and pupae of Lepidopteran insects.     

高龄大熊猫多器官衰竭的病理学观察

本文观察了1只38岁高龄的大熊猫多器官衰竭的病理学变化。病理剖检显示，该熊猫主要表现为实质器官充血、水肿和出血性变化；组织病理学检查发现，全身实质器官（除心、肺、脑外）均发生明显萎缩，胃、肠、肝、胰、肾等发生水肿变性或出血；此外，还观察到心肌纤维坏死后的瘢痕形成。结果表明，老龄大熊猫的多器官衰竭的病理学变化与其他动物相似；高龄大熊猫也易患心血管系统疾病，且具有较经的组织修复能力。     

从动物毛中提取DNA研究初探

利用蛋白酶Ｋ分解毛发蛋白，并使用酚和氧仿除去蛋白质杂质方法提取毛中ＤＮＡ。结果测量获得的数据和曲线表明：动物脱落毛发以及从保存多年标本获得的毛发均可用来提取到具有一定纯度和数量的ＤＮＡ，完全可以满足聚合酶链式反应（ＰＣＲ）所需。     

氟化物对鸡甲状腺激素代谢的影响

选用 1日龄蛋鸡 2 5 0只 ,随机分为 5组 ,每组 5 0只 ,饲喂相同的全价日粮。第 1组为正常对照组 ;第 2、3、4、5组在日粮中添加不同量的氟化钠 ,使日粮中氟的含量分别为 5 0 0、10 0 0、15 0 0、2 0 0 0 m g/ kg。试验期 15 0 d。每隔 30 d采集血样 ,测定血清中氟、甲状腺激素 (T3、T4 )的含量 ,观察试验鸡的临床表现。结果表明 ,本试验成功地复制出了不同程度的鸡慢性氟中毒模型 ;各氟中毒组鸡血清中 T4 含量在整个试验期内均低于对照组 ,且呈明显的剂量—效应关系 ;在早期 ,各中毒组血清 T3含量不同程度地高于对照组 ,而中、后期则低于对照组 ,且与血清中氟含量呈显著的负相关(r=- 0 .85 3,P<0 .0 1)。由此可见 ,氟中毒明显破坏机体内甲状腺激素的代谢 ,影响甲状腺机能的正常发挥。     

三聚氰胺对小鼠睾丸病理损伤的观察

本研究采用组织病理学和免疫组织化学技术观察了三聚氰胺（Melamine,MA）对雄性小鼠睾丸的毒性作用,以深入揭示三聚氰胺的毒性作用及其机理。将25只28日龄SPF雄性昆明小鼠随机均分为5组,1组为对照组,其他4组为试验组。4个试验组分别按下述不同剂量灌服三聚氰胺：0.6 mg/kg（bw）/d（每日每公斤体重0.6 mg）、3.0 mg/kg（bw）/d、15.0 mg/kg（bw）/d和17.5 mg/kg（bw）/d,用玉米油做溶剂;空白对照组每日灌服等量玉米油。连续灌胃30天后剖检小鼠并取其睾丸组织进行固定、切片和染色,观察睾丸的组织病理变化。同时,采用免疫组织化学方法检测睾丸组织中增殖细胞核抗原（PCNA）的表达量。观察结果表明,与对照组相比,试验组不同剂量浓度的三聚氰胺对小鼠睾丸组织造成不同程度的病理损伤;三聚氰胺也会在一定程度上影响睾丸组织中PCNA的表达。研究结果表明三聚氰胺对于小鼠生殖系统有明显毒性作用。     

犬瘟热、犬细小病毒胶体金二联检测卡研制

本研究通过细胞融合、间接ELISA方法筛选出4株可稳定分泌犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)和犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)单克隆抗体的杂交瘤细胞株,以此为基础研制了一种可同时检测CDV和CPV的胶体金二联检测卡,并对其特异性、灵敏度及准确性进行了测试。结果显示：4株杂交瘤细胞可稳定传代,分泌的单克隆抗体纯度高,效价均在1:320以上。制备的胶体金二联检测卡特异性强,只与CDV和CPV产生特异性条带,而不与其他犬类病毒反应;灵敏度高,最低检测限可达到10²拷贝/μL;准确性好,与荧光定量PCR结果的符合率高于88.0%,与市面上单一病毒检测卡的符合率高于97.2%。结果表明,本研究制备的CDV、CPV胶体金二联检测卡特异性强、灵敏度高、准确性好,兼具操作简便、肉眼可判读、结果易保存和无需特殊仪器设备等优势,可用于两种疾病的临床快速诊断和大规模检测工作。     

Ge—132在蛋鸡体内的药代动力学

给24只蛋鸡单剂量灌服Ge-132,分别于0.25～12小时采集血液、肝脏、肾脏、脾脏、卵巢和卵子,用石墨炉原子吸收分光光度法测定样品锗含量,进行药时曲线拟合和动力学参数分析。结果表明,血液中锗有2只鸡符合一级吸收单室开放模型,药代动力学参数为T_(1/2ka)0.2562±0.0302h,T_(1/2k) 3.9657±0.7075h,Tp1.1556±0.1332h,Cmax 2.1621±0.4165uσ/ml,AUC10.6164±0.1748mg/L.o;另4只鸡符合一级吸收双室开放模型,参数为T_(1/2k) 0.3996±0.2606h,T_(1/2α) 0.8513±0.1626h,T_(1/2β)4.7368±0.3652h,Tp1.0116±0.4574h,Cmax 2.6134±0.4574μg/ml,AUC13.3926±3.4651mg/Lh,在各种组织器官中均呈现一级吸收单室开放模型,其消除速率以脾脏最快,依次为脾>肝>肾>卵巢>卵子,表明了蛋鸡体内的Ge-132代谢在个体和不同器官隔室间存在很大差异。     

鱼类神经坏死病毒纳米探针的制备与特征分析

为了快速检测鱼类神经坏死病毒,本研究设计了病毒特异性的发夹型探针,经硫醇修饰后与纳米银溶胶结合,制备了鱼类神经坏死病毒纳米探针（Ag-NNV）,并使用透射电镜、多功能酶标仪、表面增强拉曼光谱仪等对纳米探针Ag-NNV的表征及发夹型探针在纳米银粒子表面的覆盖率进行了测定和分析。结果表明,裸露的纳米银粒子为球形,平均直径50 nm;制备的纳米探针颗粒为球形,平均直径90 nm。纳米银粒子和纳米探针在溶液中均具有良好的分散性。平均每个纳米银粒子表面结合发夹型探针约100条,单位表面积的探针覆盖量为0.56 pmol/cm2。该纳米探针制备简便,适合用于表面增强拉曼散射法对鱼类神经坏死病毒进行快速检测。     

复杂盐碱生态条件的人工模拟及其对羊草生长的影响

将ＮａＣｌ、ＮａＨＣＯ３、Ｎａ２ＳＯ４和ＮａＣｏ３按不同比例混和,模拟出３０种盐度和ＰＨ各不相同的盐碱生态条件,并用以处理并草苗。测定羊草苗的存活率、分蘖数、根戏数及相对生长率等生长指标;分析盐度和ＰＨ对羊草生长失作用及其盯关性。结果表明：３０处处理均匀覆盖了总盐度５０－３５０ｍｍｏｌ／ＬＰＨ７．１４－１０．８１范围内的各处盐碱条件,羊草的各项生长指标均随盐浓度及Ｐ增高而下降;单纯高ＰＨ域盐度对羊     

深圳市销售猪肉品中磺胺二甲嘧啶残留的调查

2005年我们对深圳市的超市、农贸市场销售的猪肉品(含猪肌肉、猪肝)进行磺胺二甲嘧啶残留的监测,共抽查猪肉品样品754份,检出阳性样品15份,阳性率为2.0%.